摘要：甘油脱氢酶（glycerol dehydrogenase，GDH）是以甘油为底物生产二羟基丙酮（dihydroxyacetone，DHA）和1，3-丙二醇（1，3-propanediol，PDO）的关键酶之一。以甘油为底物的微生物典型代谢途径如图1所示，甘油经甘油脱水酶（glycerol dehydratase，GDHt）催化生成3-羟基丙醛（3-hydroxypropionaldehyde，3-HPA），

摘要：甘油脱氢酶(GDH)可以催化甘油生成二羟基丙酮.为了进一步探索GDH的活性结构中心,提高GDH的活性,用Mg2+、Mn2+、Ba2+、Ca2+、Zn2+、Cu2+、Sr2+、Ni2+、Cd2+和Co2+等10种金属离子对GDH进行活性中心金属离子置换修饰,筛选出具有修饰效果的离子为Mg2+、Mn2+和Ba2+,修饰后其最大酶活力分别是初始酶活力的3.4,2.0和4.7倍.通过均匀设计对3种金属离子的修饰条件进行了优化,优化后测定的酶活力分别是未修饰GDH酶活力值3.17 U/mL的14.9,11.3和12.4倍,极大地提高了GDH的酶活力.

摘要：研究了克雷伯杆菌生产1,3-丙二醇关键酶(甘油脱氢酶、1,3-丙二醇氧化还原酶、甘油脱水酶)的发酵条件。研究各种碳源、无机氮源、有机氮源及无机盐对产酶的影响,应用均匀设计、神经网络和遗传算法优化发酵培养基组成,结果为(gL-1):甘油30、KCl 1.6、NH4Cl 6.7、CaCl2 0.28、酵母浸膏2.8。在温度37C、初始pH 7.0、摇床转速200rmin-1和接种量5%条件下,发酵24h,无细胞抽提液中甘油脱氢酶、1,3-丙二醇氧化还原酶和甘油脱水酶活力(U·mg-1)分别为9.16、18.72、0.48,发酵34h,发酵液中1,3-丙二醇(1,3-PD)最大浓度为7.96gL-1。代谢过程中关键酶酶活与1,3-PD峰值出现时间不一致,且提早于1,3-PD峰值的出现。此外,结果表明优化后的培养基去除了多种微量元素,克雷伯杆菌生产1,3-丙二醇关键酶可以在微氧条件下进行。

摘要：氧化葡萄糖酸杆菌中依赖辅基吡咯喹啉醌(Pyrroloquinoline Quinone,PQQ)的膜结合甘油脱氢酶(Glycerol dehydrogenase,GDH)是酶法转化甘油生成1,3-二羟基丙酮(1,3-Dihydroxyacetone,DHA)的关键酶。以铁氰化钾为电子媒介体,采用生物电化学法,再生甘油脱氢酶的辅基PQQ,从而实现酶法循环转化甘油生产DHA。设计电耦联反应装置,在(28±2)℃,370mV电压下反应18h,DHA质量浓度达到27.21g/L,甘油转化率为52.93%。

摘要：基因的表达水平受到起始密码子下游区域AT含量的影响,从巨大的序列集中筛选出具有特定AT含量和密码子用法特征的同义序列是一个繁琐的工作。本文研发AT含量优化工具"BestAT",初步解决了自动获取海量同义序列和充分展示同义序列的密码子用法特性两个关键问题,并且实现了与密码子用法数据库(CUD)的无缝结合,采用了密码子参数的原位标示和AT含量曲线等直观方式展示序列特性,为这类实验设计提供有力的支持。