摘要：抗生素耐药性成为21世纪最严重的公共卫生问题之一。各种耐药菌,特别是ESKAPE(耐药的肠球菌、金黄色葡萄球菌、克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌和肠杆菌)的出现严重威胁了人类的健康。绝大部分传统抗生素作用于细菌表面或内部的特定靶点,容易产生耐药性。因此,急需研发新作用机制的抗菌药物解决抗生素耐药性问题。抗菌肽是自然界中广泛存在的多肽,在抗感染疾病的治疗中具有广阔的应用前景。尽管如此,天然抗菌肽存在一些缺陷,比如体内的代谢稳定性差、活性普遍不高、毒副作用以及生产成本较高等,限制了其应用。解决这些问题较为有效的途径之一就是根据抗菌肽的净正电荷性质及亲水亲脂的整体构象特征,设计合成抗菌肽的模拟物。近年来,抗菌肽的非肽或小分子模拟物研究发展快速。本文将对这一领域的研究进展进行详尽的综述。

摘要：鸭抗菌肽Cathelicidin分子[Cath(1-20)]富含疏水性氨基酸及正电荷,通过人工方法设计合成Cath(1-20)的截短肽衍生物,筛选新型安全Cath(1-20)衍生肽,探讨其作用机制。结果表明,与母肽Cath(1-20)相似,三种衍生肽Cath(5-20)、Cath(4-20)、Cath(3-20)均具有明显广谱抑菌活性,MIC值在1~8μmol·L^(-1)范围内,但仅Cath(5-20)溶血及细胞毒性明显降低,治疗指数达19.5,显著高于Cath(1-20)、Cath(4-20)及Cath(3-20)。Cath(1-20)及其衍生肽可破坏*** UB1005的内膜完整性,产生去极化作用,并存在时间和剂量依赖效应;透射电镜结果显示Cath(1-20)及Cath(5-20)可破坏细菌细胞膜。研究证实氨基端的色氨酸对鸭抗菌肽Cath(1-20)溶血及细胞毒性起关键作用,其作用靶点主要为细菌细胞膜。

摘要：为提高重组抗菌肽Plectasin的表达量,对构建的Plectasin重组表达载体p E-SUMO-PS的表达条件进行正交试验优化。根据Plectasin氨基酸序列合成了Plectasin基因,通过限制性内切酶Xba I和Bsa I插入表达载体p E-SUMO中,转化*** Origami(DE3),IPTG诱导表达。选取诱导时间,诱导浓度和诱导温度共3个主要外部因素。采用3因素3水平正交试验设计,通过SDS-PAGE测定重组表达蛋白。以标准SDS-PAGE图法分析目的融合蛋白含量,以单位上清体积内融合蛋白量作为检测指标,结果用SPSS13.0软件进行统计分析。实验成功构建了重组表达载体p E-SUMO-PS,且融合蛋白主要是以可溶性蛋白为主。在30℃,0.05 mmol/L IPTG的条件下诱导6 h所得融合蛋白量最大。影响抗菌肽Plectasin融合表达的因素的强度由高到低分别为诱导温度、诱导时间及诱导剂浓度。通过正交试验得出抗菌肽Plectasin原核表达的最佳诱导条件为30℃,6 h和0.05 mmol/L IPTG。这对于抗菌肽Plectasin的后续纯化及产业化具有重要参考价值。

摘要：大丽轮枝菌(Verticillium dahliae)是引起棉花黄萎病的真菌病害,广泛存在于中国的产棉区,使棉花产量和品质大幅下降。虽然,人们长期以来一直在寻找抗病基因,但很难在陆地棉中发现。为了寻找对棉花黄萎病菌有强抑制作用的抗菌肽或基因,人工设计和合成了20条抗菌肽(简称"人工肽"),通过抑菌圈法从中筛选到3条最有潜力的人工肽(D4E1、D51和D28),并与2条天然抗菌肽(Decoralin和Pseudin,简称"天然肽")进行对比,用于鉴定其对棉花黄萎病菌的抑菌活性。结果表明,D4E1和D51这2条人工肽的抑菌活性最强,在多肽质量浓度为20μg/mL时,几乎能100%地抑制黄萎病菌的菌丝生长和孢子萌发,显示出高抗特性。同时,实验采用生物信息学软件和反相高效液相色谱法测定了抗菌肽疏水活性,结果表明反相高效液相色谱保留时间可以更有效地表示抗菌肽的疏水活性,从而能更准确推测抗菌肽的抑菌活性。上述研究结果说明:1)如果有一个好的人工设计,人工肽对黄萎病菌的抑制效果会比天然肽更佳;2)人工肽的氨基酸序列可推导出核苷酸序列,作为抗棉花黄萎病的候选基因,用转基因育种技术可获得抗病新品种。

