摘要：无菌抽取犬外周血,分离单核细胞,经PHA刺激后收集细胞,使用Trizol提取细胞总RNA;利用自行设计的引物,反转录合成cDNA第1条链,PCR扩增出长约441 bp的白细胞介素-21(IL-21)基因带。经纯化回收,将基因克隆至pMD18-T,筛选阳性克隆测序证明扩增的cDNA的序列与已报道的序列相一致。

摘要：目的 :探索建立理想的胸主动脉夹层动脉瘤动物模型的简便而可靠的方法。 方法 :以带刻度的软管及穿刺针为材料 ,设计并制作血管导入装置 (造瘤器 ) ;在 X线透视下 ,将造瘤器经实验动物 (犬 )髂总动脉或腹主动脉导入至胸主动脉中膜中 ,然后通过导管注入肝素、肝素化血液和弹力蛋白酶。结果 :实验后即时、2周、1个月通过 6 0 %复方泛影葡胺造影下显示夹层动脉瘤形成 ,证明建模成功。 结论

摘要：背景：使用无泵型体外肺辅助技术进行气体交换可有效进行体外氧合呼吸支持，使患肺休息，再逐步恢复正常功能。目的：观察无泵型体外肺辅助技术对犬急性呼吸窘迫综合征模型的通气效果。设计、时间及地点：观察性实验，于2006-06/09在中国医学科学院阜外心血管病医院动物实验中心完成。材料：杂种犬6只，雄性，体质量（22.66±1.21）kg。呼吸机Servo 900c（Siemons Elema公司，德国）；流量仪（美敦力，探针FP-32E，传感器TX50）；血气分析仪（Nova biomedical200，美国）；低阻力膜肺（Nova Breath0.5，德国）；血流动力学监护仪（飞利浦MP50，美国）。方法：实验动物使用戊巴比妥30mg/kg麻醉后，静脉推注油酸0.08-0.10mL/kg，以动脉血氧分压/吸入氧浓度〈26.6kPa（200mmHg）为标准建立急性呼吸窘迫综合征模型，在成功建立急性呼吸窘迫综合征模型后，经一侧颈动脉与股静脉连接无泵型体外肺辅助系统，进行通气支持，对比支持前后动脉血气的变化。主要观察指标：记录无泵型体外肺辅助通气模型呼吸支持前后犬的动脉血氧饱和度、氧分压、二氧化碳分压的变化。结果：无泵型体外肺辅助模型通气前动脉血氧分压（6.17±0.45）kPa，动脉血氧饱和度为（80.47±3.70）%，通气后动脉血氧分压（8.47±0.47）kPa，动脉血氧饱和度为（94.65±1.48）%，无泵型体外肺辅助支持前后差异有显著性意义（P〈0.01）。二氧化碳分压由（4.71±0.23）kPa降为（2.57±0.19）kPa（P〈0.01）。结论：无泵型体外肺辅助技术可以对犬急性呼吸窘迫综合征模型的损伤肺进行有效支持。

摘要：根据Genebank中发表的犬传染性肝炎病毒 (ICHV)标准强毒株Glaxo和人工驯化的弱毒疫苗株CLL的保守序列间大小不同 ,按照引物设计的原则 ,设计合成了一对通用引物。该对引物可由ICHV强毒株扩增出 569bp的片段 ,而弱毒株可扩增出 2 4 4bp的片段。对PCR产物分别进行电泳、酶切和测序 ,证明PCR产物片段大小、酶切位点和核苷酸序列与设计的产物完全一致。正常DK细胞上清和犬传染性喉气管炎病毒 (CAV 2 )强、弱毒株细胞培养物均不能被该引物扩增 ,说明具有良好的特异性。其检测到的病毒量分别为 1 5TCID50 、 31TCID50 、说明该技术具有很高的敏感性。可用于ICHV强。

