摘要：在果树的基因组中存在大量的SNP(single nucleotide polymorphism)位点,筛查与目标性状紧密连锁的SNP标记,对目标基因的精细定位具有重要意义。以‘矮生梨’(Pyrus communis L.‘Aishengli’)与‘茌梨’(Pyrus bretschneideri Rehd.‘Chili’)的F1杂交分离群体共215个单株为试材,参考苹果基因组的序列设计26对适合HRM分析的引物,依据分离群体分组分析(bulked segregant analysis,BSA)原理,通过高通量熔解曲线(high resolution melting,HRM)分析,筛选到两个与决定梨矮生性状的Pc Dw基因连锁的标记CNqau012和CNqau039,二者与目标位点的连锁距离分别是13.3 c M和2.3 c M。对CNqau012和CNqau039的扩增子测序分析表明,在矮生型与普通型中都存在一处单核苷酸变化(分别是G/A和C/T)。这些标记的获得对Pc Dw基因的精细定位及克隆具有重要意义。

摘要：采用正交试验设计研究了基本培养基、BA和 IAA 3个因素及其组合对八月红梨 (Pyrus communisL .)叶片不定芽再生的影响。结果表明 ,基本培养基的种类对叶片不定芽的诱导起主要作用 ,诱导叶片再生的最优组合是 NN6 9+BA 5 .0 m g/L +IAA 0 .5 mg/L ;用同质量浓度葡萄糖代替蔗糖 ,对叶片再生频率的影响不显著 ,用白砂糖代替蔗糖 ,显著降低了叶片再生频率 ;Ag NO3质量浓度在 0 .1～ 1.5 mg/L时 ,对叶片再生有促进作用 ,培养基中附加 Ag NO30 .5 mg/L 。

摘要：以“雪青”梨为材料 ,采用L9(34)正交设计 ,设外植体 (A)、消毒剂 (B)和消毒时间 (C) 3因素 ,每因素设 3个水平 :A分别为叶片、茎尖和节段 ;B分别为 2 %次氯酸钠、0 1%升汞和 2 %次氯酸钙 ;C分别为 10min ,5min和 5min .外植体经表面消毒后 ,接种在MS琼脂培养基中 ,于 (2 5± 1)℃ ,2 0 0 0lx光照培养 ,15d后统计成活率 .试验结果表明 :最优水平组合为A1B2 C1,A ,B对试验结果的影响达显著水平 (p≤ 0 0 5 ) ,A不同水平间差异显著 (p<0 0 5 ) .

摘要：为了建立适宜梨树SSR-PCR的反应体系和扩增程序,采用正交设计L16(45)对影响梨树SSR-PCR反应体系的5个因素(Taq酶、Mg2+、模板DNA、dNTP、引物)在4个水平上进行优化,PCR结果用DPS数据处理软件分析,筛选出各反应因素的最佳水平,建立了适用于梨树的SSR反应体系。在10μL的反应体系中,模板DNA的用量为50.0 ng,TaqDNA聚合酶的用量为1.4 U,Mg2+的浓度为2.0 mmol/L,dNTPs浓度为0.1 mmol/L,引物的浓度为0.5μmol/L。扩增程序为:94℃预变性3 min;94℃变性1 min,57℃(依引物不同而改变)退火45 s,72℃1 min,35个循环;72℃延伸10 min。4℃保存。选用24个梨品种对该体系进行稳定性验证,结果证明该体系可用于梨树SSR标记的研究。

摘要：为了实现多果品内部品质的现场无损快速检测,基于多光谱技术设计了一种可更换探头的手持式多果品内部品质无损检测仪。该检测仪的硬件系统由主机和多光谱采集探头组成。主机包括微处理器、电源管理模块、稳压驱动模块及输入输出模块。多光谱采集探头由12个不同波长的发光二极管和数字光电传感器组成。在MDK 5.0开发环境下用C语言开发了检测仪的软件。利用开发的检测仪分别采集了“华优”猕猴桃和“雪”梨的漫反射多光谱,并基于偏最小二乘法建立了预测猕猴桃和梨的可溶性固形物含量(SSC)和硬度的模型。将预测模型导入到检测仪后对仪器的性能进行了测试。结果表明,该检测仪对猕猴桃SSC和硬度的测量均方根误差分别为1.51%和5.13 N,对梨SSC和硬度的测量均方根误差分别为0.52%和4.57 N,检测时间在2 s以内,可通过更换探头实现对多种果品内部品质的无损快速检测。

