摘要：基于ATP生物发光法,研制了一种细菌快速检测仪。该检测仪内置高精度A/D转换器,以小型光电倍增管进行光电转换,结合实验室自制的生物传感器,集光路、电路及软件设计于一体,组成了完整的细菌快速检测系统。其用于大肠杆菌标准品溶液检测时,检测结果与培养计数法结果的相关系数(R)达到0.9760,同时获得了仪表检测光强和细菌浓度关系曲线。针对实际样品检测中存在的问题,提出了相应的数据处理改进算法,引入了校准方程修正系数,用于食品及卡介苗样品检测,获得了良好的检测结果。对猴头菇类食品样品检测的结果与培养计数法检测结果的R达到0.993,重复性检测的相对平均偏差(R.A.D.)为7.69%,变异系数(CV)为9.07%。对卡介苗(BCG)样品检测结果与培养计数法检测结果的R达到0.997,R.A.D.为5.72%,CV为7.73%。与传统培养计数法相比,该仪表具有较好的检测速度,准确度和重复性。

摘要：针对高灵敏度、宽响应范围及自动检测三磷酸腺苷(ATP)的需求,设计了一种基于生物发光原理的ATP检测系统。系统采用自动加样技术,在发光反应的同时开始记录光强,使仪表检测自动化,且提高检测灵敏度;在优化光电检测单元设计和减小杂散光及电磁干扰的同时,提高荧光检测效率;通过电路和数据处理算法优化提高仪表检测范围。以浓度为10^(-15)～10^(-6)M范围内的标准ATP溶液进行了实验,结果表明仪表测量光强与ATP实际浓度相关系数为0.974,检测范围达9个数量级。与市场相关仪器相比,该系统具有自动化测试,性能和灵敏度高、响应范围宽的特点,在ATP测量以及相关领域如细菌测量、毒性测试及卫生状况检测等方面具有广泛的应用前景。

摘要：目的设计并合成一个用于过氧化氢(H_(2)O_(2))可视化检测的新型小分子生物发光探针(HPBP)。方法在萤火虫萤光素的6’位羟基引入特异性识别基团芳基硼酸酯,构建H_(2)O_(2)小分子探针HPBP。通过探针与底物反应后光学信号强度的变化,对H_(2)O_(2)检测的特异性和灵敏度进行考察。结果成功制备了HPBP,该探针对低浓度H_(2)O_(2)(0.25~5μmol·L^(-1))的响应具有良好的浓度依赖性,且在H_(2)O_(2)浓度低于其他物质20~300倍时,发光强度仍为其他物质的2~5倍。结论制备的HPBP探针检测限低,特异性强,为研究H_(2)O_(2)在疾病发生发展过程中的机制和作用提供了有力工具。

摘要：目的设计并合成一个用于肼(N_2H_4)可视化分析检测的小分子生物发光探针(bioluminescence probe for hydrazine,BLHy),并评价其光学响应性能。方法在光学报告的基团羟基萤光素(D-luciferin)上适当修饰位点,通过合理设计,引入肼的特异性识别基团(4-溴丁酸酯),设计和构建一个小分子生物发光探针BLHy。通过探针与底物反应后的信号强度和光学波长的变化,研究探针在肼可视化检测和分析中的应用。结果成功设计并合成了一个小分子生物发光探针BLHy。该探针在Tris-HCl缓冲体系中能特异性对肼进行响应,强度是其他物质的4~17倍,表现出良好的选择性;探针对0~333μmol·L^-1肼的响应具有良好的浓度依赖性(r^2=0. 9987)。结论首次以luciferin-luciferase生物发光体系作为分析技术,设计并合成了用于肼检测的生物发光探针BLHy,为进一步研究肼在复杂自然环境和生物体系中的作用和机制提供了有力的工具。

