摘要：为了探讨蚯蚓特异性蛋白基因表达在监测多环麝香低水平长期暴露污染中的应用,选择蚯蚓热休克蛋白(HSP70)、钙网蛋白(CRT)、亲环素A(cyPA)、翻译控制肿瘤蛋白(TCTP)等代表性蛋白基因作为供试基因.采用自然土壤污染模拟实验,基于mRNA表达分子水平,研究吐纳麝香(AHTN)与佳乐麝香(HHCB)长期(28 d)污染胁迫对以上各特异性蛋白基因响应表达的影响.通过序列同源性比较与荧光定量PCR熔解曲线结果分析,表明设计的引物适合供试基因mRNA表达水平的检测.染毒暴露28 d后,当AHTN染毒浓度小于30μg.g-1或HHCB浓度小于50μg.g-1时,蚯蚓HSP70基因表达水平无显著变化,而AHTN浓度等于或大于30μg.g-1和HHCB浓度等于或大于50μg.g-1时,HSP70基因表达水平呈显著下调趋势;而各AHTN或HHCB浓度处理组中蚯蚓CRT基因显著上调表达;cyPA和TCTP基因表达水平与对照组比较均无呈现显著性差异.研究结果表明,HSP70与CRT等基因的响应表达有望成为表征多环麝香土壤污染暴露水平及生态毒理效应的潜在生物标志物.

摘要：基于miRNA:mRNA互补原则和CSE cDNA序列,设计了CSE特异的miRNAs.这些CSE特异的miRNAs显著地抑制CSE蛋白表达和H2S产生,增加活性氧的生成,并且诱导人类主动脉平滑肌细胞的增殖.通过构建包含CSE 3′-UTR序列报告基因和抑制荧光素酶活性实验,证实CSE特异的miRNA通过碱基互补结合CSE基因序列.CSE特异的miRNA没有影响其他基因的表达.与CSE特异的siRNAs相比,CSE特异miRNAs在抑制CSE基因表达和H2S的产生方面,展现出显著的高效率.miR-143是一个在心血管组织中高表达的miRNA,下调了CSE基因和其他基因的表达.miR-143抑制H2S的产生,但是对人类主动脉平滑肌细胞的增殖没有影响.本文设计的CSE特异miRNAs为研究调控CSE表达和H2S产生提供一个高效率的工具.这些CSE特异miRNAs具有成为治疗有关氧化应激异常和平滑肌细胞增长相关的心血管疾病的新型药物的潜在可能.