摘要：目的　探讨重离子诱发人支气管上皮细胞系的突变效应。方法　用ＨＩ１３ 串列加速器产生的Ｌｉ、Ｃ、Ｆ三种离子束以０－５～６－０ Ｇｙ 设计剂量照射人支气管上皮细胞系突变，观察其突变效应。结果　细胞ｈｐｒｔ 突变率（ ＭＦ，无量纲） 与重离子剂量（Ｄ，Ｇｙ） 的线性回归方程分别为ＭＦ＝１－６３×１０－ ５Ｄ（Ｌｉ） 、ＭＦ＝ ８－６４×１０－ ５Ｄ（Ｃ） 、ＭＦ＝ １－３３ ×１０－ ５Ｄ（Ｆ） ；与６０Ｃｏγ射线比较，其相对生物效应依次为１－２７、６－７８ 、１－０４。此突变率与粒子注量亦呈线性正相关，三种重离子的突变截面（σｍ ，１０－ ４μｍ２）依次为２－６１、４１－５ 、２１－３。致突性（σｍ／σｉ，１０－５） 依次为２－０８、１０－２、２－７８。结论　细胞突变率随重离子剂量增大而上升，似有ＬＥＴ 依赖性。

摘要：为了研究Ⅱ类果糖二磷酸醛缩酶(FBA)是否为猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)的毒力因子,并参与其致病作用,根据已发表的猪肺炎支原体醛缩酶全基因序列设计特异性的引物,以猪肺炎支原体168株基因组为模板,通过Overlap PCR点突变扩增醛缩酶基因。将FBA克隆至pET-28a(+)载体后进行序列测定和分析,结果表明,FBA基因全长864 bp。将构建的重组表达质粒pET-28a(+)/FBA转化至大肠埃希菌BL21(DE3),通过筛选获得阳性克隆,重组工程菌在IPTG诱导下成功获得表达融合蛋白猪肺炎支原体Ⅱ类果糖二磷酸醛缩酶(Mhp FBA),大小约为35 ku。纯化蛋白并接种于猪气管上皮细胞至FBA终浓度分别为0、10、50、100、150、200μg/mL,孵育24 h后进行上清中丙酮酸浓度的检测和细胞凋亡检测。结果上清中丙酮酸浓度随着FBA浓度的上升,出现先极显著上升(P<0.01)、后急剧下降的现象;细胞平均凋亡率依次分别为3.54%、10.91%、13.99%、27.19%、32.84%和40.71%,并随着FBA浓度的升高而升高,且相比阴性对照组差异均显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)。成功构建了Mhp FBA重组菌,表达获得了Mhp重组蛋白FBA,该蛋白可能为猪肺炎支原体的毒力因子,参与猪肺炎支原体的致病作用,从而为进一步开展Mhp致病机理和药物研究奠定基础。