摘要：目的通过鉴定曼地亚红豆杉Taxus×media中病程相关基因非表达子1(non-expressor of pathogenesis-related genes1,NPR1)家族基因,分析并比较其蛋白结构以及基因表达等差异,为利用NPR1基因提高红豆杉紫杉醇含量奠定理论基础。方法利用本地化blast对曼地亚红豆杉NPR1基因进行鉴定,通过CD-search、MEGA X、DNAMAN以及MEME在线网站等生物信息学技术进行保守结构域、进化树构建、多序列比对以及基序分析,利用blast比对转录组数据,预测所获得的NPR1基因在不同组织以及激素和低温处理后的表达模式。结果在曼地亚红豆杉中共鉴定出3个NPR1家族基因,命名为TmNPR1~TmNPR3。研究发现,3个NPR1家族成员均含有BTB_POZ保守结构域,并分成2个亚家族。TmNPR1/2与AtNPR3/4聚在一起,TmNPR3与AtNPR5/6亲缘关系较近。Tm NPR1/2与AtNPR3/4相似,均含有EAR基序(VDLNETP)。表达模式分析发现3个NPR1基因在不同组织中的表达有所差异,TmNPR1/2在针叶组织中的表达水平最高,TmNPR1响应低温胁迫,且在茉莉酸甲酯和冠菌素激素处理曼地亚红豆杉细胞系中表达量最高。结论曼地亚红豆杉NPR1家族的3个成员在序列和结构上存在保守性,但也在红豆杉根和针叶的发育以及在低温等不同胁迫和茉莉酸甲酯信号途径中扮演了不同的角色,推测具有不同的功能,为揭示TmNPR1s基因功能和利用分子生物学技术提高红豆杉紫杉醇产量提供理论依据。

摘要：目的:优选曼地亚红豆杉最佳酒炙工艺并建立酒炙曼地亚红豆杉饮片质量标准。方法:采用HPLC法测定紫杉醇、银杏双黄酮、金松双黄酮含量;运用AHP-熵权法结合Box-Behnken设计-响应面法考察加酒量、闷润时间、炮制时间和炮制温度对酒炙曼地亚红豆杉饮片质量的影响,优选曼地亚红豆杉酒炙工艺参数,观察酒炙曼地亚红豆杉饮片性状及粉末显微特征,并通过10批样品中的水分、总灰分、酸不溶性灰分、水溶性浸出物及紫杉烷类和黄酮类成分的分析,建立酒炙曼地亚红豆杉饮片的质量标准。结果:优化所得最优酒炙工艺参数为加酒量14.91%,闷93.60 min后,在102.89℃温度下炒16.06 min;测得炮制品浸出物的含量为34.10%~36.44%,紫杉醇、银杏双黄酮、金松双黄酮含量分别增加了17.29%、16.78%和73.02%。结论:优选的曼地亚红豆杉酒炙工艺稳定、合理,质量标准可控性强,可为酒炙曼地亚红豆杉饮片的规范化生产及应用提供参考。

摘要：目的研究曼地亚红豆杉Taxus media枝叶的化学成分。方法通过硅胶、凝胶Sephadex LH-20、ODS等色谱方法分离纯化,运用~1H-NMR、^(13)C-NMR、ESI-MS等多种波谱技术鉴定化合物结构。结果从曼地亚红豆杉乙醇提取物的石油醚、醋酸乙酯萃取部位分离鉴定出18个化合物,包括8个紫杉烷二萜类化合物:taxinine-11,12-oxide(1)、9α,10β-二乙酰基-2α-羟基-5α-桂皮酰基-3,11-环化紫杉烷-4(20)-烯-13-酮(2)、2-去乙酰氧基紫杉宁E(3)、7,9-二去乙酰基紫杉宁B(4)、紫杉吉酚(5)、9-去乙酰基紫杉宁A(6)、9-去乙酰基紫杉宁(7)、10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ(8);5个黄酮类化合物:山柰酚(9)、香橙素(10)、芹菜素(11)、金松双黄酮(12)、银杏双黄酮(13);3个酚酸类化合物:对羟基苯甲醛(14)、对羟基苯甲酸(15)、邻苯二酚(16);以及β-谷甾醇(17)、正二十烷-10-醇(18)。结论化合物18为首次从红豆杉科植物中发现,化合物1~4、6、7、10、14~16为首次从曼地亚红豆杉中分离得到。

摘要：为了提高曼地亚红豆杉扦插繁殖的成活率,采用L9(34)的正交试验设计和全光照喷雾扦插育苗技术,就插穗母树年龄、插穗长度、以不同浓度的药剂处理及扦插时间对插穗生根率的影响进行了试验。结果表明了最佳的扦插技术组合为:选用曼地亚红豆杉低龄母树的中部枝条作为插穗,用浓度为1 000 mg/kg的QX复配剂对插穗进行速蘸处理,并于5月初扦插,这样可以获得最高的生根率。

