摘要：目的:优化并建立多重位点聚合酶链式反应(PCR)体系同时鉴别酸枣仁、枳椇子和理枣仁及不同掺伪量,解决酸枣仁药材商品及其制剂的掺伪难题。方法:通过分析比对酸枣仁及其伪品的内部转录间隔区(ITS)序列差异找到特异性单核苷酸多态性(SNP)位点,设计特异性鉴别引物,通过优化退火温度、循环次数及引物浓度,评估不同聚合酶种类和不同PCR仪等扩增条件对不同来源的酸枣仁、枳椇子及理枣仁样品进行特异性扩增,根据特异性扩增条带大小进行鉴别,并对最低检测限和掺伪检出限进行研究。结果:在退火温度为63℃,循环次数为23次时,酸枣仁、枳椇子和理枣仁分别扩增出549、169、389 bp的特异性条带。该方法对酸枣仁和理枣仁的最低检测限为0.24 ng,枳椇子为1.2 ng,对酸枣仁、枳椇子和理枣仁的掺伪检出限分别为0.5%、2%和2%。结论:该文建立的多重位点特异性PCR鉴别方法能同时准确鉴别酸枣仁、枳椇子和理枣仁,对解决酸枣仁药材掺伪问题提供基础研究,为控制酸枣仁药材质量安全及临床应用提供参考。

摘要：目的:针对市场上出现的酸枣仁药材掺假现象,开发一种快速鉴别酸枣仁药材是否含有掺伪品的方法。方法:基于多重连接探针扩增技术(MLPA),针对酸枣仁与理枣仁ITS2序列205位点处A/G变异,以及枳椇子170位点分别设计酸枣仁、理枣仁与枳椇子的MLPA探针,MLPA扩增后依据熔解曲线Tm值差异来进行鉴别,并考察了特异性、敏感度、掺伪比等内容,以验证该方法的可行性。结果:酸枣仁、理枣仁和枳椇子分别与特异性探针在85.56℃、87.26℃和83.93℃处出现单一扩增峰,表明探针特异性好;通过不断稀释DNA模板,仍旧可以检测出0.05 ng酸枣仁DNA量,同样酸枣仁中掺入10%的伪品均可被有效检出,表明该方法具有高灵敏度。结论:该研究建立的酸枣仁药材及其混伪品鉴别方法具有特异性强、灵敏度高的特点,对于解决酸枣仁药材掺伪问题具有良好的推广应用价值。

摘要：[目的]采用葛根、枳椇子、红茶和罗汉果进行解酒袋泡茶产品的配方优化,并探讨其解酒功效。[方法]应用D-最优混料设计法研究解酒茶的最优配方,建立各原料配比与解酒活性物质总黄酮含量及感官审评分数的回归方程,并建立小鼠急性酒精中毒模型,观察小鼠醉酒行为学指标,采集小鼠血液检测乙醇含量,采集小鼠肝脏检测乙醇脱氢酶(ADH)、乙醛脱氢酶(ALDH)水平。[结果]配方优化获得解酒茶各原料最优添加比例为红茶50.0%、葛根41.7%、枳椇子8.3%、罗汉果0%。该配方袋泡茶各项指标为总黄酮含量26.12 mg/g,感官评分88.10分,口感甘醇,富含解酒活性成分。功效试验结果表明,解酒茶各剂量组平均延长醉酒潜伏期24.44 min,缩短醉酒维持时间205.18 min,明显改善醉酒小鼠的行为学指标。同时,低、中、高剂量组显著降低小鼠饮酒后1、2 h的血乙醇浓度(P<0.05);且中剂量组小鼠血乙醇浓度在3 h后依旧显著低于模型组(P<0.01)。此外,高剂量组显著提高了肝脏ALDH的活性(P<0.01)。[结论]解酒茶香气怡人,滋味醇和,且具有良好的解酒、醒酒功效,能满足大健康时代“绿色、天然、健康、便捷”的日常解酒需求。