摘要：2020年10月,贵州省安顺市某猪场7日龄仔猪由于腹泻导致大量死亡。为了查明死因,本试验对腹泻病死仔猪肠内容物分别进行了猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪轮状病毒(PoRV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猪丁型冠状病毒(PDCoV)的反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测。结果显示,TGEV、PEDV、PDCoV均为阴性,仅PoRV为阳性。参考GenBank中PoRV基因组序列,设计合成1对扩增VP7基因的通用引物并进行该基因片段的扩增和测序。结果显示,该PoRV VP7基因与PoRV G5血清型VP7基因属于同一分支。结果表明,导致该猪场7日龄仔猪死亡的病原体为PoRV G5血清型。

摘要：[目的]建立对猪传染性胃肠炎病毒的RT-PCR检测方法,为该病的诊断和流行病学调查提供可靠的和敏感的手段。[方法]根据Genbank收录的TGEV-Miller毒株S蛋白的基因序列,设计合成一对引物,在优化RT-PCR反应条件的基础上,建立了检测TGEV的RT-PCR方法。[结果]两条引物扩增目的片段长度为1262bp。经测序分析,与Miller毒株的同源性为99.1%。[结论]该RT-PCR方法灵敏,可靠,具有很强的临床检测意义,可用于TGEV的快速诊断和流行病学调查。

摘要：分别设计了三对引物对猪流行性腹泻病毒（PEDV），猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）和猪轮状病毒（RV）的RNA进行RT-PCR，结果其扩增产物的目的条带分别为：199bp、886bp、342bp，证明对引起猪病毒性腹泻的最主要的三种病毒用RT-PCR方法，可在3小时内作出快速鉴别诊断。病毒间无交叉反应。

摘要：试验旨在建立并鉴别猪腹泻性疾病病原并为临床检测提供简单快捷的方法,针对PEDV-N基因、TGEV-S基因、PoRV-VP6基因设计特异性引物,结合细菌通用引物16s rRNA建立多重PCR方法,检测来自四川省凉山彝族自治州的某规模猪场腹泻仔猪和母猪11份样品(粪便和小肠)并将扩增产物进行测序验证。结果显示:经过优化反应条件成功建立起多重PCR检测方法;所建立的方法能够特异性扩增猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪轮状病毒(PoRV)和细菌感染,与猪的其他病毒无交叉反应;对PEDV、TGEV、PoRV和细菌的最低检出下限均为1.72×10^(3) copies/μL,特异性、敏感性、重复性好。临床11份样品检测结果为哺乳仔猪和母猪感染PEDV,其中4头母猪存在细菌混合感染;测序结果验证了11份腹泻样品均为PEDV感染,4头母猪细菌混合感染为恶臭假单胞菌。研究表明,所建立的多重PCR方法可用于PEDV、TGEV、PoRV和细菌的临床检测和流行病学调查,为临床中区别由病毒或细菌引起的猪腹泻提供一定诊断价值。

摘要：为了快速准确诊断猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪轮状病毒(RV)引起的猪腹泻病,通过设计三对引物,建立了扩增PEDV、TGEV、RV的多重RT-PCR方法,用于临床上大量腹泻病料的鉴定。该方法特异敏感,能同时检测PEDV、TGEV、RV,而对猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪伪狂犬病毒、猪圆环病毒2型病毒、乙型脑炎病毒、猪细小病毒等无扩增,检测的抗原稀释极限为107。用于35个猪场120份临床样品的检测,PEDV阳性率占37.5%,TGEV阳性率占0.75%,RV阳性率占1.25%。PEDV阳性病料测序结果分析表明,与近几年分离毒株亲缘关系较近,与经典毒株和疫苗株亲缘关系较远。结果表明建立的多重PCR方法特异性强、敏感度高,能用于临床诊断及流行病学调查。

摘要：本试验的目的在于建立可同时检测猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪轮状病毒(RV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猪流行性腹泻病毒(PEDV)的多重PCR检测方法。试验设计并合成了4对特异性引物,对样品中的PRV,RV,TGEV和PEDV进行了多重PCR扩增。结果显示,该方法可同时扩增出PRV(497 bp),RV(1356 bp),TGEV(238 bp)和PEDV(610 bp)的特异性目的片段,而对PPV,PCV,PRRSV和HCV的PCR扩增结果均为阴性。利用建立的多重PCR检测方法和单项PCR对60份临床病料进行检测。结果显示,两者的总符合率为95.0%。表明建立的多重PCR检测方法具有特异、快速、准确的特点,可用于上述4种病毒的早期鉴别诊断及大规模的流行病学调查。

摘要：猪流行性腹泻于2010年在中国暴发并流行至今,该病发生范围广、强度大、致死率高,且常与猪传染性胃肠炎、猪轮状病毒等传染病混合感染,临床诊断并不能对该病确。本文介绍了目前常用的实验室诊断方法,旨在对该病的防控提供一定的技术依据。1病原学检测方法1.1反转录聚合酶链式反应（RT-PCR）吴玉璐等针对PEDV的ORF3基因的缺失区设计引物,建立了可区分PEDV野毒株与疫苗株的RT-PCR诊断方法,