摘要：根据已发表斑点热群立克次体外膜蛋白OmpA基因序列设计特异性引物,对青海省采集的蜱标本进行PCR检测,并对阳性样本进行测序和序列分析,建立分子系统进化树。结果显示在454个蜱样本池中检测到14个SFGR阳性样本,其中9个西伯利亚立克次体阳性样本和5个黑龙江立克次体阳性样本,总感染率3.08%。序列分析结果显示,西伯利亚立克次体青海株HUN与与黑龙江立克次体虎林株HL-93(AF179364)、绥芬株HLJ-054(AF179362)共处一个分支,一致性分别为99.18%和99.51%;黑龙江立克次体青海株GL-1与西伯利亚立克次体前苏联株246(U43807)和北京株BJ-90(AF179365)同处一个分支,序列一致性分别为99.49%和99.67%。说明青海省存在SFGR感染,应尽快制定防控措施,以免危害动物及人类健康。

摘要：根据已发表的长角血蜱16SrRNA序列及斑点热群立克次体外膜蛋白A(OmpA)基因序列设计2对特异性引物,对唐山地区采集的长角血蜱进行PCR检测,并对阳性样本进行测序和序列分析,抽检样本建立分子系统进化树。结果表明,在315份蜱DNA样本中检测出25份阳性样本,阳性率为7.94%;序列分析结果显示唐山地区长角血蜱携带立克次体同处于一个分支,与日本株立克次体同源性最高(93.30%),其次是福建株立克次体(92.11%),黑龙江立克次体绥芬株(90.45%)、虎林株(90.42%)。结论得出唐山地区蜱传斑点热感染较严重,分子进化分析结果显示唐山地区蜱传斑点热群立克次体可能为一新种。

摘要：为了明确青海省天峻地区青海血蜱传斑点热群立克次体带菌率及遗传进化特点,根据已发表的斑点热群立克次体外膜蛋白OmpA基因序列设计特异性引物,采用PCR方法对青海省天峻地区青海血蜱进行斑点热群立克次体检测,并对测定序列进行遗传进化分析。结果显示,在316个青海血蜱标本样品池中共检测到31个阳性样品,斑点热群立克次体(SFGR)带菌率为9.8%。遗传进化分析显示,TJ013与立克次体福建分离株FUJ98(AF169629)、黑龙江立克次体HL-93(AF179364)、HL-054(AF179362)及日本立克次体YM(U43795)处于同一分支;SFGR Omp A基因序列同源性分析结果显示,TJ013与立克次体福建分离株FUJ98(AF169629)同源性最高,为95.49%;与黑龙江立克次体绥芬分离株HLJ-054和虎林分离株HL-93的同源性均为91.44%;和日本立克次体YM同源性为90.24%。表明青海省天峻地区青海血蜱传斑点热群立克次体感染较为严重,应尽快制定防制措施,以免危及动物及人类健康。

摘要：目的为探讨190 kD *** 基因序列对斑点热群立克次体的检测作用。方法从立氏立克次体190 kD 外膜蛋白 A(***)基因序列设计引物,利用 PCR 检测的方法,检测了683只蜱类标本和146个鼠类脏器标本,并随机抽取1株森林革蜱阳性扩增产物进行克隆与序列测定。结果从蜱类标本和鼠类脏器标本中检测出了斑点热立克次体 DNA 片段;所测序列的分型结果表明与前苏联的 DnS 14株型别一致,与我国曾经检测出的斑点热立克次体株差异较大。结论 190kD 外膜蛋白 A 基因序列可用于斑点热立克次体检测,并可用于斑点热群立克次体基因型或亚型之间的鉴别。

摘要：为了明确青海省天峻地区青海血蜱传斑点热群立克次体带菌率及遗传进化特点,笔者根据已发表的斑点热群立克次体外膜蛋白Omp A基因序列设计特异性引物,采用PCR方法对青海省天峻地区青海血蜱进行斑点热群立克次体检测并对测定序列进行遗传进化分析。结果在316个青海血蜱标本样品池中共检测到31个阳性样品,SFGR带菌率为9.8%。遗传进化分析显示,TJ013与立克次体福建分离株FUJ98(AF169629),黑龙江立克次体HL-93(AF179364),HL-054(AF179362)及日本立克次体YM(U43795)处于同一分支;SFGR Omp A基因序列同源性分析结果显示,TJ013与立克次体福建分离株FUJ98(AF169629)同源性最高,为95.49%;与黑龙江立克次体绥芬分离株HLJ-054和虎林分离株HL-93的同源性均为91.44%;与日本立克次体YM同源性为90.24%。说明青海省天峻地区青海血蜱传斑点热群立克次体感染较为严重,应尽快制定防治措施,以免对动物及人类健康造成威胁。

