摘要：抗菌肽(AMPs)是一种小分子多肽,具有广谱抗菌、抗病毒、抗寄生虫、抗肿瘤细胞的作用,可促进动物生长发育,提高生产性能。因此,在替抗背景下,AMPs有望成为新型绿色“抗生素”。但天然AMPs存在抗菌活性低、毒性高、稳定性差等问题,限制了在畜禽生产中的应用。基于生物信息学方法,改造现有AMPs,可有效解决上述问题。文章综述了AMPs分子改造内容,常用的生物信息学分子设计和预测工具及改造AMPs的方法,为获得高活性且稳定的新型AMPs提供理论依据参考。

摘要：试验旨在探讨黑水虻抗菌肽制备影响因素,优化黑水虻抗菌肽的制备工艺。以提取率和对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌抑菌圈直径为指标,筛选出中性蛋白酶为试验用酶;基于单因素试验结果,以超声功率、处理时间、酶解温度和pH等4个因素为自变量,以提取率为响应值,进行4因素3水平响应面优化试验。结果表明,超声功率53 W、超声时间23 min、酶解温度52℃、pH 7.3为黑水虻抗菌肽制备最佳工艺,该工艺抗菌肽制备率为(26.16±0.94)%,对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌圈直径分别为(16.82±1.27)mm和(18.71±0.86)mm。结果表明,该工艺下抗菌肽制备率高,抑菌效果良好,能够为黑水虻高附加值产品的产业化开发提供参考。

摘要：为了进一步研究杂合抗菌肽KL-21的抗菌活性和探索其应用潜力,试验测定了KL-21和抗生素对4种常见致病菌的抑菌活性,同时评估了KL-21与4种常见抗生素联用的协同效果。试验采用微量倍比稀释法测定KL-21和4种抗生素的最小抑菌浓度(MIC)及最小杀菌浓度(MBC),利用棋盘试验法测得部分抑菌浓度指数(FIC)评估联用后的协同效果。结果表明,KL-21对4种致病菌均有良好的抑菌活性,与卡那霉素、庆大霉素、链霉素及氯霉素联合使用时具有协同或部分协同作用,可以将抗生素体外抑菌试验的MIC减少至1/16~1/2,为人工设计杂合抗菌肽KL-21的实际应用提供了参考,为畜牧生产以及动物疫病治疗提供更多选择。

摘要：目的研究新型自组装多肽CR-16的性质及其对于大肠杆菌的抑菌活性,为细菌感染的治疗提供实验依据。方法在抗菌肽BuforinⅡ和LfcinB结构基础上,设计并合成了新型抗菌肽CR-16,采用粒径、电位、透射电镜、X线衍射仪等手段表征该抗菌肽的性质。在测定临界胶束浓度的基础上,采用原子力显微镜、圆二色谱法等对分子的自组装性能进行考察。采用二倍稀释法测定该肽的最小抑菌浓度,并运用透射电子显微镜分析其对细菌外膜的影响。结果抗菌肽CR-16能够成功自组装,自组装体呈现规则圆球状,性质稳定。抑菌实验表明,CR-16对3种大肠杆菌的生长均有抑制作用。值得重视的是,CR-16对产新德里金属-β-内酰胺酶1(NDM-1)的耐碳青霉烯类大肠杆菌生长有明显抑制作用,显示了其在抗细菌感染及抗耐药菌感染中的良好前景。结论CR-16抗菌肽可以实现自组装,并且对大肠杆菌具有抑菌活性。

摘要：抗生素耐药性问题严重威胁着人类健康,是全球公共卫生安全的主要威胁之一。具有广谱抗菌活性、多样杀菌机制的抗菌肽作为近年来的研究热点,被认为是极具潜力的抗生素替代品。目前已有部分抗菌肽正在进行用于预防和治疗细菌病原体感染的临床试验,然而,较低的生物利用度及溶血活性等可能存在的毒副作用给天然抗菌肽的临床转化带来了障碍。因此,通过介绍抗菌肽在临床上的研究进展,并总结抗菌肽药物开发过程中的挑战及开发策略,以期为抗菌肽的药物开发提供新的思路。

摘要：抗菌肽(AMPs)是存在于生物体内有抗菌活性的两亲性多肽。AMPs可通过参与调控创面的炎症反应,促进细胞增殖、迁移,促进新生血管生成及调控创面组织重塑等多种方式促进糖尿病创面愈合,现已逐渐成为创面愈合领域有广阔前景的一类药物。本文对AMPs的抗菌机制、促糖尿病创面愈合机制、基于创面愈合的AMPs优化设计进行综述,讨论开发有效的新型AMPs的未来前景。

