摘要：针对传统高糖果酱的缺陷,以枇杷和桑葚为主要原料研制低糖复合果酱。通过单因素实验对枇杷占复合果浆添加比、柠檬酸添加量、白砂糖添加量和果胶添加量进行筛选,根据感官评分,采用Box-Benhnken中心组合设计试验,优化低糖枇杷桑葚复合果酱的配方。结果表明,最佳配方参数为:枇杷占复合果浆添加比为32%,柠檬酸添加量为0.1%,白砂糖添加量为20.5%,果胶添加量为1.0%,在此条件下制得低糖枇杷桑葚复合果酱的感官评分为(91.29±1.02)分。产品酱色亮紫,酸甜协调,果味浓郁,酱体黏稠适度,凝胶稳定性良好,总酸为1.01%,pH为3.64,水分为67.84%,灰分为0.36%,蛋白质为0.82%,维生素C为8.69 mg/100 g,可溶性固形物为31.51%,相比GB/T 22474-2008《果酱》中含糖量≤65%的标准,产品的总糖为27.02%,满足果酱市场对低糖的需求,微生物指标符合国家标准。研究结果可为低糖枇杷桑葚复合果酱的产品开发和工业化生产提供理论参考。

摘要：【目的】为开发准确的枇杷果肉颜色早龄鉴定分子标记,加速枇杷品种改良进程。【方法】基于枇杷八氢番茄红素合成酶基因EjPSY2A在黄肉和白肉枇杷品种间的序列差异设计2对InDel分子标记,经初步筛选后选取分型结果清晰的引物PSY2A-2对85份枇杷种质资源与杂交后代分型鉴定的准确性进行验证,并通过TA克隆方法对EjPSY2A位点扩增片段的正确性进一步验证。【结果】所有42份白肉枇杷材料具有纯合的EjPSY2A^(d)基因型,而43份黄肉枇杷材料全部为纯合的EjPSY2A基因型或者EjPSY2A^(d)与EjPSY2A杂合基因型,并通过TA克隆的方法证实了‘大五星’枇杷的扩增大片段为纯合EjPSY2A等位基因。【结论】开发的PSY2A-2分子标记可以准确地将黄肉和白肉枇杷种质资源区分,对指导枇杷杂交后代早龄选择育种具有重要意义,有助于加速枇杷育种工作的进程。

摘要：为了提高无人机对枇杷喷施叶面肥的作业效果,探究了植保无人机大疆T30作业参数对枇杷冠层雾滴沉积分布的影响,在江苏省苏州市东山镇枇杷种植试验基地,设置作业高度、作业速度、每667 m~2用液量3个因素,每个因素3个水平,采用正交试验设计,对枇杷植株进行无人机喷施叶面肥作业,测定分析不同飞行作业参数处理的雾滴沉积密度、雾滴覆盖率和雾滴穿透性。结果表明,综合不同处理的雾滴沉积密度、雾滴覆盖率和雾滴穿透性,供试植保无人飞机对枇杷喷施叶面肥的最佳作业参数为作业高度2.0 m、作业速度4.5 m/s、每667 m~2用液量2.0 L。雾滴穿透冠层的最大影响因素是工作高度,作业高度1.5 m的雾滴沉积和穿透性较好。

摘要：作品说明:本设计灵感来选自岭南特色的荔枝、木棉、枇杷、岭南建筑的山墙四种南方风物为灵感,用手绘图案寄托家乡之情。晚宴包系列的工艺结构采用了口金硬质盒子,手工制作精致,实现了传统与时尚的碰撞,设计风格高贵、典雅。

摘要：【目的】建立和优化枇杷AS-PCR反应体系,为开展枇杷S基因快速鉴定奠定基础。【方法】以‘大五星’、‘早钟6号’和‘龙泉5号’为试材,通过正交实验设计对影响枇杷AS-PCR反应较大的Mg2+等5个因素的浓度进行筛选,并对扩增反应程序进行优化,运用正交设计直观分析法和DPS 7.05统计软件对扩增结果进行方差分析。【结果】优化后的枇杷AS-PCR反应分析体系为:25μL反应体系中,含10×buffer2.5μL,Mg2+浓度2.0 mmol·L-1,Taq酶1.5 U,引物0.5μmol·L-1,模板DNA80ng,dNTPs0.4 mmol·L-1。反应程序为94℃预变性1 min;94℃变性30 s,退火温度30 s,72℃延伸1 min,35次循环;72℃延伸5 min,4℃保存。【结论】建立了基于S基因保守序列设计引物的枇杷AS-PCR反应体系,利用该体系成功确定了‘大五星’的S基因型为S2-S41,其中S41为新分离鉴定的枇杷S-RNase基因,它们在GenBank上的登录号分别为JQ228451和JX217035。

