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氮磷钾配比对组培滇龙胆生长及有效成分的影响
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《耕作与栽培》2024年 第2期44卷 7-12,17页
作者:简邦丽 刘昊 起明菊 左应梅云县农业技术推广站云南云县675800 云南省农业科学院药用植物研究所昆明650200 山东第一医科大学附属颈肩腰腿痛医院济南250000 
为了分析培养基中不同氮、磷、钾营养水平对滇龙胆组培苗生长及有效成分含量的影响,本研究以滇龙胆组培苗为材料,采用L 9(33)正交设计,研究培养基中氮、磷、钾不同用量与配比对滇龙胆生长指标及主要有效成分龙胆苦苷、獐芽菜苦苷、当药...
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滇龙胆环烯醚萜氧化酶基因及启动子的克隆与生物信息学分析
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《中草药》2018年 第18期49卷 4386-4392页
作者:张晓东 李彩霞 赵青蓉 王元忠玉溪师范学院化学生物与环境学院云南玉溪653100 云南省农业科学院药用植物研究所云南昆明650223 
目的从滇龙胆叶片中克隆单萜合成关键酶环烯醚萜氧化酶(GrIDO)基因及其启动子序列,并进行序列分析。方法根据滇龙胆转录组GrIDO基因序列设计基因特异性引物,使用RT-PCR方法克隆GrIDO基因的开放阅读框(open reading frame,ORF)序列,基于...
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滇龙胆1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构酶基因GrDXR的克隆、序列分析与原核表达
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《中草药》2014年 第16期45卷 2378-2384页
作者:张晓东 赵静 李彩霞 李涛 王元忠玉溪师范学院资源与环境学院云南玉溪653100 云南省农业科学院药用植物研究所云南昆明650223 
目的从滇龙胆Gentiana rigescens幼叶中克隆萜类合成关键酶1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构酶基因GrDXR,进行序列分析和原核表达。方法根据滇龙胆转录组中GrDXR基因序列,设计引物,通过RT-PCR扩增得到GrDXR开放阅读框(ORF)序列,并进行TA...
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滇龙胆GrCYP450-17基因的克隆、序列分析与原核表达
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《中草药》2014年 第18期45卷 2678-2683页
作者:张晓东 李彩霞 李泽君 李涛 王元忠玉溪师范学院资源与环境学院云南玉溪653100 云南省农业科学院药用植物研究所云南昆明650223 
目的从滇龙胆幼叶中克隆萜类合成相关酶基因GrCYP450-17,进行序列分析和原核表达。方法根据滇龙胆转录组中GrCYP450-17基因序列,设计引物,通过RT-PCR扩增得到GrCYP450-17开放阅读框(ORF)序列,并进行TA克隆、测序和序列分析;构建原核表...
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滇龙胆GrGPPS基因的克隆及其序列分析与原核表达
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《中草药》2014年 第14期45卷 2060-2068页
作者:王彩云 李富生 李涛 李彩霞 张晓东 王元忠云南农业大学农学与生物技术学院云南昆明650201 玉溪师范学院资源与环境学院云南玉溪653100 云南省农业科学院药用植物研究所云南昆明650223 
目的从滇龙胆Gentiana rigescens幼叶中克隆单萜化合物合成的关键酶牻牛儿基焦磷酸合成酶基因GrGPPS,进行序列特征分析和原核表达。方法根据三年生滇龙胆转录组GrGPPS基因序列,设计特异性引物,通过RT-PCR扩增得到GrGPPS cDNA序列,并进...
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滇龙胆GrWRKY5基因的克隆和植物表达载体构建
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《广西植物》2015年 第5期35卷 741-747页
作者:王彩云 李富生 李涛 李彩霞 张晓东 王元忠云南农业大学农学与生物技术学院昆明650201 贵州省毕节市中药研究所贵州毕节551700 玉溪师范学院资源环境学院云南玉溪653100 云南省农业科学院药用植物研究所昆明650223 
WRKY蛋白是目前被广泛研究的一类DNA特异结合转录因子,在植物次生代谢物生物合成、植物生长和发育及衰老等生理过程以及生物、非生物防御反应中起重要的调控作用。该研究从滇龙胆幼叶中克隆萜类合成的关键转录因子基因Gr WRKY5,并利用...
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滇龙胆GrHMA基因的克隆和原核表达
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《生命科学研究》2014年 第3期18卷 211-217页
作者:王彩云 李富生 李涛 李彩霞 张晓东 王元忠云南农业大学农学与生物技术学院中国云南昆明650201 玉溪师范学院资源与环境学院中国云南玉溪653100 云南省农业科学院药用植物研究所中国云南昆明650223 
HMA蛋白(heavy metal transporting ATPase)是一种在植物中广泛存在的多功能蛋白。根据滇龙胆转录组GrHMA基因序列,设计特异性引物,通过RT-PCR扩增GrHMA基因序列,并进行TA克隆、测序及序列分析;构建原核表达载体pGEX-4T-1-GrHMA,转入***...
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滇龙胆乙酰CoA转移酶基因的克隆与表达分析
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《江苏农业科学》2016年 第6期44卷 94-98页
作者:张晓东 李彩霞 王连春 王元忠玉溪师范学院资源环境学院云南玉溪653100 云南省农业科学院药用植物研究所云南昆明650223 
根据滇龙胆转录组乙酰CoA酰基转移酶基因GrAACT序列设计引物,使用逆转录PCR(RT-PCR)技术从滇龙胆幼叶扩增该基因,并进行序列分析、原核表达和组织特异性分析。结果表明:GrAACT基因(登录号KJ917163)开放阅读框长1 215 bp,编码404个氨基酸...
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Box-Behnken设计-响应面法优化滇龙胆药材产地初加工工艺
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《中国药房》2020年 第15期31卷 1830-1835页
作者:吴昕怡 刘秀嶶 屈云慧 石萍萍 杨雁 李智敏 田浩 谷丽萍云南省农业科学院农产品加工研究所昆明650221 云南省农业科学院药用植物研究所昆明650205 红河学院生命科学与技术学院云南红河652399 
目的:优化滇龙胆药材的产地初加工工艺。方法:采用高效液相色谱法测定滇龙胆中马钱苷酸、獐牙菜苦苷和龙胆苦苷的含量,再以上述3种成分含量的总评归一值(OD值)为评价指标,对热烫温度、热烫时间和干燥温度进行单因素试验;在此基础上,采用...
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滇龙胆甲羟戊酸激酶基因的克隆与表达分析
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《生命科学研究》2015年 第3期19卷 196-202页
作者:张晓东 李彩霞 赵静 杨娇 王元忠玉溪师范学院资源环境学院中国云南玉溪653100 云南省农业科学院药用植物研究所中国云南昆明650223 
甲羟戊酸激酶是甲羟戊酸途径的关键酶。根据滇龙胆转录组甲羟戊酸激酶基因Gr MK序列,设计一对基因特异性引物克隆该基因,并进行序列分析;构建原核表达载体p GEX-4T-1-Gr MK,转入大肠杆菌Rosetta(DE3),重组蛋白在37℃、1.0 mmol/L IPTG...
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