摘要：为了研究不同浓度桉叶油(Eucalyptus oil,EO)和迷迭香油(Rosemary oil,RO)对柱花草青贮品质及蛋白组分的影响,采用双因素(青贮天数×精油添加剂)完全随机设计,精油添加剂设置试验组(0.5%EO,1%EO,0.5%RO和1%RO)和对照组(CK),青贮天数分别为3,7,14和30d,测定分析青贮品质指标和蛋白组分。结果表明,添加桉叶油和迷迭香油均能降低柱花草青贮的pH值、大肠菌群数量和氨态氮含量以及提升乳酸含量,有效抑制不良微生物的活性并提高青贮品质;添加桉叶油和迷迭香油也可以有效减少蛋白质分解,1%RO处理可以增加真蛋白含量,降低非蛋白氮和氨态氮的含量,利于营养保存和提高青贮品质;综合来看,以1%RO的添加比例对柱花草青贮品质的改善效果更为明显,可获得更为优质的青贮柱花草。

摘要：为优化超声波提取柱花草中水杨酸、原苯甲酸三乙酯、吲唑和大豆甾醇B的工艺,考察液料比、超声温度、超声时间及固相吸附剂的量对柱花草中4种次级代谢物提取量的影响,采用正交实验法对超声提取工艺进行优化,获得最佳工艺条件为:料液比为2∶40(g/m L)、超声温度为40℃,超声时间为30 min,固相吸附剂的量为3.0 g。按最佳提取工艺进行试验,4种次级代谢物提取的平均含量分别为水杨酸28.671μg/g、原苯甲酸三乙酯3.913μg/g、吲唑3.368μg/g、大豆甾醇B 7.493μg/g,相对标准偏差RSD为0.54%~2.80%,表明该提取效果好、稳定可靠。该研究将为柱花草的活性成分的研究、检测以及抗炭疽病工作提供依据。

摘要：本研究以圭亚那柱花草‘1979’(Stylosanthes guianensis‘1979’,母本,花粉不育)和‘热研2号’柱花草(轮回父本)的BC1F1代群体为材料,利用简单序列重复区间扩增多态性(Inter-simple Sequence Repeat,ISSR)技术,结合集群分组分析法(Bulked Segregate Analysis,BSA)构建花粉育性基因池。结果表明:利用100条ISSR引物筛选出在不育基因池中有特异条带的引物共11条;经BC1F1群体单株验证,有8个标记仅在花粉不育个体中出现,表明其与花粉不育基因连锁;将这8个特异性片段回收、克隆、测序,并分别设计8对特异序列特异扩增区域(Sequenced Charaeterized Amplified Region,SCAR)引物,对BC1F1单株进行验证,发现这8条片段仅在不育个体中扩增出目标条带,表明8 ISSR特异片段成功转化为8个SCAR标记。本研究结果为建立柱花草稳定的雄性不育系提供新的理论基础,为柱花草杂交育种奠定基础。

摘要：本研究为了优化确立柱花草(Stylosanthesguianensis)杂交后代育性分离群体ISSR-PCR反应体系。利用正交设计试验,从模板DNA和引物2个因素、4个水平对柱花草杂交后代育性分离群体ISSR-PCR反应体系进行优化试验。结果表明:反应体系中模板DNA 75 ng,ISSR引物10μmol/L,2×EasyTaq PCR SuperMix for PAGE(含染料)7.5μL时扩增效果最好。并通过对柱花草杂交后代育性分离群体ISSR-PCR最佳反应体系进行梯度退火试验,得到引物UBC834的最佳退火温度为54.4℃。该反应体系在柱花草BC_1F_1代不育可育分离群体中获得较好的扩增结果,该优化体系为后续筛选与柱花草花粉不育基因连锁的分子标记提供了稳定和可靠参考。

摘要：试验采用 5因素二次正交旋转组合回归设计 ,对柱花草高产栽培的综合农艺措施进行研究 ,并建立了干物质产量与种植密度、收割次数、施过磷酸钙量、施复合肥量、喷施钼酸铵浓度等 5项农艺措施之间的数学模型 ,通过模型解析和寻优 ,得出在试验条件下 ,5项农艺措施对热研 2号柱花草产量影响的程度依次为 :收割次数 >种植密度 >施复合肥量 >施过磷酸钙量 >喷施钼酸铵浓度 。