摘要：根据蔷薇科植物β-胡萝卜素羟化酶基因的保守区序列,设计1对PCR引物,以枇杷基因组DNA为模板,采用PCR方法扩增出长约450 bp的DNA片段,克隆人pMD-18T载体中,测得该基因片段长为440 bp,编码145个氨基酸,属于开放阅读框的一部分,不含内含子。在GenBank中进行同源性检索,结果该序列与苹果β-胡萝卜素羟化酶基因同源性为95%,证明它属于枇杷的β-胡萝卜素羟化酶基因。

摘要：【目的】枇杷基因组数据尚未公布,限制了枇杷分子生物学的研究。当前很多研究集中在上游转录因子和下游基因启动子之间的调控关系上,所以获得目的基因的启动子显得尤为重要。传统方法使用PCR方式进行染色体步移来获得启动子区域,耗时且难出结果。【方法】对‘火炬’枇杷进行二代测序,二代测序为双端测序,片段含盖200到500bp的序列。根据下游基因序列通过测序片段来实现染色体步移。使用现有程序Magicblast和新开发的Promoter_Scan脚本程序来快速获取目的基因启动子区域。Promoter_Scan对每对Reads构建10 bp的索引序列,先使用索引匹配目的基因,匹配后使用目的基因前30 bp序列再次匹配目标Reads,最后完成拼接。【结果】通过二代测序共获得61.77 GB的‘火炬’枇杷基因组数据,测序深度约为85倍。使用Magicblast检索匹配Reads耗时长,难以二次开发,需要手动拼接延伸,每个基因启动子挖掘需要9.5 h。新开发Promoter_Scan脚本程序通过两次匹配,能够更快更准确地找到启动子序列。对枇杷中8个基因进行启动子查找,向上延长2 000 bp序列平均需要拼接11.7次,耗时21.3 min。根据步移后的序列设计引物进行验证,结果显示:Sanger测序结果和预测的序列高度一致。【结论】使用Magicblast检索方式能够达到实验要求,不需要编程技能,但是耗时长。Promoter_Scan能够实现自动延伸,显著缩短启动子挖掘时间。本研究中的两种方法不仅可以用于枇杷分子生物学的研究,对其他未公布基因组数据的物种同样适用。

摘要：为从分子水平研究枇杷成花的机理,通过分析植物花分生组织决定基因LEAFY(LFY)同源基因的保守区序列,设计了1对简并引物,用PCR方法从枇杷栽培品种‘早钟6号’基因组DNA中扩增出1个1317bp的片段,把该片段克隆到pUCm T载体,测序和序列分析结果表明获得了枇杷LFY同源基因(ejLFY) 3′端的1个片段,该片段有1个911bp的内含子,编码区共编码130个氨基酸,其序列已经在GenBank中登记(登录号为AY5 5 1183) .在GenBank中进行同源性搜索,发现该基因片段与其他作物中已经报道的LFY同源基因的同源性大都在94 %以上,特别是与同属于蔷薇科的苹果的同源性最高,达到98%的同源性。

摘要：采用正交设计对影响枇杷ISSR-PCR的模板DNA、dNTPs、Primer、Taq酶及Buffer(含Mg2+)进行优化。试验结果表明:20μL反应体系中,含模板DNA5ng、dNTPs0.25mmol/L、Primer0.25μmol/L、Taq酶0.5U和10×Buffer(含Mg2+)3μL。此外,从95条ISSR引物中筛选出11条具有丰富的多态性位点的引物,同时优化各引物退火温度。

摘要：根据已知的杏仁、黑樱桃醇腈酶基因序列设计了一对同源引物,扩增得到枇杷醇腈酶基因的部分序列.分别设计了三条基因特异性引物和一条基因非特异性引物,采用改进的SEFA PCR方法,进行上下游未知序列的扩增,成功地获得包括启动子区、转录终止子在内的枇杷醇腈酶基因序列,全长5.5 kbp.所得醇腈酶基因含有4个外显子和3个内含子.编码的氨基酸残基序列包括25个氨基酸残基的信号肽和527个氨基酸残基的成熟酶蛋白.采用重叠延伸PCR方法将4个外显子连接获得了连续的醇腈酶编码基因,与pET27b(+)质粒成功构建表达载体,转化Rosetta(DE3).表达的醇腈酶大部分以包涵体形式存在,最终表达的酶活力为1.2 ***-1.