摘要：目的调查河北省西部山区蜱类斑点热群立克次体带菌情况,为蜱传斑点热群防控提供科学依据。方法根据已发表斑点热群立克次体OmpA外膜蛋白基因序列设计特异性引物,对河北省西部山区采集的长角血蜱进行PCR检测,并对阳性样本进行测序和序列分析,建立分子系统进化树。结果在1227份蜱DNA样本中检测出91份阳性,阳性率为7.42%;序列分析结果显示河北省西部山区长角血蜱携带立克次体与河北株暂定种(登录号:HQ651815、HQ651817、HQ651818、HQ651819、HQ651823、HQ651824)、福建株FUJ(登录号:AF169629)同处于一个分支,与河北株立克次体暂定种同源性最高(99.02%),其次是福建株(98.50%)、黑龙江立克次体绥芬株HLJ-054(登录号:AF179362)和黑龙江立克次体虎林株HL-93(登录号:AF179364)(98.13%)、日本株YM(登录号:U43795)(97.92%)。结论河北省西部山区蜱传斑点热群立克次体感染较为严重,应尽快制定防制措施,以免危及动物及人类健康。

摘要：目的建立一种多重实时荧光定量PCR法,同时检测常见蜱传病原体嗜吞噬细胞无形体、伯氏疏螺旋体及斑点热群立克次体(SFGR)。方法针对各病原体的保守区序列设计特异性引物及TaqMan探针,建立并优化多重实时荧光定量PCR反应体系,评价方法的特异性、灵敏度、重复性及对蜱样本的检测准确性。结果建立的多重实时荧光定量PCR法检测嗜吞噬细胞无形体、伯氏疏螺旋体、SFGR,与大肠埃希菌、问号钩端螺旋体、布鲁氏菌等病原体间无交叉反应,特异性良好;灵敏度均达到102拷贝/μl,重复性变异系数均<2.00%;蜱样本检测中,多重实时荧光定量PCR法与单重实时荧光定量PCR法检测结果一致性为100%。结论研究建立的3种蜱传细菌性病原体多重实时荧光定量PCR法特异性好、灵敏度高,为蜱传病原体的检测提供了技术手段。

摘要：目的为进一步了解我国斑点热群立克次体存在的多样性,发现可能存在的斑点热群立克次体新成员、潜在媒介和动物宿主。方法建立了扩增斑点热群立克次体190kDa rOmpA基因片段的PCR检测、鉴定方法,并用此方法检测了采自福建省和内蒙古自治区的蜱、动物和人血液标本。对扩增于越原血蜱、森林革蜱和FNH97未鉴定菌株的PCR产物采用PHYLIP软件包进行了序列分析。同时,为了寻找特异的斑点热群立克次体分类检测方法,建立了针对四种斑点热群立克次体的半巢式PCR方法,并对斑点热立克次体阳性标本进行了分类检测。结果采用 190kDa rOmpA.701/70p引物可以从7株斑点热群立克次体中的6株扩增出外膜蛋白A基因片段(小蛛立克次体除外)。并从采自福建省和内蒙古自治区的多种蜱及野生动物、人血液标本中扩增出了斑点热立克次体DNA片段,其中越原血蜱、卵形硬蜱、中华硬蜱、豪猪血蜱、森林革蜱、野鼠血块和人群血块的阳性率分别为15.69％、56.94％、8.70％、7.70％、43.56％、82.51％和0.98％。对来自越原血蜱和森林革蜱以及FNH97菌株的斑点热立克次体190kDa外膜蛋白A630bp左右核苷酸片段序列分析和推测的氨基酸序列分析结果表明:福建越原血蜱立克次体(福建立克次体)核苷酸序列与日本立克次体的该序列同源性最高(94％)。推测氨基酸序列同源性也与该立克次体最高(89％);内蒙古森林革蜱立克次体(森林革蜱立克次体)核苷酸序列与扇头蜱立克次的该序列同源性最高(97％),推测氨基酸序列的同源性也最高(95％)。遗传发育分析,这两种立克次体分别与日本立克次体和扇头蜱立克次体均为同一个分支。序列中限制性核酸内切酶的位点也显示了对应的相似性。但是它们的核苷酸和推测的氨基酸序列与康氏立克次体和西伯利亚立克次体以及内蒙古立克次体(HA-91)差别较大。提示,这两种蜱携带的立克次体可能是我国尚未发现的斑点热群立克欢体新成员。用初步分类引物对蜱标本、血液标本检测结果显示:以“福建立克次体”序列设计的引物检测越原血蜱阳性率为8.49％,卵形硬蜱阳性率为20.83％,中华硬蜱阳性率为4.35％,豪猪血蜱为阴性;以西伯利亚立克次体序列设计的引物检测卵形硬蜱阳性率为 24.39％,越原血蜱阳性率为 5.56％,中华硬蜱和豪猪血蜱均为阴性。以内蒙革蜱立克次体序列设计的引物扩增森林革蜱阳性率为43.56％。结论通过本次研究,在以下方面获得了新的认识:越原血蜱、卵形硬蜱、豪猪血蜱和中华硬蜱是福建南方蜱传斑点热立克次体的媒介或潜在媒介,其中卵形硬蜱、豪猪血蜱和中华硬蜱为我国首次证实的携带斑点热立克次体;福建的越原血蜱和内蒙古的森林革蜱分别携带一种未知斑点热群立克次体,并分别与日本立克次体和肩头蜱立克次体近缘;取自斑点热立克次体rOmpA基因的引物用于PCR,作为一种快速简便手段可直接用于斑点热立克次体初步分类和分子流行病学调查;我国可能存在斑点热群立克次体的多个成员及其自然疫源地。