摘要：从 5年生曼地亚红豆杉 (Taxusmedia)的当年生新鲜枝叶中提取分离出mRNA ,然后根据已知植物的牛儿基牛儿基焦磷酸合成酶基因 (GGPPS基因 )DNA序列保守区设计特异简并引物。RT PCR获得了一条大小约 60 0bp的扩增谱带 ,回收该特异谱带并进行TA克隆 ,蓝白斑筛选 ,得到若干阳性克隆。经过质粒大小比较和PCR验证后 ,进行序列测定和同源性比较。发现该序列属于GGPP合成酶的片断 ,与Taxuscanadensis (AAD 1 60 1 8 1 )和Abiesgrandis (AAL1 761 4 2 )的GGPP合成酶相应区段的氨基酸序列一致性为 98%和 86%。蛋白质序列分析发现该序列含有一个特征的异戊二烯合成酶保守的结构域。进化树分析表明 ,曼地亚红豆杉GGPPS在进化上位于植物类 ,靠近古细菌类。曼地亚红豆杉GGPPS基因的克隆为研究红豆杉生产紫杉醇的分子机理和转基因植株的构建奠定了良好的基础。

摘要：运用单因素随机区组设计,在田间栽培条件下,对曼地亚红豆杉(Taxus media Rehder)1年生幼苗施用3种细菌肥料〔放射性土壤杆菌肥料(Agr)、荧光假单胞菌肥料(PfPt)和微球菌肥料(Mic),浓度为2×10~7CFU·m L^(-1),施肥2次〕,对翌年生长期幼苗株高和冠幅的增长量变化以及枝叶中4种次生代谢物〔紫杉醇、三尖杉宁碱、10-去乙酰紫杉醇和10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ(10-DABⅢ)〕含量进行比较分析。结果表明:施用Agr、Mic和PfPt后的翌年11月份,曼地亚红豆杉幼苗株高和冠幅的增长量均大于CK(不施肥,对照)组,其中,施用PfPt后幼苗株高增长量最大,且显著高于CK组(P0.05)。施用Agr、Mic和PfPt后枝叶中紫杉醇、三尖杉宁碱和10-DABⅢ含量均显著高于CK组,其中,施用Mic后紫杉醇含量最高,施用PfPt后三尖杉宁碱和10-DABⅢ含量最高,且总体上显著高于其他处理组;施用Mic后10-去乙酰紫杉醇含量最高,且显著高于CK组及其他处理组,而施用Agr和PfPt后10-去乙酰紫杉醇含量与CK组无显著差异。研究结果显示:施用Agr、Mic和PfPt均对曼地亚红豆杉幼苗生长以及枝叶中次生代谢物积累有一定的促进作用,但不同细菌肥料的促进效应存在差异,因此,在曼地亚红豆杉的栽培过程中应根据不同需求选择适宜的细菌肥料。

摘要：以曼地亚红豆杉枝叶为试材,采用热回流法提取总黄酮,在单因素试验的基础上,采用Box-Benhken设计对曼地亚红豆杉枝叶总黄酮的热回流提取工艺进行优化,对其抗氧化活性进行研究,以期为曼地亚红豆杉的进一步开发利用提供参考依据。结果表明:最佳提取条件为液料比32∶1 mL·g^(-1),乙醇浓度63%,提取温度71℃,提取时间86 min,提取次数2次,该条件下曼地亚红豆杉枝叶中总黄酮的提取量为128.1 mg·g^(-1),该提取工艺稳定可行。曼地亚红豆杉枝叶总黄酮在设定最大质量浓度时,DPPH自由基、ABTS+自由基和亚硝酸盐的清除率分别为91.04%、99.17%和65.50%,表明曼地亚红豆杉枝叶总黄酮具有较强的体外抗氧化能力。

摘要：概述了曼地亚红豆杉林的基本情况,分析了曼地亚红豆杉音乐园林对生态环境的保护作用,就曼地亚红豆杉音乐园林如何发挥对经济发展的促进作用展开探讨,提出:打造生态园林品牌,可带动旅游发展;开发特色林业养生园区,可带动林下经济和“林家乐”文化发展;依托康养社区品牌,建成新型林水大景区,拉动房地产及烟台新型养老产业发展3个策略。

摘要：采用L9(34)正交实验设计,研究了温室盆栽和田间栽培条件下,不同氮、磷、钾施用水平对曼地亚红豆杉‘Hicksii’(Taxus media‘Hicksii’)生长及紫杉醇含量的影响。结果表明,不同的氮、磷、钾施用水平对曼地亚红豆杉‘Hicksii’盆栽苗和田间栽培苗的生长量、枝叶产量和紫杉醇含量有显著影响,影响效应从大至小依次为氮、磷、钾。根据生长综合指标确定最有利于曼地亚红豆杉幼苗生长的氮、磷、钾施用量分别为400、66和200 mg.L-1;最有利于紫杉醇积累的氮、磷、钾施用量分别为200、66和133 mg.L-1。此外,曼地亚红豆杉‘Hicksii’田间栽培苗的生长量、枝叶产量和紫杉醇含量显著高于盆栽苗。

摘要：本文通过对曼地亚红豆杉生物生态学特性、资源分布状况、紫杉醇国内外市场需求以及建设地自然条件等相关问题的研究,提出在陕西秦岭南坡建设曼地亚红豆杉药用林基地的的可行性和必要性。