摘要：目的探讨枸杞多糖(LBP)对视网膜光损伤形态及功能的影响。设计实验性对照研究。研究对象SD大鼠60只,每组10只。方法建立视网膜光损伤模型,未治疗组于光照前、光照后1天、6天及14天行暗视闪光视网膜电图(ERG)检查,检查完后取每组大鼠眼球上方中央部视网膜行组织病理学检查。于光照前24h及0.5h腹腔注射LBP和生理盐水分别作为LBP治疗组及阳性对照组,光照后1天行暗视闪光ERG,后取眼球上方中央部视网膜标本行组织病理学检查。主要指标ERG b波振幅,视网膜形态学。结果在未治疗组,光照后各时间点标本与正常组对比ERG b波振幅明显下降,第1天降至29.97%,而第6天、第14天b波振幅无继续下降。第1天标本组织形态学显示其损伤最严重,第6天、第14天标本形态上则慢慢恢复。LBP治疗组,ERG b波振幅较阳性对照组明显升高(P=0.005),视网膜形态学未见明显凋亡改变。结论LBP对大鼠视网膜光损伤的功能和形态损害具有防护作用。

摘要：目的观察枸杞多糖(lycium bararum polysaccharides,LBP)对体外高压诱导调亡的视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)钾电流的影响。方法生后2~3 d的SD乳大鼠RGCs原代培养,分为对照组、加压组和LBP组,对照组为常规培养6 d;加压组为常规培养6 d后用自行设计的加压装置加压1 h 80 mm Hg(1 k Pa=7.5 mm Hg);LBP组为常规培养5 d后,加入LBP共培养24 h后,再加压80 mm Hg 1 h。通过全细胞膜片钳技术观察各组钾电流、半数最大激活电压(V1/2)、斜率(K)、最大电导(Gmax)的变化。结果加压能使电流幅度显著增加,LBP能抑制加压引起的电流增加。在刺激电位为-10~60 m V时,加压组的电流密度明显大于对照组,差异有统计学意义(均为P0.05)。三组K值分别是17.09±1.24、16.58±1.18、18.13±1.29,总体差异无统计学意义(F=1.39,P>0.05)。三组Gmax总体差异有统计学意义(F=3.77,P0.05)。结论 LBP能抑制加压引起的RGCs钾电流增加,对RGCs具有保护作用。

摘要：目的探讨正己烷对大鼠性激素和卵巢雌激素受体(ER)表达的影响和枸杞多糖(LBP)在正己烷致生殖毒性中的保护作用。方法按照4×2析因设计的模型,将无特定病原体级成年雌性SD大鼠从正己烷染毒水平分为对照组和低、中、高剂量组4组,每组再分为无LBP干预与有LBP干预2个亚组,共8组,每组6只大鼠。第1天4组大鼠分别予剂量为0、675、1 350、2 700 mg/kg体质量正己烷一次性腹腔注射;第2~4天,4个无LBP干预亚组大鼠予等体积0.9%氯化钠溶液灌胃,4个LBP干预亚组大鼠予剂量为50 mg/kg体质量的LBP灌胃,每天1次。第5天处死大鼠,采用酶联免疫吸附实验检测血清卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇、孕酮水平;取大鼠卵巢,采用实时荧光聚合酶链式反应法检测Erα、Erβ、G蛋白偶联雌激素受体1(Gper1)的mRNA表达,采用蛋白免疫印迹法检测ERα、ERβ、GPER1蛋白的表达。结果①在无LBP干预(即单纯正己烷染毒)时,4组大鼠血清FSH、LH、雌二醇和孕酮的分泌水平分别比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,低剂量组大鼠卵巢Erβ mRNA相对表达水平下降(P<0.05),ERα和GPER1蛋白的相对表达水平均升高(P<0.05);中、高剂量组大鼠卵巢Erα mRNA和GPER1蛋白相对表达水平均升高(P<0.05),Erβ、Gper1 mRNA和ERβ蛋白的相对表达水平均下降(P<0.05);高剂量组大鼠卵巢ERα蛋白相对表达水平升高(P<0.05)。②相同正己烷染毒剂量下,LBP干预与无LBP干预比较,低剂量组大鼠卵巢Erα mRNA相对表达水平升高(P<0.05),ERβ和GPER1蛋白相对表达水平均下降(P<0.05);中剂量组大鼠卵巢ERα和GPER1蛋白相对表达水平均升高(P<0.05);高剂量组大鼠卵巢Gper1 mRNA和GPER1蛋白的相对表达水平均下降(P<0.05)。结论正己烷可诱导大鼠卵巢ERα和GPER1表达上调,但对大鼠雌性内分泌系统影响不显著。LBP可能通过上调ERα和GPER1的表达而发挥雌性生殖系统保护作用。

