摘要：研究毛蕊花糖苷(verbascoside,OC1)促进阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)发病过程中乙酰胆碱(acetylcholine,ACh)释放的分子机制。使用β-淀粉样蛋白(1~42)(Aβ_(1-42))诱导的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC12)作为AD体外模型,分为对照组(control),模型组(model,Aβ_(1-42)10μmol·L^(-1)),OC1处理组(2、10μg·mL^(-1))。通过全蛋白磷酸化修饰定量组学分析OC1对AD细胞模型磷酸化蛋白的影响,结合计算机辅助药物设计虚拟筛选OC1对于钙通道亚型的选择性,荧光探针Fluo-3/AM检测细胞中Ca^(2+)浓度,Western blot检测OC1对磷酸化钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ(p-CaMKⅡ,Thr286)及突触囊泡相关蛋白表达的影响,UPLC/Q Exactive MS检测OC1对AD细胞模型ACh释放的影响,试剂盒检测OC1对AD细胞模型中乙酰胆碱酯酶(acetylcholine esterase,AChE)活力的影响。结果显示,模型组与OC1处理组的差异修饰蛋白在GO分类、KEGG通路和蛋白结构域3个层面均与钙通道激活相关。分子对接结果揭示了L-型钙通道的主导作用。在Ca^(2+)螯合剂EGTA(乙二醇四乙酸)、L-型钙通道阻断剂维拉帕米(verapamil)和N-型钙通道阻断剂芋螺毒素(conotoxin)存在的条件下,OC1对Fluo-3/AM荧光强度的增强作用被削弱,且verapamil的作用强于conotoxin。这证实OC1主要通过与L-型钙通道蛋白相互作用促进细胞外Ca^(2+)内流。蛋白质组学分析和Western blot结果表明,OC1处理后p-CaMKⅡ及下游囊泡相关蛋白表达上调,说明OC1通过激活CaMKⅡ作用于囊泡相关蛋白,参与神经突触的重塑和递质释放,从而影响学习记忆。此外,OC1还降低了AChE活力,延长ACh在突触间隙的作用时间。

摘要：目的:建立同时测定生地黄中梓醇和毛蕊花糖苷含量的方法;采用星点设计-效应面法优化生地黄中梓醇和毛蕊花糖苷的回流提取工艺。方法:使用波长切换的方法检测梓醇和毛蕊花糖苷的含量,并考察乙醇浓度及液料比对梓醇和毛蕊花糖苷提取效率的影响。通过对自变量的总评归一值进行多元线性回归,采用效应面优化最佳的工艺条件,并进行预测分析。结果:梓醇进样量在0.047～3.00μg、毛蕊花糖苷进样量在0.016～1.00μg范围内其单位浓度与峰面积积分值呈良好线性关系;确定回流提取工艺条件为乙醇浓度(A):38.0%;液料比(B):19.3mL/g。工艺验证的实测值与总评归一预测值基本吻合,二项式拟合的相关系数R2=0.7498(P<0.05)。结论:所建生地黄中梓醇和毛蕊花糖苷含量测定的方法准确度、精密度和重现性均良好;采用星点设计-效应面法优选方法优化的地黄提取工艺,方法简便、且有较优的预测性。

摘要：目的采用离心萃取系统萃取毛蕊花糖苷提取物。方法通过单因素试验,研究油相中毛蕊花糖苷含量、流量、油水相比、萃取次数、转速、pH对毛蕊花糖苷萃取率的影响。利用响应面Box-Behnken实验设计探究油相中毛蕊花糖苷含量、流量、转速、油水相比对毛蕊花糖苷萃取率的影响并优化最优工艺参数。结果单因素试验结果表明:萃取最佳条件为油相中毛蕊花糖苷含量为19.20 mg·mL^(-1),转速为48 Hz,流量为300 mL·min^(-1),油相与水相比=1∶1,乙酸加入量为2%,萃取次数为3次。通过响应面分析发现各因素对毛蕊花糖苷萃取率的影响顺序为油相中毛蕊花糖苷含量>油水相比>流量>转速;在最佳条件下:油相中毛蕊花糖苷含量21.50 mg·mL^(-1)、转速48 Hz、流量290 mL·min^(-1)、油水相比1∶1,3次平行试验得到的毛蕊花糖苷萃取率分别达82.49%,79.38%,81.76%,与预测值80.03%的相对误差分别为3.07%,0.81%,2.16%。结论此方法能够有效对毛蕊花糖苷进行纯化,为毛蕊花糖苷的开发利用提供理论依据。

