摘要：为了提高对流免疫电泳实验的成功率和缩短电泳时间,本实验以BSA和自制备的兔抗BSA抗血清作为实验材料,通过优化和改变电泳介质、电泳缓冲液等条件,观察比较抗原-抗体沉淀线形成的位置、形状情况来探索符合实验教学要求的过程方案。结果表明,在100 V电压下,采用TAE作为缓冲液、1.0%~1.2%的琼脂凝胶作为电泳介质时,电泳15~20分钟内可形成白色、清晰可见的抗原-抗体沉淀线,实验效果最佳。

摘要：自然界中砷和砷的化合物一般可通过水、大气和食物等途径进入人体,危害人体健康,原子荧光光谱法测定砷含量被广泛应用。为准确测定样品中砷的含量,以原子荧光光谱法(AFS)测定土壤中总砷含量为例,重点研究高价态砷(Ⅴ)还原为低价态砷(Ⅲ)的实验条件,采用正交实验进行条件优化,建立适合的实验方法。通过设计L_(9)(3^(4))正交实验,高价态砷的还原反应与四个因素有关,即与反应温度、反应时间、盐酸加入量和硫脲的用量呈一定的正相关,结果表明,四个因素中硫脲用量的影响最为显著,其次是盐酸加入量、反应时间和反应温度。通过对四个因素的多水平检验,优化后的实验条件为:硫脲用量2.0 mL、盐酸加入量10%、反应时间20 min、温度20~35℃(即普通室温)。采用土壤标准物质验证优化后条件的可行性,得出砷的测定值在标准值范围内,RSD在2.2%~4.2%,精密度和准确性均满足质控要求。优化后的实验条件使得操作简便易行,提高了工作效率。

摘要：以积累总蛋白为目标,评估40个芜萍株系的干物质积累速率、蛋白质含量和蛋白质积累速率,筛选出1株最优株系D0039开展进一步系统研究.在单因素试验的基础上,采用中心组合试验设计(Central Composite Design,CCD)响应面法对D0039的培养条件进行优化.根据实验模型预测最优的条件组合为尿素氮(NH_(2)^(+)-N)浓度90 mg/L、光照强度150μmol m^(-2)s^(-1)、覆盖率150%,该条件下的干物质积累速率为9.72 g m^(-2)d^(-1),蛋白含量为46.96%,蛋白积累速率为7.53 g m^(-2)d^(-1).对预测条件进行实验验证,结果显示实际干物质积累速率为10.38g m^(-2)d^(-1),蛋白含量为47.13%,蛋白积累速率为6.68 g m^(-2)d^(-1).实际实验结果与模型预测值比较,相对误差分别为6.79%、0.36%、11.29%.可见,响应面分析法提供的实验模型能真实地拟合实际情况;根据上述优化条件,D0039积累蛋白质效率高;结果可为利用芜萍作为蛋白质资源提供技术参考.(图5表3参29)

摘要：为解决畜禽废弃物及园林废弃物中纤维素降解难的问题,本试验采用刚果红染色法、滤纸崩解试验和测定内切葡聚糖酶(羧甲基纤维素酶)活力法从竹屑、枯枝烂叶、羊粪等废弃物中筛选高效的纤维素降解真菌,并对该真菌进行分子生物学鉴定。结果表明,本研究筛选到1株高效纤维素降解真菌,经形态学观察和菌种鉴定确定其为长枝木霉菌(Trichoderma longibrachiatum),并命名为*** ZJ-10。单因素试验得出菌株ZJ-10最适产酶培养条件为接种量3%,初始pH 6.5,转速160 r/min,温度40℃,培养5 d,此时达到最大产酶活力;通过Plackett-Burman试验设计、Box-Benhnken最陡爬坡路径方法及响应面法得出菌株ZJ-10最适产酶培养基配方为NaCl 5 g/L、蛋白胨7 g/L、羧甲基纤维素钠12 g/L。在最适条件下测定的菌株ZJ-10的酶活力可达到80.32 U/mL,比优化前提高了26.45%。综上所述,本研究筛选出1株产内切葡聚糖酶活力较强的木霉真菌*** ZJ-10,为畜禽及园林废弃物资源化利用提供了良好的菌种资源。

