摘要：目的评估探针熔解曲线法检测石蜡包埋组织诊断耐药结核病的临床价值。方法采用横断面研究设计,回顾性收集首都医科大学附属北京胸科医院2018年1月至2019年12月所有确诊结核病住院患者4551例。以表型药敏试验和GeneXpert结核分枝杆菌及利福平耐药(Xpert MTB/RIF,以下简称"Xpert")检测为金标准分析探针熔解曲线法的准确性,并评估该技术作为常规耐药诊断方法的补充,提高耐药结核病诊断阳性率的临床价值。结果以表型药敏试验结果为金标准,探针熔解曲线法检测利福平、异烟肼、乙胺丁醇和氟喹诺酮耐药的灵敏度分别为14/15、95.7%(22/23)、2/4、8/9;特异度分别为92.0%(115/125)、93.2%(109/117)、90.4%(123/136)、93.9%(123/131);总符合率为92.1%(95%CI:89.6%~94.1%),一致性检验Kappa值为0.63(95%CI:0.55~0.72),以Xpert检测结果为标准,该技术对利福平耐药检测的灵敏度为93.6%(44/47),特异度为100%(310/310),符合率为99.2%(95%CI:97.6%~99.7%),一致性检验Kappa值为0.96(95%CI:0.93~0.99);在4551例结核病确诊患者中联合应用探针熔解曲线法检测后,获得有效耐药信息的患者比例从83.3%提高到87.8%(P<0.01);利福平、异烟肼、乙胺丁醇、氟喹诺酮耐药、耐多药以及准广泛耐药检出人数分别增加了3.2%、14.7%、22.2%、13.7%、11.2%以及12.5%。结论探针熔解曲线法进行结核病耐药诊断具有良好的准确性,可以作为常规耐药诊断方法的补充,有效提高耐药结核病诊断阳性率。

摘要：目的应用分子信标探针检测结核杆菌耐异烟肼kat G463condon点突变,并与测序结果比较以验证该检测方法。方法运用软件对Beacon designer设计,katG基因包含463condon的分子信标,建立其扩增体系及分子信标芯片检测方法;对扩增产物测序并作比较。结果通过CDC相机观测到结核标准株及耐异烟肼PCR产物与分子信标杂交后荧光信号区别明显;16株耐异烟肼组与10株H37RV标准株对照组荧光信号强度比较,耐异烟肼组463condon突变检出率为37%,分子信标检测方法与测序法符合率达93%。结论分子信标技术是一种具有高灵敏核酸点突变检测技术;分子信标芯片检测方法与测序法符合率较好。

摘要：目的探索和描述耐多药结核病患者未纳入项目治疗的比例及其原因。方法“十一五”国家重大科技专项课题组在不同筹资模式的5个研究地区（免费治疗点：黑龙江省大庆市、浙江省衢州市、河南省濮阳市；仅药品免费治疗点：天津市；患者自付治疗点：重庆市万州区），选择2010年3月1日至2012年2月29日期间，经传统药敏试验确诊的全部耐多药结核病患者235例作为研究对象。邀请不同领域专家设计半结构式问卷，通过预调查进行修改和完善，内容包括患者姓名、性别、年龄、职业、收入、登记分类、是否纳入项目治疗、未纳入项目治疗原因（经济原因、身体原因、患者顾虑、交通原因、医生态度、医生判断、不可抗因素、其他）等15项内容，由受过培训的医务人员，以面对面或电话访谈患者的方式填写。填写完毕经与患者病历记录复核、以及与当地社区医生或知情者印证后收回。共发出问卷235份，经现场复核后收回有效问卷235份。结果确诊的235例耐多药结核病患者中，未纳入项目治疗者119例，未纳入项目治疗者占50．6％。不同筹资模式的地区未纳入项目治疗的比率分别为：免费治疗点39．0%（46／118），仅药品免费治疗点50．0％（25／50），患者自付治疗点71．6％（48／67），诊疗费用减免程度越高，未纳入项目治疗的比例越低（线性趋势检验x2=17．809，P〈0．01）。未纳入项目治疗的原因中，免费点主要为死亡（37．0％，17／46）、主观拒绝（21．7％，10／46）、失去联系（17．4%，8／46）；仅药品免费点主要为失去联系（64．0%，16／25）、迁出（外地治疗）（16．0％，4／25）和主观拒绝（12．0％，3／25）；自付点主要是经济困难（33．3％，16／48）、死亡（22．9％，11／48）和失去联系（16．7％，8／48），不同筹资模式耐多药结核病患者未纳入项目治疗原因差异有统计学意义（x2=62．326，P=0．000）。不同筹资模式的各种未纳入项目治疗的原因中，需要解决的重点不同：免费点为主观拒绝和失去联系、仅药品免费点为失去联系、自付点为经济困难和失去联系，分别可以减少39．1％（18／46）、64．0％（16／25）和50．0％（24／48）的未纳人项目治疗比例。结论耐多药结核病患者未纳入项目治疗比率随着诊疗费用减免幅度的增加而下降；除医疗费用引起的经济困难外，研究提示未纳入项目治疗还可能与失去联系、等待诊断过程中的死亡、主观拒绝、严重合并症等多种原因有关。

摘要：目的:研究郑州市地区60岁及以上复治肺结核患者耐药特点及影响因素,为临床结核病防治提供参考.方法:采用横断面调查设计,选取2021年1月—12月郑州市地区60岁以上的复治肺结核患者208例为研究对象,分析老年复治肺结核患者的耐药率,根据药物敏感性试验结果分为耐药组和敏感组.另收集患者的临床特点资料、胸部CT检查结果及各项实验室检查指标,通过Logistic回归分析60岁及以上复治肺结核患者发生耐多药的相关因素.结果:208例60岁及以上的复治肺结核患者中,耐药患者85例(40.87%),其中耐多药21例,多耐药28例,单耐药36例.耐药组和敏感组性别、年龄、体重指数(BMI)、高血压、糖尿病、肺野数比较,差异无统计学意义(P>0.05);耐药组居住地、既往用药不规律、既往治疗中断、肺结核空洞与敏感组比较,差异有统计学意义(P1,P<0.05),居住地(城市)是60岁及以上复治肺结核病患者发生耐药的保护因素(OR<1,P<0.05).结论:郑州市地区60岁及以上复治肺结核患者耐药率较高,其中居住地、既往用药不规律、既往治疗中断、肺结核空洞均是复治肺结核病患者发生耐药的影响因素.

摘要：目的建立结核分枝杆菌耐药相关基因多重PCR反应体系，评估该体系以临床分离株DNA和痰菌DNA为模板扩增耐药相关基因的成功率。方法常规提取结核分枝杆菌临床分离株（47株）及涂阳肺结核患者（21例）痰菌DNA。根据目前研究已发现的结核分枝杆菌耐药相关基因合成引物，建立2个多重PCR体系以扩增目的基因。扩增片段经测序证实后，计算该体系用于两种样本的扩增成功率。结果针对临床常用8种抗结核药物，选取结核分枝杆菌中rpoB、katG、inhA、embB、gyrA、rpsL、Ⅲ、P担共8个耐药相关基因设计合成引物。建立2个多重PCR体系扩增8个耐药基因，该体系扩增47株结核分枝杆菌l临床分离株DNA和21例菌阳肺结核患者痰菌DNA的成功率分别为100．0％（47／47）和76．2％（16／21）。结论本研究建立了高效扩增8个结核分枝杆菌耐药基因的多重PCR体系，结果对进一步研发结核病耐药分子诊断产品具有重要意义。