摘要：【目的】对向日葵列当(Orobanche cumana)毛蕊花糖苷提取工艺进行优化,并研究其抗氧化活性,为将其作为药材开发利用提供参考。【方法】从3株产木质素降解菌(雷斯青霉(Penicillium raistrickii)、产红青霉(Penicillium rubens)和霉菌(Fungal sp.))和2株产纤维素降解菌(白腐菌(Phanerochaetc chrysosporium)和黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium))中筛选最优复合菌剂对向日葵列当进行生物破壁发酵处理,通过气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)分析复合菌剂降解后向日葵列当中的有效成分;以毛蕊花糖苷提取量为考察指标,以酵解温度、pH值和酵解时间为考察因素,设计单因素试验及响应面优化试验,优化毛蕊花糖苷提取工艺;体外检测毛蕊花糖苷对OH·自由基、DPPH自由基和超氧阴离子的清除能力,分析毛蕊花糖苷的抗氧化活性。【结果】在向日葵列当中共检测出207种化学物质,含量较高的药效成分为苯乙醇苷类物质毛蕊花糖苷,相对含量为2.470%。以雷斯青霉、白腐菌、黄孢原毛平革菌组合作为最优复合菌剂破壁酵解向日葵列当提取毛蕊花糖苷的最佳条件为:酵解温度27℃,酵解pH值7,酵解时间3.5 d,在此条件下,向日葵列当中毛蕊花糖苷的提取量为1396μg/mL。向日葵列当毛蕊花糖苷对OH·自由基、DPPH自由基和超氧阴离子有一定的清除能力,抗氧化活性明显,且呈剂量依赖性。【结论】向日葵列当中毛蕊花糖苷含量较高,通过复合菌剂发酵破壁处理能够有效提高毛蕊花糖苷的提取效率,且毛蕊花糖苷有明显的抗氧化活性。

摘要：目的:筛选杜虹花毛蕊花糖苷成分的最佳提取工艺条件。方法:采用正交试验设计,以乙醇浓度、料液比、提取次数和提取时间为考察因素,以毛蕊花糖苷含量为评价指标,确定其最佳提取工艺。结果:最佳提取工艺为:加60%乙醇,液料比为1∶25,加热回流提取1次,每次1 h,毛蕊花糖苷含量≥7.05 mg/g。结论:该工艺操作简便,稳定可行,重复性好,可为杜虹花止血有效成分毛蕊花糖苷的提取和开发提供参考。

摘要：目的:优化管花肉苁蓉中毛蕊花糖苷的提取工艺,为该药材的深入开发和综合利用提供参考。方法:采用高效液相色谱法对管花肉苁蓉中的毛蕊花糖苷进行含量测定。色谱柱为Inertsil-ODS-3V,流动相为甲醇-0.2%甲酸水溶液(40∶60,V/V),流速为1mL/min,柱温为30℃,检测波长为330nm,进样量为10μL。以毛蕊花糖苷的提取率为考察指标,分别对浸泡时间、乙醇浓度、液料比、提取时间、提取次数进行单因素试验;根据上述试验结果采用Box-Behnken响应面法对乙醇浓度、液料比、提取时间等条件进行优化,并对优化后的提取工艺进行验证试验。结果:毛蕊花糖苷检测质量浓度的线性范围为18.65~932.4 μg/mL。最优提取工艺为乙醇浓度63%、液料比8∶1(mL/g)、浸泡2h、提取时间1.5h、提取2次。3次平行验证试验所得毛蕊花糖苷的提取率分别为78.21%、76.95%、79.34%,与预测值76.76%的相对误差分别为1.89%、0.25%、3.36%。结论:优化所得管花肉苁蓉中毛蕊花糖苷的提取工艺稳定、可行,适用于该化合物的提取。

