摘要：为研究文心兰谷氧还蛋白超家族基因ROXY在花药发育中的功能,以文心兰‘南茜’（Oncidium Gower Ramsey）为试验材料,从‘南茜’的转录组网站选取一条与拟南芥At ROXY1/2相似度最高的基因序列（命名为OnROXY1）,以该序列的cDNA为模版设计引物,用RT-PCR从‘南茜’花器官中扩增该基因,并对扩增产物进行测序和保守结构域分析.结果表明,OnROXY1基因编码区402 bp,编码133个氨基酸,与‘南茜’转录组网站中的预测序列只有一个碱基差异,但与该预测序列的氨基酸序列和保守结构域完全一致（GenBank登录号：MF696154）.OnROXY1基因具有典型的谷氧还蛋白（Glutaredoxin,GRX）基因家族的结构域和CMCC活性位点,因此该基因属于GRX基因家族,并且属于亚类CC型的GRX基因.进化树分析表明,OnROXY1与水稻的Os ROXY1、Os ROXY2和拟南芥的At ROXY1、At ROXY2蛋白序列的一致性最高,进化距离最近.亚细胞定位结果显示,OnROXY1主要定位于细胞核中,少量定位在细胞质中.RT-PCR检测发现,在不同组织部位中,OnROXY1在假鳞茎中的表达量最高,唇瓣中的表达量最低;不同花期的定量结果显示,OnROXY1在脱落干枯期时的表达量最高,盛开期时的表达量最低.本研究推测谷氧还蛋白基因OnROXY1可能在文心兰假鳞茎与根的发育、消除植物体内过多的活性氧以及延缓文心兰花器官的衰老等方面具有重要作用.

摘要：本研究基于NCBI数据库中文心兰的EST序列,对其EST-SSR标记进行分析,并设计了20对EST-SSR引物用于30个文心兰品种遗传多样性性分析研究。对3 183条文心兰EST序列进行搜索,共检索出274个SSR位点,检出率为8.61%。二核苷酸重复类型是文心兰EST-SSR的主要重复类型,占60.58%。通过PCR扩增检测到13对引物有扩增产物,其中10对引物有多态性,平均每对引物扩增到10个多态性条带,各引物的多态性比率分布为75.00%~100.00%,多态性信息含量变化范围为0.69~0.93。聚类分析发现30个文心兰品种间的遗传距离变化在0.04~0.58,且在遗传距离为0.39处可将30个文心兰品种分为7大聚类群。

摘要：以文心兰叶片为材料,根据Gen Bank中登录的植物肌动蛋白基因同源核苷酸保守序列设计简并引物,利用RT-PCR技术得到了2个动蛋白基因(Actin)片段。序列分析结果表明,2个Actin基因片段长度均为1062 bp,2条序列一致性为90.87%,分别命名为OnA CT1和OnA CT2,并在Gen Bank注册,登录号分别为JN981136和JN981137。2条序列编码完全相同的354个氨基酸,具有Actin蛋白的特征序列;进化树分析表明,文心兰Actin蛋白与萼脊兰和蕙兰的亲缘关系最近。采用实时荧光定量(qR T-PCR)和半定量RT-PCR(Semi-quantitative RT-PCR)方法进行表达分析,结果显示该基因在营养生长和生殖生长阶段的不同组织中表达相对稳定,可以作为发育阶段相关基因表达研究的内参基因。

摘要：根据NCBI网站上文心兰OnAP1-like基因序列设计引物,用RT-PCR法从南茜文心兰花葶中扩增OnAP1-like基因,对扩增产物进行测序。结果表明,获得的南茜文心兰OnAP1-like基因为690bp,与报道序列完全一致。将OnAP1-like基因插入pRI101-ON载体中,经PCR、双酶切及测序鉴定,证实重组表达质粒中含有目的片段,表明成功构建了高效植物表达载体pRI101-OnAP1。对OnAP1-like基因的结构域和所表达蛋白质的亲水性进行了分析,并预测了该基因所表达蛋白的三维结构。结果显示,该基因包含MADS-box和K-box保守域,属于MADS-box基因家族,所表达蛋白为亲水性蛋白。确定了一种文心兰的遗传转化条件,得到筛选抗生素G418的最适质量浓度为40mg/L,为进一步研究文心兰中AP1基因的功能奠定基础。