摘要：目的研究枸杞多糖(LBP)对氟化钠(NaF)致小鼠成釉细胞DNA损伤的影响。方法 离体培养小鼠成釉细胞,2个处理因素为NaF染毒(含浓度为0.00、0.25、0.50、1.00、2.00、4.00 mmol/L 6个水平)和LBP预处理(含质量浓度为0.00、100.00、200.00、400.00 mg/L 4个水平),6×4析因设计,2因素各水平全面组合共分24组,以浓度为0.00mmol/L NaF+质量浓度为0.00 mg/L LBP组为对照组。小鼠成釉细胞经LBP预处理24 h后,再给予NaF染毒,24 h后收获细胞,采用单细胞凝胶电泳检测DNA损伤情况。结果 分别以0.50、1.00、2.00、4.00 mmol/L NaF单独染毒的小鼠成釉细胞尾长、Olive尾距、尾部DNA%、尾长/头长值均高于对照组(P<0.05,P<0.01或P<0.001)。析因设计方差分析结果显示,LBP和NaF存在交互作用,差异均有统计学意义(P<0.001)。经质量浓度分别为100.00、200.00、400.00mg/L的LBP预处理后,在不同NaF染毒剂量的条件下,多数尾长、Olive尾距、尾部DNA%、尾长/头长值等DNA损伤指标值均低于相应剂量NaF单独染毒时的指标值(P<0.05,P<0.01或P<0.001)。结论 一定剂量NaF可致小鼠成釉细胞DNA损伤,LBP对氟诱导的小鼠成釉细胞DNA损伤起到一定的保护作用。

摘要：采用高压脉冲电场破壁方法,对影响枸杞多糖提取率(Y)的pH值(X1)、电场强度(X2)、脉冲频率(X3)、温度(X4)、液料比(X5)5个主要因素进行单因素和多因素分析。用SAS 9.1统计软件对星点设计方案的结果进行完全二次响应曲面的回归模型的拟合与模型的岭嵴分析。结果表明:当X1=8.98,X2=20.49kV/cm,X3=10520Hz,X4=61.76℃,X5=9.43:1(mL/g)时,枸杞多糖提取率最高(Ymax),为13.26%。在此基础上通过效应面法预测得出工业提取的工艺范围:X1=8.50～9.00,X2=15.00～25.00kV/cm,X3=10000～11000Hz,X4=20～40℃,X5=9:1～10:1(mL/g)。

摘要：利用三相萃取法可避开多糖的醇沉过程,达到短时间内分离多糖的同时,也可一定程度的分离子水提液中的蛋白质和黄酮的原理,本文采用此法分离枸杞多糖,考察了叔丁醇-(NH_4)_2SO_4-水提液体系的三相萃取性质,研究了提取液中(NH_4)_2SO_4的添加量、叔丁醇添加量、萃取液pH、温度对枸杞提取液多糖、蛋白质、黄酮的萃取率的影响,并通过正交试验优化了多糖的萃取条件,研究发现:多糖最佳萃取条件是:10 mL提取液中(NH_4)_2SO_4添加量为30%(w/v)、叔丁醇添加量为10 mL、温度为35℃、pH为6,此时多糖的萃取率可达95.31%,蛋白质萃取率可达83.45%,黄酮萃取率可达50.66%。通过多糖的红外光谱、抗氧化活性实验可发现三相萃取法所得多糖与乙醇沉淀法所得多糖的化学结构,抗氧化活性均无太大差异。因此,该体系是一种可行的高效分离纯化枸杞多糖的绿色方法。

