摘要：在油桐遗传多样性研究中,为了获得清晰可靠、重复性强的ISSR扩增结果,综合采用单因子试验和正交设计两种方法对影响油桐ISSR-PCR反应结果的4个因素(Taq酶、Mg2+、dNTP、引物)进行优化试验。单因子试验分别研究各因素对ISSR-PCR反应的影响,找出最佳反应水平。正交设计选用L9(34)方案,采用直观分析获得影响因素最佳反应水平。通过综合比较分析,最终建立了油桐ISSR-PCR反应的最佳反应体系,即在20μL反应体系中,Taq DNA聚合酶1.0 U,Mg2+2.0 mmol.L-1,dNTP 0.20 mmol.L-1,引物0.4μmol.L-1,1×PCR缓冲液,40 ng模板DNA。

摘要：采用开顶式熏气装置 ,以浓度为 0 85 71mg·m-3 的SO2 对二三年生的油桐 (Verniciafordii)幼苗进行 118d熏气试验。结果表明长期低浓度SO2 熏气处理引起光化学猝灭、非光化学猝灭、表观光合电子传递速率 (ETR)下降 ,荧光产量 (Ft)增加 ,光系统Ⅱ (PSⅡ )的光能转换效率和潜在活性下降 ;光系统Ⅰ (PSⅠ )的潜在活性和光能转换效率也下降。因此认为 :长期低浓度SO2 熏气处理引起PSⅠ和PSⅡ结构破坏 ,导致光系统光能转换效率和系统潜在活性的下降。

摘要：经SO2熏气处理的油桐叶片电导率增加,叶片中脂质过氧化作用增强,总类脂、极性脂、非极性脂、糖脂含量下降,磷脂含量稍有增加;极性脂和非极性脂中不饱和脂肪酸C18:3含量、C18:3/IUFA、不饱和指标UFA和IUFA值下降,叶绿体结构受到破坏,片层结构模糊不清;随着熏气时间的延长叶绿体中的淀粉颗粒增大,脂滴变小。

摘要：以油桐的近成熟种子为材料,根据油桐转录组测序结果设计引物,采用RT-PCR技术克隆了油桐长链脂酰辅酶A合成酶基因家族的两个成员的全长cDNA序列,分别命名为VfLACS4(Gen Bank登录号:KP996689)和VfLACS8(Gen Bank登录号:KT362743),通过实时定量PCR的方法检测了不同组织部位和种子不同发育时期该基因的表达水平,并采用索式提取法测定了种子发育时期的油脂含量。结果表明:VfLACS4的CDS长度为1 989 bp,编码662个氨基酸,与其他物种的LACS4氨基酸序列具有较高的相似性,其中与蓖麻的LACS4相似性最高;VfLACS8的CDS长度为2 199 bp,编码732个氨基酸,与麻疯树和蓖麻的LACS8具有较高的相似性;实时定量RT-PCR结果表明VfLACS4基因在花、茎、叶和根中均有少量表达,并在种子发育的10月10日表达量达到最大;VfLACS8基因在种子、花、茎、叶和根中均有一定量的表达,在雌蕊中的表达量最高;油桐种子发育过程中的油脂积累呈现出"S"型,Vf LACS8基因的在发育种子中的表达模式与之相一致,推测VfLACS8基因与种子发育过程中的油脂积累相关。

摘要：油桐是我国四大木本油料植物之一,当前对油桐的研究主要集中在栽培选优及低产林改造方面,而对油桐脂肪酸延长代谢的分子机理研究尚未见报道。本研究以油桐果实膨大期、油脂转化初期和油脂转化高峰期的种子为材料,采用高通量RNA测序技术对油桐种子脂肪酸延长代谢的3个不同时期转录组进行比较,以nr、Swiss-Prot、KEGG和COG 4个蛋白数据库为参考,对油桐种子脂肪酸延长代谢进行了综合性分析。研究结果表明,参与油桐种子脂肪酸延长代谢途径的非冗余基因序列共37条,涉及的主要酶功能基因有9种;在果实膨大期、油脂转化初期和油脂转化高峰期中,调控脂肪酸延长代谢途径的基因存在明显的表达差异。综合分析结果绘制了油桐种子脂肪酸延长代谢途径,揭示了调控油桐种子脂肪酸延长代谢过程的基因作用规律。这些研究结果为油脂合成的遗传改良提供了资源和技术基础,同时为油桐分子设计育种提供了一定的科学依据。

