摘要：以大豆卵磷脂和胆固醇为膜材,采用薄膜分散水化法,以包合率为目标采用响应面法对枸杞多糖的脂质体制备工艺进行优化。通过单因素实验得出药脂比(枸杞多糖与膜材的质量比)、膜材比(大豆卵磷脂与胆固醇的质量比)、水化温度均对包合率有影响。在此基础上,根据Box-Benhnken中心组合方法设计3因素3水平的试验,以包合率为响应值,做响应面分析。得到最佳工艺条件为:药脂比为1∶32.15、膜材比为3.84∶1、水化温度为43.26℃。此条件下预测包合率为70.77%,实际包合率为70.10%,误差值为0.95%,实验结果表明此方法包合率较高且易于控制。同时扫描电镜下观察到水化后枸杞多糖脂质体形态特征。

摘要：背景:近年研究表明,枸杞多糖具有很强的抗氧化作用,可以清除超氧阴离子(O2-?)和羟自由基(?OH),具备诱导剂的基本条件,但将其用作诱导剂的报道甚少。目的:以枸杞多糖作为诱导剂,探讨其体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化的可行性。设计、时间及地点:细胞学体外对照观察,于2008-09/12在辽宁医学院解剖实验室完成。材料:SD大鼠8只,由锦州医学院动物中心提供。枸杞多糖为宁夏杞瑞康有限公司产品。方法:无菌条件下取出大鼠股骨,利用贴壁筛选法体外分离培养骨髓间充质干细胞。取生长状态良好的第2代细胞进行诱导实验,将1×107L-1细胞悬液1mL接种于预先放置盖玻片的24孔板内,每孔加入1mL预诱导液(含枸杞多糖1g/L、体积分数为15%胎牛血清的DMEM完全培养基),置37℃、体积分数为5%的CO2孵箱内继续培养,24h后更换诱导液(含1g/L枸杞多糖的无血清DMEM培养基),于上述CO2孵箱内诱导。并设立添加全反式维甲酸的阳性对照组,以及空白对照组。主要观察指标:诱导过程中镜下动态观察细胞形态学变化。诱导第8,24h采用免疫组织化学技术检测细胞内nestin,NF,GFAP的表达。结果:骨髓间充质干细胞原代培养24h大部分贴壁生长,第3天进入指数生长期,细胞增殖加速,7～9d接近汇合。传代细胞较原代细胞生长加快,第3代细胞纯度较高且增殖活跃,传至12代细胞仍然存活。预诱导后骨髓间充质干细胞形态无明显变化,诱导4h后细胞变凸,从胞体伸出突起;24h后细胞突起明显,突起相互连接呈网状,表现出典型的神经细胞形态。免疫组织化学检测结果显示,诱导后细胞浆内nestin,NF均呈阳性表达,GFAP呈阴性。结论:在体外枸杞多糖能够成功诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化神经元样细胞。

摘要：提出了一种超声波辅助水提取枸杞多糖的工艺。以枸杞子为原料,用正交设计和单因子实验方法考察了提取温度、时间、料液比对提取率的影响。料液比对提取率影响最大,其次是提取时间,温度的影响最小。超声水提取初始温度以室温为宜,每步超声提取20min,料液比选为1∶3,采取四次提取,用可见紫外光谱确证提取的枸杞多糖和粗色素,其收率分别达10%和17.2%。以DEAE-纤维素离子交换层析法对多糖加以分级,再经葡聚糖凝胶柱层析脱盐处理,得到了5个单一的多糖,并通过聚丙烯酰胺葡聚糖凝胶柱层析和红外光谱检测得到确证。

摘要：目的探讨枸杞中甜菜碱、牛磺酸、枸杞多糖(lycium barbarum polysaccharides,LBP)分别对β-胡萝卜素(β-carotene,β-C)在比格犬体内药动学的影响。方法采用随机、对照双周期交叉实验设计,将6只比格犬随机分为2组,分别给予β-胡萝卜素,β-胡萝卜素合并甜菜碱或牛磺酸或枸杞多糖;按设定时间点采血,采用HPLC测定比格犬血浆中β-胡萝卜素、视黄醇、视黄醉棕榈酸酯的血药浓度,经DAS2.0.1计算药动学参数。结果与单独给β-胡萝卜素相比,合并给药后甜菜碱可使β-胡萝卜素在比格犬体内t_(1/2)显著延长(P0.05)。结论枸杞中甜菜碱和牛磺酸可显著影响β-胡萝卜素在比格犬体内的药动学,表明枸杞"滋肝明目"并不是一种成分单一作用的结果,而是多种成分共同作用的结果。

摘要：目的:制备枸杞多糖(LBP)含片,并考察其免疫调节作用。方法:以含片的外观、口感、硬度、崩解时限为综合评价指标,采用单因素试验考察LBP提取物用量、填充剂、润湿剂、矫味剂、香精、崩解剂、润滑剂对LBP含片质量的影响,结合星点设计-效应面法优化LBP含片的处方。昆明种小鼠随机分为5组,即LBP含片低(100 mg·kg^-1·d^-1),中(200 mg·kg^-1·d^-1),高(300 mg·kg^-1·d^-1)剂量组,正常组(0.9%生理盐水,300 mg·kg^-1·d^-1)和阳性药组(赐能素组,300 mg·kg^-1·d^-1),计算小鼠免疫器官指数、单核巨噬细胞吞噬指数、血清溶血素抗体水平及迟发型变态反应(DTH)的足趾厚度差,探讨LBP含片的免疫调节作用。结果:LBP含片最优处方为LBP提取物用量80%,糊精-甘露醇(1.2∶1)用量11.5%,甜蜜素-苹果酸(1∶1)用量1%,奶油香精用量0.5%,羧甲基淀粉钠(CMS-Na)用量6.5%,硬质酸镁用量0.5%,80%乙醇适量;在该最优条件下,LBP含片硬度11.83 kg,崩解时限13.21 min,均符合2015年版《中国药典》的相关规定,且制得的含片外观、口感均较好。与正常组比较,LBP含片中、高剂量组可显著增加小鼠胸腺指数、脾脏指数和吞噬指数(P<0.05,P<0.01),LBP各剂量组均可显著增加小鼠血清溶血素抗体水平(P<0.05,P<0.01),LBP含片高剂量组可显著提高小鼠DTH程度(P<0.05)。结论:采用星点设计-效应面法优选所得的LBP含片处方工艺稳定可行,LBP含片可改善正常小鼠的免疫调节功能,为枸杞及LBP的开发利用、临床应用提供了实验依据。

