摘要：目的监测2008年我国不同地区15所教学医院医院感染患者中分离的肠杆菌科细菌的耐药性。方法按设计方案收集非重复的1 357株医院感染患者中分离的肠杆菌科细菌。菌株经中心实验室复核后,采用琼脂稀释法测定15种抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC),数据输入WHONET5.6软件进行统计分析。结果大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌敏感率较高的药物有美罗培南(97.6%～100%)、帕尼培南(79.8%～98.4%)、亚胺培南(64.9%～98.1%)、厄他培南(91.3%～97.4%)、哌拉西林-他唑巴坦(87.2%～97.4%)、头孢美唑(82.1%～97.0%)和阿米卡星(89.9%～93.8%)。肠杆菌属细菌敏感率较高的抗菌药物有美罗培南(98.7%)、帕尼培南(96.4%)、亚胺培南(95.4%)和阿米卡星(85.7%)。弗劳地枸橼酸杆菌和黏质沙雷菌敏感率较高的药物有碳青霉烯类抗生素(92.0%～100%)、哌拉西林-他唑巴坦(93.1%～99.1%)、阿米卡星(89.0%～94.3%)和头孢吡肟(86.2%～93.1%)。结论碳青霉烯类抗生素、哌拉西林-他唑巴坦和阿米卡星对医院分离的肠杆菌科细菌保持了较高的抗菌活性,头孢美唑对大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌表现出良好的抗菌活性。

摘要：目的研究北京大学第三医院近年来血流感染的微生物学和流行病学特征。方法回顾性分析2005年1月1日至2007年12月31日的全部血液培养检查中培养阳性的患者的临床资料和微生物学资料。成组设计资料构成比的差异比较采用z。检验。结果3年中共对3795例患者和5138个病程进行了血液普通细菌培养，标本共6488套。按有氧瓶统计，阳性率为9．9％。住院患者3年平均血流感染发生率为40．8／1万。共检出导致感染的菌株593株，其中医院内获得感染病原483株，占81．5％。全部菌株和院内感染菌株构成比：革兰阳性菌分别占38．5％和42．0％，革兰阴性菌分别占54．7％和49．9％，真菌（全部是假丝酵母菌）分别占6．8％和8．1％。全部菌株中，大肠埃希菌占25．3％，血浆凝固酶阴性葡萄球菌占18．8％，金黄色葡萄球菌和肺炎克雷伯菌分别占7．1％和7．4％，肠球菌属占8．3％，铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌分别占3．2％和2．2％，厌氧菌占0．7％。复数菌感染共10例，占全部感染的1．7％。院内感染中链球菌（χ^2=9．240，P=0．002）和大肠埃希菌（χ^2=23．609，P〈0．01）明显多见于非ICU病房，而假丝酵母菌则明显多见于ICU病房（χ^2=5．498，p=0．019）。人院至标本留取时间差为15．1（大肠埃希菌）～29．7d（鲍曼不动杆菌）。3年中主要菌株的耐药性无明显变化。结论北京大学第三医院住院患者血流感染发生率为40．8／1万。致病菌株以革兰阴性菌为主。

摘要：目的建立可同步检测结核分枝杆菌katG和ropoB基因突变的等位基因特异性多重聚合酶链反应(MASPCR)的方法,以快速检测结核分枝杆菌对利福平(RFP)和异烟肼(INH)的耐药性。方法根据结核分枝杆菌katG和rpoB基因序列,分别设计特异性寡聚核苷酸引物,采用MASPCR技术,分别检测katG基因315位点和rpoB基因中531、526和516三个最常见的突变位点。结果19株INH敏感株中均未发现katG基因315位点的突变,耐药株中发现有79.2%(61/77)的菌株存在突变;15株RFP敏感株中未发现rpoB基因突变。MASPCR方法可检测出81.5%(66/81)的利福平耐药株。结论MASPCR方法对katG和rpoB基因的同步检测有较高的敏感性和特异性,有望用于耐药结核分枝杆菌的快速检测。

摘要：背景肺炎支原体(MP)是儿童社区获得性肺炎的主要病原体,对目前常用治疗药物——大环内酯类抗生素的耐药率有升高趋势,而传统检测MP耐药株的方法耗时耗力。目的建立一种快速诊断MP感染及耐药表型的新方法。方法采用实时荧光定量PCR技术,以23S rRNA为靶序列,设计不同基因型探针及引物,构建阳性质粒,建立标准曲线。结果实时荧光定量PCR检测敏感2063A质粒和耐药2063G质粒的下限分别为6和60拷贝数,特异性实验结果显示,仅生殖支原体出现扩增。与23S rRNA巢式PCR测序结果相比,实时荧光定量PCR鉴定43株MP临床分离株2063位点等位基因的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值均为100%。12份鼻咽拭子标本实时荧光定量PCR MP阳性检出率为10/12,耐药率为4/12,1份标本同时发现2063A和2063G位点。结论本研究初步建立了一种快速诊断MP感染并判断其耐药基因型的实时荧光定量PCR方法,具有较高的灵敏度。

