摘要：从猪肌生成抑制素 ( MSTN) c DNA序列中设计引物 ,以 p MD18- T- MSTN质粒为模板 ,PCR扩增猪 MSTN成熟蛋白编码序列 ,该片段全长 10 95 bp。将所得片段与 p MD18- T载体连接 ,构建重组质粒 p MT- mp MSTN,将其转化到大肠杆菌 DH5α中 ,成功地筛选到阳性克隆。双酶切重组质粒 p MT- mp MSTN和真核表达载体 pc DNA3.1,连接目的片段与载体 pc DNA3.1,转化大肠杆菌 DH5 α,经酶切、PCR及测序分析 ,表明成功地构建了真核表达质粒 pc DNA3.1-mp MSTN。

摘要：根据猪肌生成抑制素基因设计1对引物,PCR扩增出猪肌生成抑制素功能区编码基因片段,将该片段克隆至pGEM-T载体中。重组克隆质粒经序列分析,克隆序列与目的基因序列完全一致。重组克隆质粒经EcoRⅠ和BamHⅠ酶切,目的基因片段克隆到表达质粒径pGEX-4T-1,转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导,融合蛋白占菌体可溶性总蛋白的18%以上。

摘要：将猪肌生成抑制素编码序列下游883～1126 bp按大肠杆菌嗜好密码子进行优化,将优化后序列双链分成12个单链片段,F_1、F_2、F_3、R_6、R_5、R_4、F_4、F_5、F_6、R_3、R_2和R_1,采用化学合成方法合成,每对相邻互补片段之间有20bp序列交叉重叠。F_1长38bp,R_1长36bp,其他片段均40bp长,F_1和R_1片段两端分别加上限制性内切酶NcoⅠ和XhoⅠ的识别位点序列。经PCR扩增出254bp片段。该片段与pMDI8-T载体连接,转化JM109感受态细胞,所得阳性克隆进行测序分析,得到的克隆序列与设计的序列完全一致。表明成功地获得了猪肌生成抑制素下游编码序列克隆载体。

摘要：利用GenBank中猪肌生成抑制素(MSTN)编码序列设计引物,以湖北白猪背最长肌肌细胞总RNA为模板,利用RT-PCR技术,扩增出MSTN基因cDNA片段。该片段全长1277bp,包含猪MSTN基因的全部编码序列。将所得片段与pUCm-T载体连接,转化到DH5α大肠杆菌中,成功地筛选到阳性克隆,其质粒测序结果与文献报道的一致。