摘要：目的建立犬贾第虫巢式PCR检测方法并进行验证。方法根据犬贾第虫Rnase P基因序列设计两对特异性引物,通过优化Mg2+浓度和退火温度建立巢式PCR检测方法,并进行灵敏度和特异性验证。用优化的巢式PCR方法检测60份犬临床粪样。结果建立的巢式PCR方法的最佳Mg2+浓度为3.0 mmol/L;最佳退火温度为53℃;对犬贾第虫的最低检测量可达1个虫体DNA/ml;对柔嫩艾美尔球虫、伊氏锥虫、弓形虫、阴道毛滴虫、犬心丝虫等寄生虫基因组DNA的扩增结果均为阴性;60份犬临床粪样贾第虫的检出率为61.7%。结论建立的巢式PCR检测方法具有较高的灵敏度和特异性,可用于犬贾第虫感染的临床检测。

摘要：背景：体内移植骨髓间充质干细胞对实验动物的心肌梗死和心力衰竭有较好的改善作用，但具体机制尚不清楚。目的：观察骨髓间充质干细胞在心肌梗死犬梗死区的分化以及对心肌细胞凋亡的影响。设计、时间及地点：随机对照动物实验，于2005—03／2007—12在美国Texas Heart Institute干细胞研究室进行骨髓间充质干细胞移植，在第三军医大学完成免疫组织化学染色。材料：成年杂种犬，平均体质量25～35k。方法：采用密度梯度离心法提取犬骨髓间充质干细胞，移植前以BrdU标记骨髓间充质干细胞。采用外科手术于近端冠状动脉左前降支植入布洛芬缩肌装置并结扎相连分支的方法制作犬心肌梗死模型。造模后分为实验组与对照组，实验组于损伤缺血部位注射同种异体骨髓间充质干细胞。对照组注射等量生理盐水。主要观察指标：对移植BrdU标记的骨髓间充质干细胞的心肌梗死犬心肌梗死区组织细胞进行免疫组织化学染色，同时采用DeadEnd^TM Colorimetric TUNEL System对心梗标本进行凋亡细胞的染色观察。结果：注射骨髓间充质干细胞的心脏组织切片BrdU免疫组织化学染色可见大量细胞核呈现深褐色或黑色的阳性反应，在心脏组织的不同区域表现出不同的形态特征，其中大多数植入心肌细胞间的骨髓间充质干细胞，形态上与心肌细胞无异，而其他区域的骨髓间充质干细胞则与间质细胞较相似，无特定的形状。骨髓间充质干细胞移植组心肌梗死区凋亡的心肌细胞数少于未移植组。结论：骨髓间充质干细胞心肌内移植后可在心肌梗死区分化成心肌细胞，并减轻犬心肌梗死后的细胞凋亡。

摘要：根据Gen Bank上犬γ-干扰素基因(IFN-γ)序列(序列号WO318193),利用Primer 5.0软件设计特异性引物,应用RT-PCR技术从100μg/ml Con A刺激24 h后的犬外周血淋巴细胞总RNA中扩增出γ-干扰素基因,测序后应用DNAStar软件对克隆的犬γ-干扰素基因进行序列分析,并与Gen Bank上发表的犬、牛、大熊猫、鸡、牦牛、人、猪、野猪、斑马鱼、土拨鼠等的IFN-γ基因序列进行同源性比较。结果显示,克隆的犬IFN-γ基因大小501 bp,编码166个氨基酸,与犬、牛、大熊猫、鸡、牦牛、人、猪、野猪、斑马鱼、土拨鼠IFN-γ基因的核苷酸序列同源性分别为98.4%、81.6%、26.1%、26.1%、22.7%、22.7%、80.8%、81.0%、28.5%和25.0%;氨基酸序列同源性分别为95.8%、72.5%、5.4%、5.4%、6.6%、6.6%、68.9%、69.5%、5.4%和5.4%。运用DNAstar软件对犬γ-干扰素进行蛋白结构预测的结果显示,犬γ-干扰素蛋白含有10个α-螺旋、9个β-折叠、11个β-转角和5个无规则卷曲。