摘要：为了深入了解油桐丙二酰单酰辅酶A酰基载体蛋白转酰基酶(Malonyl Co A:ACP transacylase,MCAT)在油脂合成代谢过程中的作用,利用RT-PCR技术克隆获得了油桐MCAT基因序列,且命名为Vf MCAT,并利用相关生物软件对该基因序列及其相应蛋白质进行了生物信息学分析。结果表明:Vf MCAT的CDS长为1 179 bp,编码392个氨基酸;该蛋白与蓖麻和亚麻的MCAT同源性均达85%,存在"GXSXG"和"GQGXQ"两个高度保守的motif,在系统进化关系上,其与蓖麻和亚麻的亲缘关系最为接近;分析其氨基酸序列后发现,Vf MCAT的分子量约为41.67 KDa,理论等电点p I为8.43,是一个含有一个跨膜结构域的可溶性稳定蛋白;对其二级和三级结构的预测结果表明,该蛋白主要以α-螺旋和无规则卷曲为主,且最有可能在线粒体中发挥其主要作用,文中由此推测,Vf MCAT在叶绿体中参与了油桐脂肪酸合成代谢。

摘要：为给油桐β-酮脂酰-CoA合成酶基因(KCS)结构和功能的研究提供参考,以油桐种子为材料,根据油桐转录组测序分析结果设计引物,利用RT-PCR技术克隆KCS基因,并进行了序列分析。获得了1条KCS基因的全长cDNA,命名为Vf_KCS。KCS基因的CDS长度为1 338 bp,编码446个氨基酸。该基因编码的蛋白质具有3个酶活性位点、6个产物结合位点、5个丙二酰-CoA结合位点和多个二聚体形成位点;Vf_KCS有2个明显的跨膜螺旋拓扑结构和3个疑似跨膜螺旋拓扑结构;二级结构主要由α-螺旋、β-折叠和不规则卷曲构成,该蛋白为亲水性蛋白。Vf_KCS编码的氨基酸序列与其它物种的KCS氨基酸序列具有较高的相似性,其中与葡萄的KCS基因相似度最高达89.69%,与其它植物的KCS基因所编码的氨基酸同源性大多在80%以上。进化树分析结果表明,Vf_KCS与拟南芥亲缘关系最为接近。预测分析结果表明,该酶有高度保守的催化区域。

摘要：以葡萄桐的近成熟种子为材料,根据油桐转录组测序结果设计引物,采用RT-PCR技术克隆了油桐乙酰辅酶A羧化酶BC亚基基因的全长c DN A序列。该基因c DNA序列全长1 605 bp,编码534个氨基酸。推导出的BC亚基氨基酸序列蛋白的等电点p I为7.98,相对分子量58 262.0 Da,稳定系数为38.13,生物信息学分析表明,此蛋白含有2个比较明显的跨膜区,是一个不稳定的非分泌蛋白。模体搜索结果表明在BC上具有ATP结合位点。三级结构中有16个α螺旋,3个部分形成一个内凹的结构。

摘要：为给油桐ALDH基因的结构与功能研究提供理论依据,以葡萄桐的近成熟种子为材料,根据油桐转录组测序结果设计引物,采用RT-PCR技术克隆了油桐ALDH22A1基因和ALDH2C4基因的全长cDNA序列。ALDH22A1的cDNA序列全长1 782 bp,编码593个氨基酸,该基因编码蛋白质的相对分子质量为65.60 kDa,理论等电点为6.62,蛋白二级结构以α螺旋为主,具有1个明显的跨膜结构,是稳定的非分泌蛋白。ALDH2C4的cDNA序列全长1 506 bp,编码501个氨基酸,该基因编码蛋白质的相对分子质量为54.82 kDa,理论等电点为6.58,蛋白二级结构以α螺旋为主,是不具有跨膜结构的膜外蛋白。BLASTp分析结果表明,这2个基因所编码序列与麻疯树、蓖麻的乙醛脱氢酶一致性最高,高达80%以上,含有醛脱氢酶基因家族的保守结构域。

摘要：【目的】克隆油桐酸性磷酸酶（ACPase）基因的全长序列，为进一步分析油桐ACPase的功能奠定基础。【方法】根据油桐转录组酸性磷酸酶蛋白全长序列设计引物，利用RT-PCR从油桐种子中克隆ACPase基因，对其cDNA序列、核苷酸序列的相似性、理化性质、疏水性、跨膜结构、二级结构及三级结构进行分析预测，同时进行多序列比对并构建系统树。【结果】克隆获得油桐ACPase基因，其开放阅读框为1152 bp，编码383个氨基酸残基，相对分子质量为40.94 kDa，理论pI为5.30，属可溶性不稳定蛋白。同源性和进化树的预测分析结果显示，油桐ACPase与毛果杨的ACPase蛋白同源性达84%。油桐ACPase存在磷酸酶基因家族的保守区域，ACPase编码蛋白的大部分氨基酸属于亲水性氨基酸。其蛋白二级结构主要由不规则卷曲、α-螺旋和β-折叠构成。ACPase蛋白包含1个跨膜螺旋区域，其相应氨基酸位置在136-156；包含1个疑似跨膜域，其相应氨基酸位置在255-275；每个跨膜结构域为由20个氨基酸残基组成的螺旋，同时跨膜蛋白的N端和C端位于细胞膜胞质的一侧。【结论】油桐ACPase基因的表达可能与其体内磷营养的分解利用等过程有关。