摘要：为了研究抗菌肽(AMPs)和植物精油(EO)对断奶仔猪生长性能、肠道菌群及免疫指标的影响,试验采用2×2因子设计,选择体重为(8.10±0.05)kg的仔猪120头,随机分为4组,即基础日粮组、基础日粮+0.5 mg/kg AMPs组、基础日粮+200 mg/kg EO组、基础日粮+0.5 mg/kg AMPs+200mg/kg EO组,对仔猪的生长性能、肠道菌群及免疫指标进行测定,试验期30 d。结果表明:AMPs能够显著提高仔猪的末重、平均日增重、直肠乳酸杆菌和双歧杆菌数量、Ig M和Ig G含量(P<0.05),显著降低料重比、腹泻率、大肠杆菌数量(P<0.05);EO能够显著提高仔猪的末重、平均日增重、直肠乳酸杆菌数量、Ig G和补体C3、C4的含量(P<0.05),显著降低料重比、腹泻率、直肠大肠杆菌数量(P<0.05)。说明日粮中添加AMPs和EO能提高断奶仔猪的生长性能和免疫功能,调节肠道菌群平衡。

摘要：通过生物信息学手段分析云南臭蛙抗菌肽的结构与功能,为合成此类抗菌肽和通过基因工程方法生产新药物提供理论依据.通过互联网和计算机软件比较和分析了云南臭蛙抗菌肽的成熟肽序列和二级结构,设计了一个具有抗菌活性的抗菌肽分子.结果表明:成熟肽的正电荷和α螺旋结构与抗菌肽的活性密切相关.根据分析结果,设计了一条抗菌肽序列:GL(A/V/I)AANFLPK(T)AF(L)CXXXK(R)KC,此抗菌肽分子可能具有较强的抗菌活性.表明正电荷是影响抗菌肽与致病菌细胞膜结合的关键,而α螺旋的两亲性结构则在抗菌肽插入脂质双分子层中起重要作用.在维持保守氨基酸不变的情况下,可在适当位置改变或置换一些氨基酸,对天然抗菌肽进行基因改造或人工合成此类抗菌肽,不失为开发新药物的一条捷径.

摘要：根据大肠杆菌的密码子偏好性,人工设计并合成了3条抗菌肽Cecropin P1基因寡核苷酸片段,通过PCR扩增得到抗菌肽Cecropin P1基因,将此基因克隆到原核表达载体pMAL-p2X中,然后将重组质粒pMAL-p2X-Cecropin P1转化***1,经IPTG诱导进行融合表达,以Amylose Resin亲和层析纯化。通过SDS-PAGE分析,融合蛋白MBP-Cecropin P1表达与纯化成功。抗菌肽Cecropin P1基因的成功表达为进一步研究其抗菌活性、抗菌机理及应用研究打下基础。

摘要：本文旨在探讨抗菌肽制剂对芦花鸡胸肌肉质性状、游离氨基酸及微量元素含量的影响。试验采用单因子设计方案,选取1日龄健康芦花鸡450只,随机分为3组,每组3个重复,每个重复50只鸡(公母各占1/2)。Ⅰ组(对照组)饲喂基础饲粮,Ⅱ、Ⅲ组分别饲喂在基础饲粮中添加抗菌肽及抗菌肽+酵母菌制剂的试验饲粮,试验期90 d。结果表明:1)Ⅱ、Ⅲ组芦花鸡胸肌滴水损失较Ⅰ组有降低趋势,但差异不显著(P>0.05),肌纤维直径均较Ⅰ组极显著降低(P0.05)。3)Ⅱ、Ⅲ组胸肌硒含量均较Ⅰ组有极显著的提高(P0.05)。综上所述,抗菌肽+酵母菌制剂对芦花鸡胸肌肉质性状、游离氨基酸及微量元素含量的作用效果较好,且优于单独使用抗菌肽。

摘要：以花椒籽蛋白为原料,采用胃蛋白酶水解制备抗菌肽。在单因素实验结果的基础上,应用Box-Behnken中心组合方法进行四因素三水平的实验设计,以大肠杆菌(Escherichia coli)抑菌率为响应值建立数学模型,确定底物浓度4.9%、酶与底物比(g/g)0.9∶100、pH2.0、酶解温度32℃、酶解时间3h为最佳酶解条件。此条件下酶解产生的抗菌肽复合物的抑菌率可以达到60.96%。

摘要：目的研究溶液p H变化对抗菌肽LL-37结构的影响。方法利用分子动力学模拟方法,采用GROMACS软件包和OPLS-AA力场,分别在中性和强碱性条件下对LL-37进行模拟,总模拟时间达1微秒,最后对模拟轨迹进行分析处理。结果LL-37在中性环境下具有部分螺旋结构存在,特别是N端部分残基,结构具有较大柔性;在强碱性环境下,螺旋含量增多,抗菌核心区域残基形成螺旋结构的几率明显增大,结构稳定性增强。结论 p H值的增大会促进LL-37螺旋结构的形成,螺旋结构的形成和与膜结合是协同的。N端残基易形成螺旋,然后是抗菌核心区域。LL-37在中性环境下的结构特征与其行使多功能的角色相一致。该研究首次分析了LL-37在中性环境下的结构特征及p H的影响,有助于认识其抗菌机制及新药设计。