摘要：为及时处理进入水体中的诸如敌敌畏(DDV)的有机磷类农药,采用臭氧氧化方式对水中的DDV去除进行研究,探讨DDV氧化去除的影响因素及臭氧化机理.结果表明:臭氧能有效降解水中的DDV;增加溶液pH值,能提高DDV的降解效率;90%以上的DDV都是在臭氧化反应初期的5 min内被去除;DDV在臭氧化过程中,有机氯大都被矿化变成无机氯离子,在反应初期DDV矿化程度较快,反应5 min之后,TOC变化幅度就明显减弱;TOC变化同臭氧质量浓度有关,臭氧质量浓度越高,TOC降低幅度越大;GCMS分析发现DDV降解过程中的中间产物主要有磷酸三甲酯、二氯乙酸、二氯乙醛;对二氯乙酸的定量分析发现,pH值及反应时间对溶液中二氯乙酸的质量浓度都没有明显的影响,溶液中二氯乙酸的质量浓度呈高低交替波动状.研究认为水溶液中的DDV臭氧化的降解过程可能存在水解、直接分子臭氧氧化反应、自由基反应3种方式,其中以羟基自由基(.OH)反应为主,.OH与DDV反应首先可能夺取乙烯双键上的氢原子,生成磷酸二甲酯和二氯乙烯自由基,然后进一步被氧化生成各种产物或矿化为磷酸、CO2、氯离子.

摘要：目的：探讨调控对氧磷酶1（PON1）基因对急性敌敌畏中毒小鼠肝组织氧化损伤的保护作用。方法实验1：将12只雄性Balb/c小鼠按随机数字表法分为对照组、对照绿色荧光蛋白慢病毒（Lv-GFP）组、重组PON1慢病毒（Lv-PON1）组3组，每组4只。经尾静脉分别注射转染2＆#215;107 TU的Lv-GFP或Lv-PON1慢病毒，对照组给予等量生理盐水。分别于0、1、3、5、7、9 d取眼底静脉血，检测血清PON1活性；转染3 d取肝组织，分别用反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和蛋白免疫印迹试验（Western Blot）检测PON1 mRNA和蛋白表达。实验2：另将96只雄性Balb/c小鼠按随机数字表法分为对照组、敌敌畏染毒组、Lv-GFP干预组、Lv-PON1干预组4组，每组24只。经尾静脉分别注射转染Lv-GFP或Lv-PON1慢病毒后3 d，腹腔注射敌敌畏溶液9 mg/kg染毒，对照组给予等量生理盐水。各组分别于染毒后6、12、24、48 h麻醉处死6只小鼠取肝组织，RT-PCR检测PON1 mRNA、核转录因子E2相关因子2（Nrf2） mRNA表达；Western Blot检测PON1蛋白表达；化学比色法检测丙二醛（MDA）、谷胱甘肽（GSH）含量；双抗夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）检测超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）活性。结果实验1：Lv-PON1转染正常小鼠后，血清PON1活性逐渐升高，自3 d起维持在较高水平；而对照组和Lv-GFP组血清PON1活性均处于正常低水平状态。转染3 d肝组织PON1 mRNA和蛋白表达均显著高于对照组和Lv-GFP组。实验2：与对照组相比，敌敌畏染毒组染毒后6 h肝组织PON1 mRNA和蛋白表达、 Nrf2 mRNA表达、GSH、SOD、CAT水平即明显降低〔PON1 mRNA（灰度值）：0.237±0.075比0.674±0.011，PON1蛋白（灰度值）：0.602±0.086比0.998±0.124，Nrf2 mRNA（灰度值）：0.089±0.012比0.126±0.010，GSH（mg/g）：3.84±0.33比5.52±0.40，SOD（μg/g）：0.383±0.040比0.564±0.052， CAT（ng/g）：7.32±1.28比12.46±1.54，均P＜0.05〕，MDA含量明显升高（nmol/g：7.78±0.41比2.34±0.25， P＜0.05）；随时间延长，PON1 mRNA和蛋白表达、Nrf2 mRNA表达、GSH、SOD、CAT水平逐渐升高，MDA含量逐渐降低，至24 h时Nrf2 mRNA表达已升至对照组水平（0.133±0.019比0.126±0.009，P＞0.05），48 h时已明显高于对照组（0.206±0.028比0.124±0.010，P＜0.05）。与敌敌畏染毒组比较，Lv-PON1干预组6 h时肝组织PON1 mRNA和蛋白表达、 Nrf2 mRNA表达、 GSH、 SOD、 CAT水平即明显升高〔PON1 mRNA（灰度值）：0.726±0.021比0.237±0.075， PON1蛋白（灰度值）：0.739±0.050比0.602±0.086，Nrf2 mRNA（灰度值）：0.158±0.007比0.089±0.012，GSH（mg/g）：4.30±0.22比3.84±0.33，SOD（μg/g）：0.454±0.062比0.383±0.040， CAT（ng/g）：8.98±1.02比7.32±1.28，均P＜0.05〕，MDA含量即明显下降（nmol/g：6.56±0.44比7.78±0.41，P＜0.05）。结论调控PON1能够降低敌敌畏中毒小鼠肝组织MDA含量，增强SOD、 CAT活性，升高GSH含量，并可能通过启动Nrf2抗氧化程序增强抗氧化能力，对急性敌敌畏中毒小鼠肝损伤发挥保护效应。

