摘要：目的　克隆恶性疟原虫端粒酶基因 ,为今后筛选抗疟药物提供理论依据。方法　根据四膜虫的端粒酶基因序列 ,设计并合成一对引物 ,从恶性疟原虫基因组DNA中扩增出端粒酶基因 ,进行测序及利用生物信息学技术对端粒酶基因进行了分析。结果　得到了 2 3kp的恶性疟原虫海南株端粒酶基因。结论　恶性疟原虫端粒酶基因的克隆 。

摘要：为了研究鸡柔嫩艾美耳球虫(***)海南(HN)株3-1E基因的遗传变异情况,试验根据GenBank发表的鸡堆型艾美耳球虫(***)美国株(US)3-1E基因cDNA序列(登录号为AF113613)的开放阅读框(ORF)设计1对引物,采用RT-PCR方法从*** HN株总RNA中扩增3-1E基因,将扩增产物与pMD18-T载体连接后进行测序和序列分析,并与已发表的***相关序列进行比较。结果表明:*** HN株3-1E基因全长为513 bp,与已发表的国内外虫株的3-1E基因序列相比,核苷酸有5个位点发生变化,其中有4个位点的变化引起氨基酸发生改变,还有1个位点的变化未引起相应氨基酸发生改变。经系统发育树分析发现:同种间比较,*** HN株3-1E基因与*** sporozoite antigen株的遗传关系最近;同属间比较,*** HN株3-1E基因与*** US株的遗传关系最近。

摘要：Pf7、Pfl2基因是恶性疟原虫红内期阶段虫体表面膜抗原。根据已知的Pf7、Pfl2基因序列．自行设计并合成引物。应用PCR技术，从恶性疟原虫海南株(FCCl／HN)基因组中特异扩增出Pf7、Pfl2基因，其片段太小分别约为800bp、1040hp，为进一步克隆、测序奠定了基础。

摘要：为研究鸡柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)HN株SO7基因的遗传变异情况,根据Gen Bank发表的SO7基因的c DNA序列(登录号:X15898)的ORF设计一对引物,用RT-PCR方法从柔嫩艾美耳球虫HN株总RNA中扩增SO7基因,将扩增产物与p MD18-T载体连接后进行测序和序列分析,并与已发表的相关序列进行比较,分析SO7基因的遗传变异情况。结果获得673 bp的目的片段,HN株的SO7基因序列与已发表国内外虫株的SO7基因序列相比,核苷酸有7个位点发生了变化,引起4个位点的氨基酸发生改变,其中有3个位点的变化未引起相应的氨基酸发生改变。系统发育树分析表明,同种间HN株SO7基因与YZ株的遗传关系最近。

摘要：根据已报道的柔嫩艾美耳球虫3-1E基因序列设计引物,以孢子化卵囊总RNA为模板,用RT-PCR方法扩增得到1条特异片段,将扩增产物克隆至p MD-18T载体,转化感受态菌JM109,经酶切鉴定获得阳性重组质粒并对其进行测序。测序结果与已发表的国内外相关虫株的3-1E基因序列比较,核苷酸的同源性均在99.2%-99.8%,氨基酸的同源性均在98.2%-100%。然后将重组质粒和表达载体p GEX-4T-1分别用Xho I和EcoR I酶切后构建重组表达载体p GEX-3-1E,并将其转化入大肠杆菌BL21中,提取质粒经酶切和PCR鉴定正确后,用IPTG诱导表达。表达产物经SDS-PAGE和Western blot检测显示,3-1E基因在大肠杆菌中成功表达,融合蛋白的分子量为44.7 ku,诱导表达5 h的蛋白表达量可达到30%以上。