摘要：目的本研究旨在通过对LBP1C-2靶向Kvβ.2构效关系的探索,阐明LBP1C-2靶向Kvβ.2的活性结构域,为开发具有潜在抗早老痴呆活性的创新药物提供科学依据。方法枸杞多糖LBP1C-2经部分酸水解得到不同的结构片段后,对其进行单糖组成和分子量分析。通过蛋白芯片挑选出潜在靶蛋白,再用表面等离子体共振(SPR)技术验证各结构片段的靶向性。蛋白质免疫印迹以及细胞免疫荧光测试验证其生物学功能。结果通过HuProtTM人类蛋白质组芯片高通量筛选到LBP1C-2的潜在靶蛋白Kvβ.2。SPR实验表明LBP1C-2与Kvβ.2蛋白有较强结合,其结合常数KD为1.9×10^(-7) M。而LBP1C-2的化学降解后各结构片段与靶蛋白Kvβ.2有不同强度结合。其中含鼠李糖和半乳糖醛酸摩尔比为1:1的片段LBP1C-2-1I(18.1kDa)与原多糖LBP1C-2对Kvβ.2结合强度相近为3.3×10^(-7) M。对LBP1C-2-1I结构解析表明其有1,2-Rha与1,4-GalA交替连接组成。而该片段对应的酸水解外液部分LBP1C-2-1O与Kvβ.2也有结合,但与其他片段与该蛋白解离相比,更容易解离。从BV2小胶质细胞中敲减KCNAB2基因(Kvβ.2)后,BV2细胞中Aβ的降解被抑制,表明蛋白Kvβ.2可能是早老痴呆发生发展中的一个功能蛋白。结论LBP1C-2靶向Kvβ.2的主要活性结构域为1,2-Rha与1,4-GalA交替连接组成的主链核心骨架结构。本研究为深化了解LBP1C-2潜在的抗早老痴呆活性提供了重要线索,为基于枸杞多糖抗早老痴呆靶向性药物的设计和开发提供了证据。

摘要：采用水浸提法提取枸杞中的粗多糖,应用正交实验设计法对水浸提工艺进行了优化,从而确定了其最佳工艺条件,即在65℃下,料水比1∶9,浸泡48h;本文同时探讨了在枸杞浸泡液中添加酵母菌,利用酵母在生长过程中消耗单糖及双糖等寡糖来提高枸杞多糖的纯度,以达到纯化枸杞多糖的目的。

摘要：目的研究枸杞多糖的组成分析,并设计荧光标记的枸杞多糖,为研究体内代谢提供受试品。方法采用膜分离技术提取枸杞多糖,Sevage法脱蛋白,并通过紫外光谱分析、红外光谱分析、离子色谱分析等方法对枸杞多糖进行组成研究。同时,以异硫氰酸荧光素作为荧光探针合成荧光标记的枸杞多糖,用荧光分光光度计测定其荧光取代度。结果所提取的枸杞多糖是一种水溶性的蛋白多糖,组分较为单一,总糖含量为81.58%。红外光谱分析其具有糖类的特征吸收峰。枸杞多糖中主要含有阿拉伯糖、氨基半乳糖、半乳糖和葡萄糖四种单糖,其中葡萄糖含量最高。异硫氰酸荧光素通过与枸杞多糖的共价偶联,实现对枸杞多糖的荧光标记,荧光取代度为1.3%,并且标记后的枸杞多糖体外稳定性在24 h内良好。结论首次实现了枸杞多糖的荧光标记,并且其体外稳定性良好,为以后研究代谢动力学提供良好的荧光探针。

摘要：以活性炭为载体,采用溶胶-凝胶法固定TiO2光催化剂,研究了焙烧时间、焙烧温度和浸渍比(即活化剂与活性炭的质量比)三个因素对固定化效果的影响。在单因素实验的基础上,运用二次回归正交旋转组合设计对TiO2光催化剂在活性炭上的固定化条件进行优化,并建立回归模型方程,确定光催化剂的最佳固定化条件。自行研制冷电弧-光催化-吸附集成反应器,其内装填固定化后的光催化剂。用该反应器对枸杞多糖进行脱色,以枸杞多糖的脱色率和多糖保留率为指标,考察固定化效果。实验结果表明,最佳固定化条件为焙烧时间1.90h、焙烧温度510℃和浸渍比2.82:1,此条件下得到的固定化光催化剂,装填在集成反应器中对枸杞多糖进行脱色,脱色率为80.9%,多糖保留率为80.4%。