摘要：目的评价敌敌畏(dichlorvos,DDVP),乐果(dimethoate,DM)和马拉硫磷(malathion,Mal)单独和联合致HepG2细胞微核作用,并用析因设计阐明联合作用模式。方法分别以三种有机磷农药单独染毒HepG2细胞4h,微核试验剂量分别为:敌敌畏3.125～25μg/ml,乐果25～200μg/ml,马拉硫磷50～400μg/ml。观察微核率并计算复制指数(replicative index,RI)。采用2×2析因设计分别研究了3.125μg/ml敌敌畏、25μg/ml乐果与50μg/ml马拉硫磷在低剂量水平下两两组合以及12.5μg/ml敌敌畏、100μg/ml乐果与200μg/ml马拉硫磷在高剂量水平下两两组合联合致HepG2细胞的微核形成。结果微核试验结果显示,细胞微核率随敌敌畏、乐果和马拉硫磷染毒剂量的增高而增加,存在剂量-反应关系(敌敌畏:r=0.955,P0.05)。析因分析结果显示,在低剂量水平下,两两农药组合交互作用的方式均为协同;在高剂量水平下,两两农药组合交互作用的方式均为拮抗。结论敌敌畏、乐果和马拉硫磷均可诱导HepG2细胞微核形成,两两组合存在交互作用,作用模式与剂量有关。

摘要：目的 观察对氧磷酶1（PON1）基因过表达对急性敌敌畏中毒所致小鼠膈肌细胞损伤的影响.方法 常规培养小鼠膈肌细胞,转染过表达慢病毒载体,将细胞分为正常对照组,敌敌畏（DDVP）组,LV-GFP＋ DDVP组,LV-PON1＋ DDVP组,CCK-8法检测细胞存活率、流式细胞术检测细胞的凋亡情况、RT-PCR及Western印迹法检测小鼠膈肌细胞PON1和Nrf2mRNA及蛋白的表达情况、ELISA法检测细胞乙酰胆碱酯酶（AchE）、血红素氧合酶1（HO-1）、醌氧化还原酶1（NQO-1）水平,化学比色法检测细胞内超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）活力及丙二醛（MDA）水平.结果 0、80、160、320、640 μmol/L DDVP诱导小鼠膈肌细胞24 h后,细胞的生存率分别为（100±3.82）％、（82.13 ±2.60）％、（53.57±5.05）％、（30.77±3.30）％、（14.20 ±2.19）％,呈浓度依赖性;以160μmol／L DDVP分别诱导小鼠膈肌细胞0、6、12、24 h后,细胞的存活率分别为（100.17±2.74）％、（76.13±6.01）％、（66.53±3.55）％、（53.57±5.05）％,呈时间依赖性（P＜0.05）.LV-PON1组细胞PON1蛋白表达高于空白对照组（0.370±0.015与0.232 ±0.004,0.197±0.015与0.037±0.003,P＜0.05）.DDVP诱导后,不同时间点LV-PON1组细胞存活率高于DDVP组（P＜0.05）.诱导24 h,LV-PON1组凋亡率及MDA含量低于DDVP组（P＜0.05）.LV-PON1组AchE水平、PON1和Nrf2蛋白表达水平、SOD和CAT、HO-1和NQO-1水平均高于DDVP组（P＜0.05）.结论 PON1基因过表达可以有效减轻DDVP对小鼠膈肌细胞AchE的抑制作用,可以诱导Nrf2的表达,发挥抗氧化作用,从而保护小鼠膈肌细胞.

摘要：针对水体中痕量有机磷农药检测的需要,搭建了电晕放电离化离子迁移率谱仪。以固相微萃取作为样品前处理方法,借助于全新设计的进样装置,利用高温工作漂移管对萃取涂层中待测样品进行解吸,在载气的辅助下将样品直接引入离化区放电针尖附近,提高了水体中敌敌畏检测的灵敏度及稳定性。在优化的检测条件下,当萃取时间为5 min时,敌敌畏标准品理论检出限为0.16μg/kg(3倍信噪比),线性范围为1~250μg/kg,相关系数为0.9996,相对标准偏差小于10%。对湖水样品进行检测,敌敌畏加标回收率为91%~96%。