摘要：本试验旨在探究不同发酵条件对复合益生菌发酵饲料品质的影响。选用3株乳酸菌(鼠李糖乳杆菌、乳酸片球菌、干酪乳杆菌)、2株酵母菌(酿酒酵母菌、毕赤酵母菌),采用4因素(接种比例、接种量、水料比、温度)3水平正交设计对精补料发酵条件进行优化,共设9个组,测定各组发酵饲料中氨态氮(NH3-N)、可溶性糖(SS)、淀粉(ST)含量,pH以及3种霉菌毒素——黄曲霉毒素B1(AFB1)、玉米赤霉烯酮(ZEN)、呕吐毒素(DON)含量和微生物群落结构变化,用极差分析法确定综合指标最优时的发酵条件;将精补料在最优发酵条件下发酵不同时间(0、1、3、5、7、10、15 d),通过测定发酵饲料中常规营养成分含量、酶活性、霉菌毒素含量以及有氧稳定性,确定最佳发酵时间。结果表明:1)AFB1、ZEN含量优化组为G1(接种量5%,接种比例1∶1、温度20℃、水料比0.4∶1)、G7组(接种量15%,接种比例2∶1、温度20℃、水料比1∶1),NH3-N含量优化组为G3(接种量5%,接种比例2∶1、温度30℃、水料比1∶1)、G7组,ST含量优化组为G6组(接种量10%,接种比例2∶1、温度30℃、水料比0.4∶1),DON含量优化组为G5(接种量10%,接种比例1∶2、温度25℃、水料比1∶1)、G7组,SS含量优化组为G4(接种量10%,接种比例2∶1、温度20℃、水料比0.6∶1)、G6组。2)16S测序结果显示,G3组发酵饲料中微生物的α多样性和β多样性均显著高于G1、G2(接种量5%,接种比例1∶2、温度25℃、水料比0.6∶1)、G4、G6、G7、G8(接种量15%,接种比例1∶1、温度30℃、水料比0.4∶1)、G9组(接种量15%,接种比例1∶2、温度25℃、水料比0.6∶1)(P0.05);G3组中植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、短乳杆菌(Lactobacillus brevis)的相对丰度显著高于G1、G2、G4、G5、G6、G8、G9组(P0.05)。3)与发酵第0天(未发酵)时相比,发酵饲料粗蛋白质(CP)含量、纤维素酶(CL)、脂肪酶(LPS)、酸性蛋白酶(ACP)活性均在发酵第5天时显著升高(P<0.05),NH3-N、中性洗涤纤维(NDF)、酸性洗涤纤维(ADF)含量均在发酵第5天时显著降低(P<0.05),β-淀粉酶(β-AL)活性、pH以及SS、ST、AFB1、ZEN、DON含量均在发酵第10天时显著降低(P<0.05)。4)发酵饲料有氧暴露20 d后,其中心温度高出环境温度2℃,同时pH异常增大。结论:1)精补料最优发酵条件为接种量5%,接种比例2∶1、温度30℃、水料比1∶1,该发酵条件能够有效提高发酵饲料中微生物的多样性,提高Lactobacillus brevis的相对丰度。2)精补料最佳发酵时间为5 d,该发酵时间可提高发酵饲料的营养成分含量,降低霉菌毒素含量。3)发酵结束开盖后,发酵饲料应在20 d内喂完。

摘要：多糖是蛹虫草Cordyceps militaris产生的重要活性成分。为提高其液体发酵胞外多糖的产量,通过单因素轮换法、方差分析、正交试验对蛹虫草菌株YCC-H产胞外多糖的发酵条件进行了优化。单因素结果表明液体发酵最适初始pH为5,最适葡萄糖浓度(质量分数)为6%,最适氮源为酵母膏,最适装液量为80 mL/250 mL,最适接种量(体积分数)为12%;在不同培养条件下菌体生物量变化较大;通过方差分析及正交试验进一步优化,结果显示:装液量(A)、氮源(B)、接种量(C)对蛹虫草产胞外多糖影响程度为B>A>C,最佳条件组合为A_(2)B_(3)C_(2),即装液量80 mL/250 mL、酵母膏为唯一氮源、接种量(体积分数)为12%,其余因素选择单因素中最佳水平。经验证,该菌株合成胞外多糖的质量浓度达247.06 mg/L,较未优化前胞外多糖的产量23.67 mg/L提高了9.43倍。

