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猪热休克蛋白70基因的克隆及在大肠杆菌中的表达: 收藏
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引用; 《中国兽医科学》2009年第7期39卷 646-650页; 作者：刘忠华周庆丰何津佳郑志青广东省温氏食品集团有限公司研究院广东新兴527400; 根据GenBank中收录的猪HSP70基因序列,设计了1对特异性引物。运用RT-PCR技术从经热应激诱导的大约克猪组织总RNA中扩增得到了HSP70基因,并将其克隆至pMD18-T Simple载体上,进行序列测定。将编码猪HSP70的基因亚克隆至pET-32a(+)上,并将...; 根据GenBank中收录的猪HSP70基因序列,设计了1对特异性引物。运用RT-PCR技术从经热应激诱导的大约克猪组织总RNA中扩增得到了HSP70基因,并将其克隆至pMD18-T Simple载体上,进行序列测定。将编码猪HSP70的基因亚克隆至pET-32a(+)上,并将重组质粒pET-32-pHSP70在大肠杆菌BL21(DE3)pLysS中经IPTG诱导表达。核苷酸测序结果显示,获得的基因序列全长2200 bp,含1932bp的开放阅读框,编码643个氨基酸,与已知猪HSP70核苷酸序列和氨基酸序列的同源性都高达99.5%。SDS-PAGE电泳及Western-blot分析表明,猪HSP70在BL21(DE3)pLysS中得到了高效表达。; 来源：详细信息评论

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