摘要：该试验以水为溶剂提取宁夏枸杞中的枸杞多糖,分别考察提取温度、料液比、时间因素对提取率的影响,以上述3种单因素设计正交试验,优化枸杞多糖的提取条件。试验表明,温度和时间具有显著性(p<0.05),最终确立提取工艺的最佳条件是:以水加热回流提取,温度为90℃,时间为2.5 h,料液比为1︰25,提取3次,提取率达到10.33%。

摘要：目的探讨枸杞多糖(lycium barbarum polysaccharide,LBP)对大鼠背部任意皮瓣存活状态及术后炎性因子、凋亡因子的影响。方法取84只SD雄性大鼠,随机平均分成4组,在大鼠背部依照样布设计4.5 cm2的任意皮瓣。对照组术后采用生理盐水灌胃(LBP0组),实验组术后用200、400、800 mg/(kg·d)LBP灌胃,分别为LBP200、LBP400、LBP800组,持续时间为2周。记录各组大鼠皮瓣术后的一般情况,包括炎性渗出、水肿、皮瓣张力、皮温及坏死。各组分别于术后0.5、1、3、5、7、10及14 d随机选取3只大鼠测算皮瓣存活面积。切取皮瓣组织样本,采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测皮瓣组织中TNF-α、Caspase-3因子的mRNA表达。结果大鼠背部任意皮瓣造模后3 d,各组皮瓣创面均可见不同程度渗血及肿胀,部分皮瓣逐步出现暗红至青紫,术后7 d皮瓣坏死逐渐显现,术后10 d坏死边界渐清晰,术后2周坏死区域结痂翘起。各组大鼠术后1周内,皮瓣存活面积差异无统计学意义(P>0.05)。术后3 d,LBP800与LBP0组相比,TNF-α因子mRNA表达差异有统计学意义(P<0.05),且在术后10 d差异更明显(P<0.01)。术后5 d,LBP400与LBP0组相比,TNF-α因子mRNA表达量也存在差异(P<0.05);LBP800与LBP0组相比,Caspase-3因子mRNA表达量存在差异(P<0.05),且术后14 d两组差异更明显(P<0.01)。术后7 d,LBP400与LBP0组相比,Caspase-3因子mRNA表达量存在明显差异(P<0.05)。结论适宜浓度的LBP干预可显著降低皮瓣炎性反应因子及凋亡因子的mRNA表达,有助于降低皮瓣组织坏死的风险,改善皮瓣存活微环境。

摘要：枸杞主要生物活性物质是枸杞多糖。枸杞多糖粗品可以用枸杞子的水提液使用乙醇沉淀法提取。也可以从新鲜枸杞浆果制成的枸杞原汁 ,使用膜分离浓缩技术分离后低温冷冻干燥制成枸杞多糖粗品。枸杞多糖粗品在实验室可使用高压液相色谱仪的层析柱分离纯化 ,得到毫克量的枸杞多糖纯品。现在探索试验用YZS -3制备型液相色谱仪分离纯化枸杞多糖 ,可获得克量级以上的枸杞多糖纯品。

摘要：目的观察枸杞多糖(LBP)对加压诱导凋亡的视网膜神经节细胞(RGCs)钾K^+电流的影响,以探讨枸杞多糖对RGCs的保护作用。方法取SD乳鼠视网膜神经节细胞原代培养,分为对照组,加压组,LBP各剂量组(100,250,500,1 000μg·mL^(-1)),对照组常规培养6 d;加压组常规培养6 d后用自行设计的加压装置加压80 mm Hg,1 h;LBP各组常规培养5 d后,加入不同浓度的LBP共培养24 h后,再加压80 mm Hg,1 h。通过连续波长多功能微孔板检测仪检测各组RGCs线粒体的平均荧光强度值;通过全细胞膜片钳技术观察各组细胞膜电容(membrane capacitance,C_m)和钾(K^+)电流的变化。结果加压组C_m和RGCs线粒体荧光强度低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),LBP 250,LBP 500,LBP 1 000组RGCs线粒体荧光强度和C_m高于加压组(P<0.05,P<0.01)。电流记录显示,与对照组比较加压组外向K^+电流增加,用不同浓度的LBP预处理后,K^+电流增加都有抑制,且呈剂量依赖性(P<0.05,P<0.01)。结论枸杞多糖可抑制加压诱导的视网膜神经节细胞凋亡,其作用可能与抑制K^+电流有关。

摘要：实验采用超声波辅助技术提取枸杞多糖,并通过均匀设计法研究了液料比、提取时间、提取温度和超声功率对枸杞多糖提取的影响。枸杞多糖超声提取的最佳工艺为:液料比21mL/g,提取时间27m in,提取温度63℃,超声功率200W,在该条件下枸杞多糖得率为5.16%,且表现稳定。均匀设计法在优化枸杞多糖提取条件中应用效果良好。