摘要：目的：优选蛇尾草中活性成分毛蕊花糖苷最佳提取工艺，并测定其含量动态积累过程，考察蛇尾草药材最佳采收时间。方法：采用高效液相色谱法，根据正交设计表考察甲醇浓度、溶剂用量、提取时间和提取次数对毛蕊花糖苷含量测定结果的影响；对不同采收时间的蛇尾草药材进行含量测定，对其含量变化进行分析。结果：最终确定优化提取方案为70％甲醇，溶剂容量为25mL，超声提取30min，提取1次；蛇尾草中毛蕊花糖苷的含量6月时到达峰值，随后逐渐降低，¨月采收药材含量最低。结论：所得优化工艺操作简单合理，结果准确。蛇尾草中毛蕊花糖苷含量6月份最高，但其最佳采收期的确定需进一步结合药效开展研究。

摘要：目的：建立高效液相色谱（HPLC）法测定不同品种怀地黄中梓醇和毛蕊花糖苷的含量,采用星点设计-效应面法优化提取工艺。方法：建立HPLC法,甲醇回流测定梓醇和毛蕊花糖苷,Agilent ZORBAX SB-Aq色谱柱（4.6mm×250mm,5μm）,流速1ml/min,柱温30℃,以乙腈~0.1%磷酸溶液（1：99）为流动相,检测波长210nm,测定梓醇含量,以乙腈~0.1%醋酸溶液（16：84）为流动相,检测波长334nm,测定毛蕊花糖苷含量。结果：不同品种怀地黄中梓醇和毛瑞花糖苷含量存在明显差异,梓醇含量最高品种为85-5,达6.58%,毛蕊花糖苷含量最高品种为9302,达0.2479%。结论：不同品种怀地黄中梓醇和毛蕊花糖苷含量不同,星点设计-效应面法优化提取工艺,方法简便且预测性好。

摘要：目的优选养阴清肺汤加味提取工艺。方法采用HPLC法同时测定毛蕊花糖苷、丹皮酚、绿原酸、甘草酸,以层次分析法(AHP)计算权重系数,多指标综合评分结合Box-Behnken设计-响应面法考察乙醇体积分数、提取时间、提取次数对养阴清肺汤加味提取工艺的影响,优选醇提工艺。结果最佳提取工艺为采用69%乙醇,提取68 min,提取1次。结论优选的提取工艺简单可行,成分提取效率高,为养阴清肺汤加味提取工艺提供参考。

摘要：目的 筛选经典名方一贯煎的最优提取工艺,为其制剂研究提供实验依据。方法 对HPLC法测定的甜菜碱、地黄苷D、对香豆酸、阿魏酸、毛蕊花糖苷、洋川芎内酯Ⅰ进行化学计量学分析;以筛选出的关键成分含量、出膏率及指纹图谱相似度为评价指标,采用改进AHP-熵权法确定各个指标的组合权重系数,以基准样品关联度评价样品与基准样品的质量一致性,在单因素试验的基础上,采用响应面法优选一贯煎的提取工艺参数。结果 Box-Behnken设计建立的数学模型具有统计学意义,一贯煎最佳提取工艺参数为加12倍量水,提取时间80 min,提取2次。此条件下设计空间的综合评分为0.963。结论 采用改进AHP-熵权-基准样品关联度法优选一贯煎提取工艺参数,所拟合的模型显著,与基准样品质量基本一致,为进一步研究经典名方一贯煎复方制剂究提供了参考。