摘要：利用重组毕赤酵母表达四联鲎抗菌肽Tachyplesin Ⅱ以实现高效制备。根据鲎抗菌肽Tachyplesin Ⅱ的氨基酸序列,以及胰弹性蛋白酶和羧肽酶A的特异性裂解位点,设计四联鲎抗菌肽(4Tp Ⅱ)序列,按照毕赤酵母密码子偏好性进行优化,经EcoR Ⅰ和Not Ⅰ双酶切后构建重组质粒pPICZαA-4Tp Ⅱ,电转至毕赤酵母X-33,利用Zeocin抗性筛选阳性转化子,经甲醇诱导表达后SDS-PAGE分析。成功构建重组质粒pPICZαA-4Tp Ⅱ,并筛选出阳性转化子,经30℃、250 r/min、1%甲醇诱导表达5 d后,获得重组蛋白,可为高效制备鲎抗菌肽Tachyplesin Ⅱ奠定基础。

摘要：抗菌肽是一类广泛存在于自然界,具有广谱抗菌活性的多肽类物质,因其独特的抗菌作用机制被视为传统抗生素的新型替代药物。由于天然抗菌肽往往存在活性不强、代谢不稳定等缺点,导致其开发与应用受到很多限制,因此基于天然抗菌肽的设计与优化成为了近期研究热点。本文主要针对核糖体抗菌肽展开,总结其相关的一些衍生肽的设计和优化策略,包括合理的一级结构改造、环化策略、计算机辅助策略等,通过分析总结,期望对抗菌肽设计以及抗感染药物的研发提供思路。

摘要：抗菌肽因其高效的抗菌活性和独特的抗菌机制,不仅可作为生物防腐剂预防食品加工贮藏中的微生物腐败,还有望缓解抗生素滥用引起的耐药性问题。为得到一种高效安全的新型抗菌肽,以现有抗菌肽数据库为基础,确定优化了新型抗菌肽的序列长度、电荷数、氨基酸组成,并结合生物信息学预测及分析工具,从头设计得到了序列为GKLLSKLLKKLLK的新型抗菌肽YHX-1;通过琼脂扩散法、最小抑菌浓度(MIC)、最小杀菌浓度及杀菌动力学曲线评价了其对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的抑菌活性,并进一步测定了YHX-1在盐离子、血浆和微酸性环境中的稳定性、二级结构、溶血活性及细胞毒性。结果表明:YHX-1对6株指示菌均有良好抑菌活性,其中对单增李斯特菌和鼠伤寒沙门氏菌的MIC为4μg/mL,在2 h内对单增李斯特菌的致死率为99.99%。YHX-1在盐离子(200 mmol/L Na^(+)、2 mmol/L Ca^(2+))和10%~25%血浆环境中均表现出一定的敏感性,MIC增至原来的2~8倍,而微酸性环境(pH值5.4~7.4)对YHX-1的MIC不会产生显著影响。圆二色光谱表明,YHX-1在细胞膜模拟环境中呈现典型的α-螺旋构象。溶血活性和细胞毒性实验表明,YHX-1具有较好的细胞选择性。YHX-1不仅抑菌谱广、抑菌活性明显,而且具有良好的安全性,有望作为新型抗菌剂应用于食品防腐保鲜,其从头设计策略旨在为新型抗菌肽的发掘提供参考。

摘要：单核细胞增生李斯特菌(简称单增李斯特菌)作为一种常见的食源性致病菌,是影响果汁食用安全性的主要威胁因子。本实验设计并获得一种抗菌肽zp37,通过测定抗菌肽zp37最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC),分析抗菌肽zp37处理后单增李斯特菌的生长曲线、膜电位、膜完整性、细胞微观结构、细胞聚集率、DNA结合情况以及胞内活性氧等,研究抗菌肽zp37抑制果汁中单增李斯特菌的活性及其作用机制。结果表明,抗菌肽zp37对单增李斯特菌的MIC为16μg/mL,当其质量浓度大于4MIC时,单增李斯特菌生长受到明显抑制。同时,8MIC的抗菌肽zp37处理1h能杀死绝大部分的单增李斯特菌,且在7 d贮藏期内,2MIC的抗菌肽zp37能将草莓汁、猕猴桃汁和苹果汁中的单增李斯特菌控制到检测限以下。抗菌肽zp37处理后,单增李斯特菌细胞膜离子通透性增加、膜电位消失,细胞膜完整性被破坏,细胞出现明显的凹陷变形,细胞间发生聚集。荧光标记示踪法结果显示,抗菌肽zp37同时作用于单增李斯特菌的细胞膜和细胞质。在细胞质中,当抗菌肽zp37质量浓度大于DNA质量浓度的1/4时,两者会发生明显结合甚至导致DNA沉淀。此外,抗菌肽zp37能诱导单增李斯特菌产生活性氧,且与质量浓度成正比。综上,抗菌肽zp37对果汁中的单增李斯特菌抑制效果明显,本研究可为抗菌肽作为生物防腐剂应用于果汁提供一定的科学依据。