摘要：报道了以新鲜嫩叶提取高纯度、完整性好的柱花草基因组DNA方法。并利用正交设计,从Taq聚合酶、Mg2+、dNTP、DNA模板、引物浓度5个因素、4个水平对柱花草ISSR反应体系进行优化试验,确立了适合柱花草的快速而又高效的ISSR反应体系,即20μL反应体系中含1×PCR缓冲液,2.0mmol/L Mg2+,0.2mmol/L dNTP,0.4μmol/L引物,60ng DNA模板,1UTaq聚合酶。

摘要：采用正交试验研究了影响柱花草子叶组织培养的可控因子,并建立了柱花草子叶培养对可控因子反应的数学模型。结果表明,可控因子与柱花草愈伤组织诱导率、芽分化系数和生根率之间存在真实的回归关系,最佳回归模型分别为Y=86.90+3.34X1+1.36X3+2.86X1X3、Y=7.70+1.52X2和Y=299.30+6.39X1+4.32X1X2。从模型的解析可看出,对愈伤组织诱导率影响最大的是NAA,其次是NAA与蔗糖之间的互作,最后是蔗糖;对芽分化有影响的是KT;对生根率影响最大的是NAA,其次是NAA/IAA的比值。

摘要：建立了超高效液相色谱法(UPLC)测定柱花草中水杨酸、原苯甲酸三乙酯、吲唑、大豆甾醇B的检测方法。样品经乙酸乙酯提取,用C_(18)固相吸附剂净化,采用Luna Omega C_(18)(2.1 mm×100 mm,1.6μm)色谱柱分离,以20 mmol/L乙酸铵水溶液/甲醇为流动相,梯度洗脱,流速0.3 mL/min,检测波长为210 nm和240 nm,柱温:35℃,进样量1.5μL。在该色谱条件下,4种次级代谢物均呈良好的线性关系,大豆甾醇B线性范围为5.0~500μg/mL,其他3种次级代谢物线性范围为1.0~100μg/mL,相关系数r≥0.996,水杨酸、原苯甲酸三乙酯、吲唑、大豆甾醇B方法检出限分别为0.01,0.01,0.02,0.3 mg/kg,定量限分别为0.5,0.5,0.5,2 mg/kg;在3个不同浓度添加水平下,平均加标回收率为76.0%~115.1%,方法的相对标准偏差(RSDs)为1.1%~9.1%,仪器的精密度(RSDs)为0.2%~3.6%。本研究建立的方法在批量测定柱花草中次级代谢物的含量具有较好的应用前景。

摘要：对中国目前主要推广种和部分引进的柱花草种质进行抗旱性综合评价。采用完全随机区组设计,4梯度人工控水干旱,并用隶属函数值法,对44份柱花草种质的抗旱性综合评价。结果3项形态学指标和5项生理生指标与水分胁迫都达极显著相关。与抗旱性成正相关的指标为:相对生物量、相对株高、叶片抗旱级别、相对qP、相对脯氨酸含量、相对Fv/Fm、相对Fv’’;负相关的有:相对电导率。抗/Fm旱性综合评价显示,抗旱性最强的依次为:热研5号、USF873015、爱德华①、爱德华②和CIAT11369;最弱的依次为:CPI18750A、TPRC90037②、TPRC90037③和TPRC90028。聚类分析将44份柱花草种质抗旱性可分为3类:高抗旱性10份、中抗旱性15份、低抗旱性19份。研究为筛选柱花草优良种质和育种材料提供了理论和实践的科学数据。

摘要：9-顺式环氧类胡萝卜素双加氧酶（NCED）是高等植物ABA生物合成途径中的关键酶，本研究以3种豆科植物NCED的同源序列设计简并引物，用RT—PCR结合RACE以及嵌套PCR的方法。从柱花草叶片中克隆了一个编码NCED的基因，命名为SgNCED1。其cDNA全长2241bp，开放阅读框架为1809bp，编码602个氨基酸。Southern杂交结果表明，该基因在柱花草基因组中以单拷贝形式存在。氨基酸序列同源比对和系统进化分析表明SgNCED1与花生的AhNCED1高度同源（92％），与另外3种豆科植物的NCED也有很高的同源性（72％～75％）。亚细胞定位预测表明SgNCED1蛋白的N-末端具有叶绿体转运肽。叶片脱水诱导的SgNCED1基因的表达与内源ABA的积累、变化同步。