摘要：目的构建快速检测出结核分枝杆菌耐药基因的三重荧光定量PCR体系。方法分别针对结核3个主要耐药基因rpoB,katG,rpsL设计特异性引物与TaqMan MGB探针,构建并优化单管同时检测此3个突变点的三重荧光定量PCR体系,验证方法的特异度、敏感度和稳定性。结果成功构建了三重荧光定量PCR体系,可以检测到10CFU/μL结核杆菌。结论该实验建立结核耐药基因三重荧光定量PCR具有良好的特异度,敏感度和重复性。该方法对快速检测结核耐药有重要意义。

摘要：目的了解综合重症监护室(ICU)医院感染及相关导管感染发生情况,以便加强管理。方法采用目标性监测方法,确定监测方案,设计ICU医院感染个案监测内容和日志登记表,于2012年5月—2013年5月对综合ICU住院患者进行前瞻性调查,并对监测结果进行统计分析。结果共调查868例患者,发生医院感染65例次,例次感染率为7.49%;患者日感染率为21.49‰,调整日感染率为7.26‰。呼吸机相关性肺炎、导尿管相关尿路感染、中心静脉插管相关血流感染的日感染率分别为23.91‰、3.46‰、6.12‰。医院感染部位以呼吸道(占67.69%)为主。分离病原菌65株,以革兰阴性杆菌为主(53株,占81.54%),多呈现多重耐药性。结论综合ICU医院感染率高,各类相关导管的使用是造成ICU住院患者医院感染重要的因素。ICU目标性监测是一种科学、有效的方法,能及时反映感染控制工作的薄弱环节,有利于针对性地做好医院感染控制工作。

摘要：目的建立结核分支杆菌对链霉素（SM）和乙胺丁醇（EMB）耐药基因突变的快速检测方法。方法根据结核分支杆菌标准株H37Rv序列，自行设计针对rpsL和embB基因常见耐药突变的系列寡核苷酸探针，制成膜芯片，并对64例结核分支杆菌临床株的基因突变情况进行检测。结果在34株SM耐药菌中，有25株被检出在rpsL基因分析部位发生突变，检出率为73．5％（25／34），其中23株（67．6％）为第43位密码子AAG→AGG突变，2株（5．9％）为第88位密码子AAG→AGG突变；在32株EMB耐药菌中，有19株在embB基因分析部位发生突变，检出率为59．4％（19／32），其中12株（37．5％）为ATG→GTG突变；6株（18．8％）为ATG→ATA突变；1株（3．1％）为ATG-＊CTG突变。膜芯片检出的突变与基因测序结果一致。结论用膜芯片检测结核分支杆菌对链霉素和乙胺丁醇的耐药性，具有较高的特异性和敏感性，可作为常规药敏方法的补充，用于指导开展早期、有效的临床化疗。

摘要：目的分析嗜麦芽窄食单胞菌对临床常用抗菌药物的耐药性,探讨明确嗜麦芽窄食单胞菌Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ类整合子的存在情况以及所携带的耐药基因盒,为本地区更好地预防和控制嗜麦芽窄食单胞菌感染性疾病提供帮助。方法收集临床分离的51株嗜麦芽窄食单胞菌采用微量肉汤稀释法测定嗜麦芽窄食单胞菌对17种抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC)。根据GenBank注册的基因序列设计引物,PCR扩增Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ类整合子。对整合子阳性菌株扩增其可变区产物进行测序分析,所得结果在GenBank数据库中进行同源性比对,了解可变区中含有基因盒的信息。结果 (1)51株嗜麦芽窄食单胞菌标本来源分布以痰液最多,为41株,占80.39%,感染人群主要以60岁以上年龄段为主,为38株,占74.5%。病房分布:重症监护室(ICU)20株,占39.22%;呼吸内科13株,占25.49%;干部病房6株,占11.76%,所占比例较大。(2)药敏结果显示嗜麦芽窄食单胞菌对多数常用抗菌药物耐药性较高,部分菌株表现出对9种以上抗菌药物的多重耐药。(3)51株嗜麦芽窄食单胞菌PCR基因扩增结果7株菌Ⅰ类整合子阳性(13.7%),没有检测到Ⅱ、Ⅲ类整合子,Ⅰ类整合子可变区携带的耐药基因包括aacA4、aadA1、catB8、dfrA17和aphA15五种。结论嗜麦芽窄食单胞菌对多数常用抗菌药物耐药性较高,部分菌株表现出多重耐药性。Ⅰ类整合子是嗜麦芽窄食单胞菌多重耐药的重要因素之一。