摘要：根据GenBank中已发表的建兰花叶病毒(Cymbidium mosaic virus,CyMV)、齿兰环斑病毒(Odontoglossum ringspot virus,ORSV)和菜豆黄花叶病毒(Bean yellow mosaic virus,BYMV)外壳蛋白(CP)基因序列保守区域分别设计特异性引物,通过优化多重PCR反应条件,建立能同时检测文心兰3种病毒的多重PCR检测体系。该体系能够一次扩增出CyMV、ORSV和BYMV的特异片段,其大小分别是551、325和212bp。测序结果表明,3种病毒序列与相应的参考序列相似性均达98%以上。灵敏度测定结果表明,从相当于或大于10-2 mg的感病植物组织中能够检测到这3种病毒。

摘要：以文心兰‘豹斑宝石’花梗为外植体,采用丛生芽诱导途径,利用正交设计法,探讨基本培养基(MS、花宝1号、改良1号、改良2号、改良3号)、植物生长调节剂(6-BA、NAA、IBA)、水解酪蛋白(CH)等对其丛生芽诱导、增殖、生根等关键环节的影响,以期建立文心兰‘豹斑宝石’丛生芽组培快繁技术。结果表明:各试验因素对文心兰丛生芽增殖影响的主次关系为6-BA>基本培养基>NAA>CH;筛选出丛生芽适宜的增殖培养基配方为改良1号+6-BA 3.0mg·L^(-1)+NAA 0.1mg·L^(-1)+CH 0.5g·L^(-1)+白糖30g·L^(-1)+琼脂粉5.0g·L^(-1),50d平均增殖系数达5.8;筛选出适宜生根的培养基配方为改良3号+IBA 0.5mg·L^(-1)+活性碳0.5g·L^(-1)+白糖20g·L^(-1)+琼脂粉3.6g·L^(-1)+卡拉胶3.6g·L^(-1),生根率为100.0%;试管苗移栽6个月成活率达96.8%。

摘要：笔者主要采用正交设计安排试验,探索通过以丛生芽途径再生植株的方法进行快速繁殖。研究的主要问题集中在不同基本培养基类型、不同激素配比和用量的选择、不同添加物的选择几个方面对丛生芽增值的影响。以期筛选出最优技术参数组合,提高丛生芽增殖系数,建立文心兰最优再生体系。结果表明:影响丛生芽增殖的显著因子分别是基本培养基、细胞分裂素BA、生长素NAA。最适宜的培养基配方是MS+BA3.0mg/L或4.0mg/L+NAA0.4mg/L或0.6mg/L+椰乳汁150.0ml/L或番茄汁150.0ml/L+Vc0.2mg/L+活性炭1.0g/L+糖30.0g/L+琼脂8.0g/L+pH5.4。

摘要：依据系统工程原理,按照最佳模拟配合法的要求,利用二次正交旋转组合设计的筛选方法建立数学模型,并应用计算机模拟寻优,研究了文心兰组培快繁最佳培养基配方及最适环境条件,提高文心兰组培快繁术的速度。

摘要：以文心兰‘小樱桃’花梗腋芽诱导出的丛生芽为增殖培养材料,采用正交设计法,研究基本培养基、6-BA、NAA和水解乳蛋白(LH)4种因素对文心兰丛生芽增殖的影响,以期筛选出各因子的最佳水平,建立文心兰‘小樱桃’丛生芽增殖培养体系。结果表明:各试验因素对文心兰丛生芽增殖影响的主次关系为6-BA>基本培养基>NAA>LH;筛选出文心兰丛生芽增殖的最佳培养基配方为改良1号+6-BA 3.0mg·L-1+NAA0.1mg·L-1+LH 0.5g·L-1,45d平均增殖系数达6.53,有效提高了繁殖效率,为其种苗工程化育苗提供了技术基础。

摘要：应用酶联免疫吸附检测法(ELISA)和RT-PCR技术从表现有同心圆褪绿斑的进境盆栽文心兰上检测出凤仙花坏死斑病毒。ELISA检测发现该病毒在文心兰上分布不均匀,病毒主要集中在表现症状的病斑处。同时,根据该病毒SRNA上的核衣壳蛋白(N)基因序列保守区设计了一对特异性引物,利用RT-PCR方法检测得到500bp的预期DNA片段。经HindIII和EcolI酶切验证后克隆了该序列片段,序列分析结果表明该病毒的N基因序列和已经发表的凤仙花坏死斑病毒(登陆号为AB109100、AB207803、DQ425096)核苷酸序列同源性为99%,进一步确认进境盆栽文心兰上携带凤仙花坏死病毒。这是INSV首次在中国的报道,也是第一次在文心兰上发现该病毒。