摘要：以4种不同来源的梨基因组DNA为模板,根据已经发表的多酚氧化酶基因序列设计引物,利用PCR技术,克隆到了鸭梨、雪花梨、砂梨、黄冠梨约1.8 kb的完整多酚氧化酶基因,将纯化后的扩增产物克隆到质粒pGEM-T vec-tor中,转化DH-5α菌,挑选阳性克隆进行测序。利用Clustalx软件对PPO核苷酸序列进行了同源性分析,用DNAStar软件对PPO核苷酸序列进行进化树分析,并进行部分植物PPO氨基酸的同源性分析。结果表明,4种梨多酚氧化酶基因的蛋白编码区含有1 782个核苷酸,鸭梨基因已经在GenBank上登录,登录号为EU048225。梨多酚氧化酶基因与其他植物中的多酚氧化酶基因有较高的相似性,尤其在铜离子结合部位,所有的植物基本上一致;5种梨的同源性高达98%。基于植物PPO基因核苷酸序列的分子进化树显示,可分为两大类,梨的多酚氧化酶可以与大多数的木本植物聚合成一个组。

摘要：中矮1号(Pyrus communis)是中国农业科学院果树研究所选育的梨优良矮化砧木,为研究其矮化机理,应用同源克隆的方法从中矮1号叶片总RNA中克隆赤霉素合成过程中的关键酶——内根-贝壳杉烯合酶(KS)基因的cDNA全长序列,并对该基因在不同梨品种中的表达进行分析。结果表明:基于苹果基因组序列设计的特异引物从中矮1号的总RNA中扩增出了1个编码框全长为2214 bp的cDNA序列,其编码737个氨基酸残基,推断分子量为83.63 kD,等电点为5.37。其氨基酸序列与报道的其他植物KS氨基酸序列的相似性为53.61%～72.63%,其中,与板栗(AEF32083.1)的相似性最高,其氨基酸序列中包含植物KS基因所共有的YDTAWVAWVP和DDXXD保守结构域,因此,将分离到的基因命名为PcKS。早酥、锦香和中矮1号等不同梨品种的PcKS基因的cDNA序列仅有个别碱基差异,但编码的氨基酸序列完全一致,品种间不存在结构差异。RT-PCR表达分析结果表明,PcKS基因在早酥中的表达量低于同时期的锦香和中矮1号,与植株高度相反,初步表明该基因的表达有与梨植株生长势呈负相关的趋势。

摘要：采用单因素和三因素二次回归正交旋转组合设计,对梨低温气流膨化干燥工艺进行了研究。分析浸泡所用麦芽糊精浓度、停滞时间、压力差、膨化温度、抽空温度和抽空时间因素对梨脆片产品的含水率、脆度和色泽的影响。在此基础上由试验数据确定出最适麦芽糊精浓度为15%,停滞时间为5 min,压力差为0.2 MPa;推导出描述3个指标的二次回归模型,并对膨化温度、抽空温度和抽空时间进行响应面分析,得出梨膨化干燥工艺条件为:膨化温度为89.68℃、抽空温度为58℃、抽空时间为78.65 min。

摘要：【目的】利用SSR荧光标记构建45份山东地方梨种质资源的分子身份证。【方法】从SSR富集文库中开发并设计40对引物,从中筛选出10对多态性良好的引物,采用SSR荧光标记毛细管电泳技术检测扩增条带分子质量的方法对山东地方梨种质资源进行分析,获得相应的扩增条带。采用个位数字和小写英文字母对不同带型进行编码,按照10对引物扩增带型数由少到多顺序串联排序的方式构建供试样品的分子身份证。【结果】10对SSR引物共检测到111个SSR等位位点和189个带型,平均每对引物对品种扩增的等位位点11.1个,带型18.9个。采用个位数字和小写英文字母结合对不同带型进行编码,成功构建了45份山东地方梨种质资源的分子身份证,可以将材料完全区分开。【结论】构建了45份山东地方梨种质资源分子身份证,有利于山东地方梨种质资源的保护与利用。

摘要：本文采用正交设计，配置不同温度、Ｏ＿２浓度、ＣＯ＿２浓度，对南果梨进行气调贮藏，经过５个月贮藏后，初步筛选出南果梨最佳的贮藏条件为：０℃结合１０Ｏ＿２＋５％ＣＯ＿２进行气调贮藏。