摘要：大丽轮枝菌核糖体基因ＩＴＳ区段特异扩增朱有勇１王云月１ＢｒｕｃｅＲ．Ｌｙｏｎ２（１．云南农业大学云南省植物病理重点实验室，昆明６５０２０１）（２．澳大利亚悉尼大学生命科学学院分子遗传学实验室，悉尼２００６）ＰＣＲＡｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｔｈｅＩ...

摘要：根据棉花黄萎病菌（Ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ ｄａｈｌｉａｅ）核糖体基因ＩＴＳ区段的碱基编码序列，设计合成了１对为２６ ｂｐ 的 ＰＣＲ 特异扩增引物（引物１： ５′ＣＡＴＣＡＧＴＣＴＣＴＣＴＧＴＴＴＡＴＡＣＣＡＡＣＧ， 和引物２：３′ＣＧＡＴＧＣＧＡＧＣＴＧＴＡＡＣＴＡＣＴＡＣＧＣＡＡ），进行了大丽轮枝病菌 ＰＣＲ 特异扩增试验。试验结果表明：本试验设计合成的这对引物，能对大丽轮枝菌全基因组 ＤＮＡ 和人工接种棉花黄萎病病株组织特异地扩增到大丽轮枝菌核糖体基因ＩＴＳ区段的３２４ ｂｐ 分子片段，该对引物可用于棉花黄萎病的分子鉴定和分子监测。本试验结果对棉花黄萎病的早期诊断和病原菌的检测和监测有潜在的应用价值。

摘要：根据香蕉枯萎病菌(Fusarium oxysporum ***)ITS序列设计合成的三条引物:FusF1(5′AACCC CTGTGAACATACCACTTG3′)、FusR1(5′GAGGAACGCGAATTAACGCGAC3′)和FusR2(5′GACGATTACCAGTAGCGAGGGT3′)构成引物对A(FusF1/R1)和B(Fus F1/R2),对尖廉孢菌古巴专化型病菌进行PCR特异扩增试验,结果表明,两对引物对引起香蕉枯萎病的镰刀菌全基因组DNA分别有338bp和408bp的特异扩增产物;在镰刀菌种以上的阶元有较好的分辨力;对目标菌株的检测下限分别是A(100fg)、B(10pg);而且B对香蕉感染枯萎病的病组织有相应的扩增产物,表明该引物对可用于香蕉枯萎病的早期鉴定和病原菌的检测。

摘要：根据GenBank中已发表的赤羽病病毒(AKAV)的S基因序列,设计了3条特异性引物,建立了检测AKAV的套式RT-PCR方法。特异性试验表明,该方法可以特异扩增出AKAV的S基因片段,但从牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、传染性牛鼻气管炎病毒(IBRV)等13种对照病毒中均不能扩增出目的条带。敏感性试验表明,套式RT-PCR能够扩增10-5稀释度的病毒RNA(核酸含量约1.18 ng/μL),比普通RT-PCR高出1 000倍。用此方法检测130份奶牛血清样品与1份流产胎儿病料,均未检测到阳性样本,但AKAV在血清模拟样品中可被有效检出。研究结果表明,该方法灵敏、特异,为AKAV的检测提供了一个快速、有效的手段。

摘要：参考GenBank发表的传染性法氏囊病毒(IBDV)基因组序列,设计并合成了一对特异扩增IB-DVVP2基因的引物。以广西玉林发病火鸡群分离的IBDV野毒YL株为材料,以其基因组为模板利用RT-PCR技术扩增出了1.5kb的cDNA产物,将VP2基因克隆于PUC119质粒上,得到重组PUC119质粒。并对VP2基因全序列测定、分析和聚类表明,YL株与欧洲超强毒株非常相似,而与经典强毒株、弱毒株和变异株相差较大。

摘要：目的:CYP2C19ml是引起CYP2C19酶活性缺陷的主要等位基因,有83％左右的慢代谢者含有CYP2C19ml等位基因,本文试图建立一步PCR测定CYP2C19ml等位基因的方法。方法:根据等位基因特异扩增(ASA)原理设计两对分别特异扩增野生型等位基因和突变型等位基因的引物,建立了一步PCR测定CYP2C19ml等位基因的方法。结果:对39位随机受试者进行了基因分型研究,发现3位CYP2C19ml纯合子、18位CYP2C19ml杂合子,其余18位为野生型纯合子。结论:说明效法能够用于测定CYP2C19ml等住基因,并且证明该法具有简便、快速和污染少的优点。

摘要：以RAAV0 1和RAAV0 2两条随机核苷酸加聚体为引物 ,通过随机扩增片段多态DNA的方法 ,在白头鹤、白枕鹤、丹顶鹤等 3种 4对不同个体中 ,发现一条约 30 0bp的雌性个体特异带 ,并应用这一方法成功地鉴别了未知性别的丹顶鹤个体 .同时参照已知动物CHD基因序列设计合成CHD基因引物 ,采用PCR方法在丹顶鹤雌性个体中扩增出一条 2 0 6bp的片段 .序列分析表明 ,该序列与已知其他鸟类CHD W ,CHD