摘要：目的　用PCR定点突变法构建人抗菌肽FALL 3 9基因突变体 ,并比较研究FALL 3 9及其突变肽的功能。方法　采用PCR体外定点突变技术 (PCR SDM ) ,设计一对方向相反的引物 ,其中一个引物引入一个突变点 ,应用高保真的PolybestDNA多聚酶进行含FALL 3 9肽的PGEXλ1T质粒的PCR扩增 ,使FALL 3 9第 2 4位密码子由CAG变为AAG ,将扩增片段自身连接后克隆入工程菌JM 10 9中表达其突变肽 (FALL 3 9 lys2 4) ,纯化后与FALL 3 9进行抗菌活性比较。结果　DNA测序结果表明在预期位点发生突变 ,突变后FALL 3 9 lys2 4抗菌活性增强 ,在抗菌剂量时对红细胞的溶解作用未见明显增加 ,较大剂量时对红细胞的溶解作用略有增加。结论　用高保真的PolybestDNA多聚酶进行PCR定点突变技术简单、有效 ,获得一个FALL 3 9 Lys2 4突变子 ;其表达分子的抗菌活性明显增强 ,对红细胞的溶解作用在抗菌剂量时未见明显增加 ,较大剂量时略有增加 ,这些结果提示在FALL 3 9分子中增加碱性氨基酸可以增强其抗菌活性 ,但必须注意避免溶血的副作用。

摘要：蜂毒肽对耐药菌具有较强的抗菌活性,但是蜂毒肽存在严重的溶血作用,限制了其临床使用。因此,需要研发新型高抗菌活性、低溶血作用的蜂毒肽衍生物。本研究通过改变蜂毒肽的氨基酸疏水性、极性和正电荷数量设计合成新衍生物20个,并评价其抗菌活性和溶血作用。结果表明,8个衍生物对阳性菌的抗菌活性保持或提高(MIC:1~4μg·m L~(-1)),16个衍生物的溶血作用(HC_(50)≥11.9μg·m L~(-1))降低。与蜂毒肽(MIC:4μg·m L~(-1),HC_(50):5.3±0.4μg·m L~(-1))相比,衍生物13 (MIC:2~4μg·m L~(-1))和15 (MIC:1~2μg·m L~(-1))对测定的耐药或敏感的金葡菌和屎肠球菌显示出相当或提高的抗菌活性,并且衍生物13的溶血作用(HC_(50):24.0±4.3μg·m L~(-1))明显降低。本研究为蜂毒肽的构效关系与构毒关系研究奠定基础。

摘要：本文介绍了各种注射用溶媒、注射用附加剂的有关毒理和安全性。对于设计、试制和生产高质量的注射剂有一定的参考价值。附参考文献58篇。