摘要：背景:此前已有学者从组织学等多角度探讨并进行了可注射复合人工骨作为椎体成形填充剂的实验研究,还需要进一步从术后伤椎轴向承压能力方面探讨此种治疗方法的疗效,以取得在人体上难以得到的直观对比数据。目的:观察在椎体成形术治疗犬胸腰椎骨折过程中植入可注射复合人工骨后伤椎的轴向承压能力。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2008-09/2009-01在深圳市龙岗区中心医院外科动物实验室完成。材料:脊柱矫形固定器钉棒Ⅰ型、Ⅱ型由天津正天医疗器械有限公司提供。参照尹庆水等提供的方法制备注射型复合人工骨,低温保存备用。其中珊瑚羟基磷灰石颗粒、重组人骨形成蛋白2冻干粉由解放军军事医学科学院提供,2%几丁糖溶液由解放军第二军医大学与上海其胜生物材料研究所联合研制。方法:1岁龄普通级健康家犬20只,随机分为治疗组和对照组各10只,模仿高处坠落致胸腰段受到屈曲压缩暴力进行造模,治疗组采用椎弓根钉棒系统对伤椎进行复位后通过伤椎椎弓根注入复合人工骨行椎体成形治疗。对照组仅采用椎弓根钉棒系统对伤椎进行复位内固定。主要观察指标:术后3个月处死动物,取伤椎及上下椎体段脊柱,在微电脑压力测试试验机上测量椎体中心点最大负载压强。结果:实验组100%伤椎中心点负载压强与同个体上下椎体比较差异无显著性意义,恢复了轴向承压能力;而对照组有60%伤椎中心点负载压强与同个体上下椎体比较差异有显著性意义(P<0.05),未恢复轴向承压能力。结论:采用椎弓根螺钉系统复位内固定及可注射人工骨椎体成形治疗胸腰椎骨折可能会有效地恢复术后伤椎抗轴压能力,从而提高手术成功率。

摘要：背景:骨髓间充质干细胞在体外长期培养易发生自发分化,而失去多分化潜能,因此必须对培养的细胞及时冻存,需要时再进行复苏。目的:建立犬骨髓间充质干细胞体外分离、培养、增殖、冻存的方法。设计、时间及地点:对照观察细胞学实验,于2005-06/2008-06在浙江中医药大学附属第一医院骨伤研究所完成。材料:健康成年雄性Beagle犬用于骨髓间充质干细胞的提取。方法:采用密度梯度离心法结合贴壁培养法分离纯化骨髓间充质干细胞,并进行传代扩增培养。将第2代骨髓间充质干细胞与12.5%DMSO混匀置于冻存管中,采用慢冻快融法进行冻存和复苏:将冻存管置于-4℃冰箱2h,然后移入-30℃冰箱2h,再置于厚壁塑料泡沫盒中,扎紧密封,置-80℃冰箱过夜后,取出冻存管直接放入液氮中保存,或放入-80℃冰箱保存。复苏时将冻存管从液氮或-80℃冰箱中取出,立即置37℃水浴并轻轻摇动,1～2min内迅速解冻。主要观察指标:复苏前后细胞成生长活性及形态变化。结果:分离的骨髓间充质干细胞为以均一的梭形的成纤维细胞样贴壁生长,贴壁及增殖能力强,传代细胞贴壁较快。经过液氮长期冻存后,将复苏后的骨髓间充质干细胞再培养,细胞形态及生长状态与冻存前无差异,均呈长梭形均匀分布生长,细胞生长增殖旺盛。结论:采用密度梯度离心法结合贴壁培养法可获得犬骨髓间充质干细胞,应用慢冻快融技术进行冻存和复苏,较好的保持了冻存细胞的活力和功能。

摘要：有人说出了这样一种看法:是罗中立的油画《父亲》使现代艺术打开了通向中国人的内心之门,是林跃的藏獒油画打开了中国艺术通向世界的大门。林跃獒画所掀起的画坛风暴,源自一个原始的自然魔力;一个天然的美的圣地;一个强大的充满野性威力的动物,这些艺术元素一经进入画家的笔下,立即成为平衡这个物欲喧嚣世界的一种精神表达。毫无疑问,画家传递给我们的是脱胎于悠久文化的壮阔艺术观,一个上自库尔贝、米勒,下自徐悲鸿、怀斯、罗中立、陈逸飞等大师的传承,梦幻特质从本真的写实中逸出。在追询、创作的过程中,画家以其丰富的人生阅历和体验,将生活中的片段,化作令人感动的画面。