摘要：对一株从芦苇根部土壤中分离得到的产黄色素菌株BX-1进行分离鉴定并优化BX-1菌株产黄色素培养条件。采用形态学观察、分子生物学鉴定方法与单因素、正交试验的试验设计,可得BX-1菌株为革兰氏阳性细菌,盐生谷氨酸杆菌(Glutamicibacter halophytocola);该菌株产胞内黄色素,易溶于甲醇,在411、438、467 nm处存在吸收峰;BX-1菌株最适固态培养条件:20℃光照培养240 h;固态培养基组成为3%谷氨酸钠、3%豆粕粉、0.5%酵母浸出粉、1%氯化钠、0.25%磷酸二氢钾、0.1%硫酸镁、初始pH7.0。

摘要：目的优化用醋酸菌生产菌膜的最适培养条件和方法,以期获得天然、安全的食品包装用膜的生产工艺。方法以涩柿醋为原料,分离筛选出高产菌膜的优良醋酸菌种,通过单因素和Plackett−Burman等试验设计优化醋酸菌菌膜最适培养方法和工艺条件。结果从涩柿醋中分离纯化获得产膜醋酸菌,经鉴定为葡糖醋杆菌。用醋酸菌生产醋酸菌菌膜最优培养条件:蔗糖质量分数为5%、蛋白胨质量分数为0.7%、酵母提取物质量分数为1.2%、柠檬酸钠质量分数为0.15%、K_(2)HPO_(4)质量分数为0.16%、乙酸体积分数为1%、无水乙醇体积分数为2%,种龄为32 h,接种量为9%;培养5 d后,醋酸菌菌膜的平均产率为364.65 g/L,是优化前的(246.03 g/L)的1.48倍。湿膜平均含水率为99.38%,复水率为71.09%~83.39%,菌膜干膜复水率高且复水速度快,复水1 min其含水率便可达到70%以上。结论醋酸菌用经过优化选择的培养液和方法,可生产出高质量的菌膜。

摘要：姬松茸(Agaricus blaize Murrill)是一种药食同源食用真菌,其味道鲜美,别具香味,且其子实体内富含多种氨基酸、脂肪、矿物质、纤维素及微量元素等人体必需的营养成分,经常食用还具有提升机体免疫力,延缓衰老等保健功效。本研究以姬松茸母种JS05为试验材料,考察温度、光照、pH值和不同培养基对菌丝生长速度的影响,结果表明:24~30℃是菌株生长的最适温度范围,菌丝生长速度较高,其中在27℃条件下菌丝的生长速度最高,达到4.6 mm·d-1;当培养基pH值为6时,菌丝的生长速度最高;在黑暗条件下,菌丝的生长速度较高;马铃薯培养基比玉米粉培养基更适合菌丝生长。正交试验结果表明:采用加富培养基在培养温度为27℃,pH值为6的条件下,菌丝生长速度最高;pH值是影响姬松茸母种菌丝生长的最关键因素,在母种培养时应着重加以注意。

摘要：本研究从河西走廊盐碱土中分离得到的多株对植物病原菌具有拮抗活性的细菌菌株中,筛选当归根腐病拮抗菌株,为当归根腐病的生物防治提供适合的菌种资源.采用平板对峙、琼脂扩散法筛选拮抗细菌,通过形态学、生理生化试验及分子生物学鉴定法确定菌株分类学地位;以活性物质稳定性试验为基础,设计单因素试验,响应面分析法优化培养条件.结果表明:菌株A17-2-1具有较好的当归根腐病拮抗活性,且抗菌谱较广,经鉴定为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis);其活性物质在高温、强碱及紫外照射下均具有较好的稳定性;最优培养条件为pH8.5、温度32℃、氯化钠含量0.5%,在此条件下培养24 h,菌株A17-2-1菌悬液在波长600 nm处吸光度值为1.360,且在该条件下对两株当归根腐病病原菌的抑菌率均达到81.01%以上.