摘要：目的:筛选防控泽泻斜纹夜蛾的药剂。方法:采用单因素随机区组设计,选用4种杀虫剂开展对泽泻斜纹夜蛾的田间防效试验,并评价施药后对泽泻产量和品质的影响。结果:30%噻虫嗪SC施药1次和2次的防效最好,对泽泻药材的产量和品质提升效果较好,增产率为15.8%,药材中24-乙酰泽泻醇A和23-乙酰泽泻醇B与23-乙酰泽泻醇C两者总含量均最高,分别为0.038%和0.159%。结论:30%噻虫嗪SC能有效防治泽泻斜纹夜蛾,也有利于泽泻药材的优质高产,具有较好的推广应用价值。

摘要：信息素结合蛋白(PBP)是大量存在于昆虫触角感器中的一类小分子蛋白,它特异性结合并运输性信息素组分到神经树突膜上的气味受体。通过设计简并引物并利用RT-PCR技术,从斜纹夜蛾雄虫触角扩增到1个长171bp的预期cDNA片段,测序后经比对表明是PBP3基因片段,将该基因命名为SlitPBP3。利用RACE技术进一步得到SlitPBP3的cDNA全长序列(GenBank登录号:GU082321),长568bp,编码164个氨基酸,具有PBP的典型序列特征。对基因组DNA的研究显示,该基因由3个外显子和2个内含子构成。2个内含子的位置和斜纹夜蛾的另2个PBP基因相同,具有保守性;其长度分别为124bp和73bp。进化分析显示,夜蛾科昆虫的PBP分为3个组,其中斜纹夜蛾的3个PBP被分在不同的3个组,因而可能具有不同的气味结合谱。

摘要：泛素介导的蛋白质降解途径对胞内蛋白的选择性降解起着重要作用。设计一对简并引物 ,从斜纹夜蛾(Spodopteralitura)细胞中克隆了泛素基因的编码区 ,GenBank登录号AF4 36 0 6 6。序列分析表明 ,该编码区的长度为 2 2 8bp ,编码由 76个氨基酸组成的、分子质量为 8 5 6kD的蛋白 ,其等电点为 6 5 6。同源性比较发现 ,斜纹夜蛾泛素基因不仅与其它真核生物的泛素基因在氨基酸水平上具有 96 %以上的相似性 ,而且与斜纹夜蛾核多角体病毒 (SpltMNPV)泛素基因的同源性为 84 %。RT PCR分析发现 ,泛素基因在所检测的斜纹夜蛾幼虫多种组织 ,尤其是脂肪体中均有表达。采用构建的原核表达载体pQEUB ,在大肠杆菌M15中诱导并高效表达出了带有His tag的重组融合蛋白 ,薄层扫描分析得知靶蛋白约占总蛋白的 37%。利用Ni NTA亲和层析胶纯化得到重组融合蛋白 ,经SDS PAGE鉴定为单一区带 ,为进一步研究S .litura泛素在SpltMNPV感染中的作用打下了基础。

摘要：天蚕素是昆虫抵御病菌入侵的一类抗菌肽家族。根据斜纹夜蛾Spodoptera litura天蚕素B基因设计特异引物,通过PCR扩增得到2个新的天蚕素基因部分序列,分别命名为cecD1和cecD2(GenBank登录号分别为EF555567和EF555568)。2个基因编码同一个天蚕素D蛋白,该蛋白的成熟肽与天蚕素B存在2个氨基酸残基差异。序列分析发现cecD1和cecD2中分别包含568bp和377bp的内含子序列,它们有相同的5′和3′拼接位点,A+T含量分别为59.7%和69.8%,符合大多数真核生物内含子高A+T含量的特征。

摘要：气味调控斜纹夜蛾Spodoptera litura(鳞翅目,夜蛾科)的交配和产卵行为,而嗅觉气味结合蛋白(OBP)是昆虫与外界环境进行化学信息交流中的一种重要蛋白。本研究基于已报道的斜纹夜蛾普通气味结合蛋白GOBP1基因cDNA序列(GenBank登录号为EF159978)设计引物,通过RT-PCR法分析了GOBP1 mRNA的组织特异性表达情况,并对GOBP1基因条带进行了克隆、测序和Blast比对。此外,再通过RNA原位杂交的方法进一步分析了GOBP1 mRNA在触角中的表达定位。结果表明:GOBP1只在斜纹夜蛾的触角组织中表达,而且GOBP1转录本较多分布于靠近嗅觉感受器即触角边缘部位。这些结果进一步说明GOBP1是斜纹夜蛾嗅觉过程中的重要蛋白,同时为深入研究GOBP1与其他蛋白的相互空间定位关系、GOBP1的功能等奠定了基础。