摘要：目的:评价敌敌畏(dichlorvos,DDVP)、乐果(dimethoate,DM)和马拉硫磷(malathion,Mal)3种常用有机磷农药单独及两两组合下诱导HepG2细胞DNA损伤效应,并阐明联合作用模式。方法:3种有机磷农药分别单独染毒HepG2细胞4h,联合效应研究采用析因设计分别在高剂量水平和低剂量水平下将3种农药两两混合染毒,同时设溶剂对照(DMSO作用4h)和阳性对照(0.5μmol/ml重铬酸钾染毒2h),染毒结束后进行彗星试验,采集图像并用CASP软件分析,选择尾部DNA百分比、彗星尾长(tail length,TL)和Olive尾矩(Olive tail moment,OTM)表示DNA损伤强度。结果:3种有机磷农药单独作用时,较高剂量组的尾部DNA百分比、TL和OTM均显著高于对照组(P0.05),DDVP与Mal之间以及DM与Mal之间存在交互作用(P<0.01),交互方式均为协同;在较高剂量水平,3种农药两两间均存在交互作用(P<0.05),交互方式均为拮抗。结论:敌敌畏、乐果和马拉硫磷单独及两两联合作用均可致DNA损伤,在低剂量和高剂量水平下,存在不同的联合作用模式。

摘要：目的　制备敌敌畏抗性品系淡色库蚊酯酶B1、A2探针 ,并应用于抗性品系及敏感品系的检测。　方法　分别设计酯酶B1、A2上下游引物 ,5’端地高辛标记 ,PCR法制备DNA探针 ,分子杂交检测各个品系淡色库蚊。　结果　摸索出合适的区分抗性与敏感品系的探针浓度 ,在该浓度下各品系杂交点的阳性率有差别。应用酯酶B1探针检测各品系蚊虫 ,抗敌敌畏品系的阳性率为 40 .0 % ,抗残杀威品系的阳性率为 2 3 .3 % ,抗氯氰菊酯品系的阳性率为 18 3 % ,敏感品系的阳性率为 11 7% ;应用酯酶A2探针检测各品系蚊虫 ,抗敌敌畏品系的阳性率为 43 3 % ,抗残杀威品系的阳性率为 2 5 0 % ,抗氯氰菊酯品系的阳性率为 2 1 7% ,敏感品系的阳性率为 15 0 %。　结论　应用酯酶B1、A2探针能够区分抗性品系 ,因此能够用于抗性的测定。从而为抗有机磷类杀虫剂媒介昆虫基因检测的实用性和抗性分子生物学机制的研究打下基础。

摘要：敌敌畏农药是一种广泛使用的中等毒性的有机磷农药,采用传统方法测定难以满足现场测定的需要。试验以戊二醛为交联剂制备了一种基于丁酰胆碱脂酶的ISFET(离子敏场效应管)生物传感器,并将其应用于敌敌畏的测定,考察了不同pH值、底物浓度、抑制时间等对传感器响应(电压)值的影响,得到了最佳测定条件。

摘要：通过对GB/T 5750.8附录B《固相萃取/气相色谱-质谱法测定半挥发性有机化合物》方法进行验证,以评价该检测方法是否适用于水中敌敌畏的检测,以确保该方法能够满足水中敌敌畏的测定。

摘要：目的观察对氧磷酶1(PON1)过表达对敌敌畏中毒小鼠肝损伤的保护作用。方法将96只Balb/c小鼠按随机数字表法分为正常对照组、敌敌畏染毒组、对照慢病毒(Lv-GFP)+敌敌畏组和PON1过表达重组慢病毒(Lv-PON1)+敌敌畏组,每组24只。Lv-GFP+敌敌畏组、Lv-PON1+敌敌畏组小鼠分别经尾静脉转染Lv-GFP、Lv-PON1第3天,连同敌敌畏染毒组小鼠腹腔注射敌敌畏溶液9mg/kg染毒,同时正常对照组给予等量0.9%氯化钠注射液。染毒后分别于6、12、24、48h各取6只小鼠麻醉处死,化学比色法检测血清乙酰胆碱酯酶(ACh E)、ALT和AST活力,ELISA测定肝组织TNF-α和IL-1β水平,Western blot检测肝组织NF-κBp 65表达,HE染色观察肝组织病理学变化。结果与正常对照组比较,6、12、24h敌敌畏染毒组ACh E活力下降及6、12、24、48h ALT、AST活力升高,差异均有统计学意义(均P<0.05);与相应时间点敌敌畏染毒组比较,Lv-PON1+敌敌畏组ACh E活力明显升高,ALT、AST活力明显降低(P<0.05)。与正常对照组比较,6、12、24、48h敌敌畏染毒组TNF-α、IL-1β水平升高,NF-κBp65表达升高,差异均有统计学意义(均P<0.05);与相应时间点敌敌畏染毒组比较,Lv-PON1+敌敌畏组TNF-α、IL-1β水平明显降低,NF-κBp65表达明显降低,除48h IL-1β外,差异均有统计学意义(均P<0.05)。光镜下可见,敌敌畏染毒组染毒后12h肝病理损伤明显,Lv-PON1+敌敌畏组小鼠肝损伤较之有所减轻。结论调控PON1过表达能够通过下调敌敌畏急性中毒小鼠肝组织NF-κBp65表达,减少TNF-α、IL-1β释放,减轻炎症损伤,对敌敌畏急性中毒小鼠肝损伤具有一定的保护作用。