摘要：Fe-S蛋白(rieske iron-sulfur protein,RISP)是线粒体复合物Ⅲ的关键蛋白亚基之一,在呼吸链电子传递中起着重要作用。本文利用RT-PCR技术和RACE方法获得了斜纹夜蛾Spodoptera litura(Fab.)线粒体复合物ⅢRISP基因,该基因序列全长4413bp,含有3个内含子;开放阅读框长816bp,编码271个氨基酸。经氨基酸序列比对,与鳞翅目家蚕Bombyx mori和小菜蛾Plutella xylostella的Fe-S蛋白一致性较高,分别为83%和79%,与其他目昆虫的RISP一致性较低。qRT-PCR分析结果表明,SlitRISP基因在斜纹夜蛾不同发育阶段的表达水平存在显著差异,即幼虫期和成虫期的表达量显著高于卵期和蛹期,其中幼虫期又以第4和5龄幼虫表达水平显著高于初孵幼虫以及第1,2,3和6龄幼虫。斜纹夜蛾SlitRISP基因的克隆成功为今后对其功能研究以及作为靶标设计新型高效杀虫剂提供了基础。

摘要：【目的】研究斜纹夜蛾核型多角体病毒II ORF146基因的结构与功能。【方法】根据SpltMNPV IIORF146基因序列设计引物,经PCR扩增克隆ORF146基因。在生物信息学分析基础上进行启动子活性分析和转录时相分析。构建ORF146片段的原核表达载体,表达并纯化融合蛋白后制备多克隆抗体。【结果】核苷酸序列分析表明,读码框含1383 bp,编码460个氨基酸的蛋白质,推定分子量为50.4 kDa。启动子活性分析和转录时相分析都表明该基因是个早、晚期都表达的基因,在病毒感染8 h和18 h有两个转录峰,24 h以后转录水平略有下降,但趋于稳定。pET-28a-ORF13原核表达的融合蛋白经纯化后制备的多克隆抗体特异性高,效价可达1∶3200以上。【结论】SpltMNPV II ORF146基因是一个早期和晚期都表达的病毒组成型结构蛋白基因。推测ORF146基因可能与SpltMNPV II病毒感染宿主细胞后病毒DNA复制有关。制备的多克隆抗体可用于深入研究该蛋白的生物学特性与功能。

摘要：【目的】改进斜纹夜蛾半人工饲料配方,为斜纹夜蛾室内批量饲养奠定基础。【方法】设计4种半人工饲料配方,于温度(27±0.5)℃、相对湿度(70±5)%、光周期L∶D=16h∶8h、光照强度8 250lx的人工气候箱中进行群体饲养,观察不同饲料配方对斜纹夜蛾生长发育的影响。【结果】供试4种饲料配方中,配方4(玉米粉200g,大豆粉100g,酵母粉12g,琼脂15g,抗坏血酸6g,山梨酸2g,对羟基苯甲酸甲酯2g,复配维生素液15mL,蔗糖50g,蒸馏水1 000mL)的饲养效果最好。用配方4饲养斜纹夜蛾幼虫,其幼虫到成虫发育历期最短,仅26.77d,幼虫存活率高达97%,蛹质量0.3g,雌雄性比达到0.91∶1,单雌产卵量为774粒。【结论】供试4种配方中以配方4的饲养效果最好,可以作为斜纹夜蛾室内饲养的半人工饲料。

摘要：斜纹夜蛾核型多角体病毒Ⅱ(Spodoptera lituramulticapsid nucleopolyhedrovirus,SpltMNPVⅡ)是一种新发现的繁殖率和毒力极强的病毒株,其全基因组序列已经测定,共149个ORFs。对SpltMNPVⅡBV和ODV的质谱分析表明,ORF59位于ODV中,是一个功能未知的ORF。本研究根据SpltMNPVⅡORF59基因序列设计引物,经PCR扩增,克隆了ORF59基因。核苷酸序列分析表明,克隆片段上游具有4个TATA box,一个早期启动子CAGT和一个晚期启动子ATAAG。读码框含645 bp,编码214个氨基酸的蛋白质,推定分子量为25.4 ku。将ORF59片段克隆至原核表达载体pET-28a(+),经IPTG诱导后在大肠杆菌BL21中融合表达,SDS-PAGE分析表明在约29 ku处有特异性表达条带,经Western blot验证该蛋白即为融合表达的目的蛋白。融合表达产物经纯化后,免疫新西兰大白兔获得ORF59多克隆抗体。上述结果为深入研究ORF59的结构与功能提供基础。

摘要：为研究斜纹夜蛾核型多角体病毒(Spodoptera litura multicapsid nucleopoledrovirus,SpltMN-PV)侵染规律,根据SpltMNPV中国株(G2)ORF135基因序列设计引物,经PCR扩增,从SpltMNPV日本株(B)基因组中克隆了pif-2基因。核苷酸序列分析表明,该基因是甜菜夜蛾核型多角体病毒(Spodoptera exigua nucleopoledrovirus,SeMNPV)pif-2的同源物,读码框含1278 bp,编码425个氨基酸的蛋白质,推定分子量为48.6 kD。与其他杆状病毒的同源物比对显示,SpltMNPV-JP-B PIF-2蛋白中14个Cys残基高度保守。联配分析表明,SpltMNPV-JP-B pif-2的核苷酸序列与其他13种核型多角体病毒的同源性有较大差异。将pif-2克隆至原核表达载体pET32a(+),经IPTG诱导后在大肠杆菌BL21中获得了融合表达,SDS-PAGE分析表明在约69 kD处有特异性表达条带,经Western blot验证该蛋白即为融合表达的目的蛋白。