摘要：为了提高食品、工业环境中毒性物质的检测水平和响应时间,设计了一种基于生物发光法的毒性检测仪。该检测仪以生物发光法作为检测手段,利用毒性物质会抑制荧光素强度的原理,通过检测荧光素的强度来计算毒性物质的毒性。实际试验结果表明,系统能有效的监测到荧光的强弱,可快速准确的计算出待测物质的毒性,且响应快速,响应时间仅为30ms;测量精度相对较高,相对误差小于5%。

摘要：针对细菌总数现场检测需求，设计了一种基于ATP（三磷酸腺苷）生物发光技术的细菌总数现场快速检测仪。传统方法检测细菌总数需要2-3天，而利用ATP生物发光技术可在30min之内完成检测，大大提高了检测速度。本检测仪选取H5773-02型光电倍增管作为光电转换器件以检测微弱光信号，该光电倍增管的工作波长范围为330-850nm，峰值检测波长为500nm，ATP生物发光波长为550nm，两者基本一致，使检测仪具有较高的测量灵敏度。采用流动注射技术，在加入被测样品后分别向样品池中加入检测试剂。由于样品池被密闭在检测腔中，因此可有效减小外界光对测量结果的影响，同时也减小了人为加样对检测重复性的影响，提高检测重复性。利用本检测仪对浓度在10^-6-10^-14mol/L内的ATP样品进行了检测。实验表明，测量结果具有明显梯度，测试时间小于400s时，与标准样品浓度间的线性相关系数达到0.986。设计的细菌总数快速检测仪具有检测速度快、重复性高、操作简单等优点，可适用于食品卫生与安全、环境检测等领域。

摘要：介绍了我们研制和设计的用于测量生物超微弱发光的光子计数成象系统，包括光子成象头、高帧频ＣＣＤ摄象机、图象采集系统和计算机，可以定量地探测出生物的发光强度分布，还能够显示出其发光的图象，确定发光的形状和位置，本系统的信噪比为１０∶１，最小探测功率达１０－１６Ｗ，灵敏度高，动态范围大。使用本系统研究者可以从全新的角度进行深入的医学和生物学研究。

摘要：目的构建稳定表达荧光素酶的人乳腺癌MCF-7细胞株。方法采用脂质体转染法将荧光素酶基因导入MCF-7细胞,经潮霉素B筛选建立稳定表达荧光素酶的MCF-7-Luc细胞株;将不同数量MCF-7-Luc细胞分别接种于黑色96孔板(细胞数量59~30000)和裸鼠皮下(细胞数量2.44×10^(3)~5×10^(6)),IVIS LuminaⅢ成像系统体外培养细胞以及裸鼠体内荧光素酶表达效率。结果筛选得到稳定表达荧光素酶的MCF-7-Luc细胞;IVIS LuminaⅢ成像系统检测结果表明,不论是体外培养的细胞或是裸鼠体内,生物发光强度与接种的细胞数量之间均存在明显的线性关系(体外y=129.32x-26409,R^(2)=0.9922,P<0.05;体内y=106.82x+1E+07,R^(2)=0.9404,P<0.05)。结论成功构建了稳定表达荧光素酶的MCF-7-Luc细胞,为研究乳腺癌的发生发展、肿瘤微环境以及抗乳腺癌药物的筛选提供必要条件。

摘要：为实现自然水细菌总数快速检测的需求，基于三磷酸腺苷（ATP）生物发光法，研制了K2010型水质细菌总数快速检测仪。采用研制的快速检测仪分别对大肠杆菌标准品和太湖水实际样品进行了检测。此检测仪集成高精度AD转换器件，以小型光电倍增管（PMT）为光电转换器件，通过合理的电路、光路设计，结合实验室的自制试剂，实现了对自然水环境中细菌总数的快速检测；并可以通过GPS模块进行定位，将位置信息和检测结果通过GPRS模块传到远程终端。对大肠杆菌标准品进行检测的结果表明，在4．6×101～4．67×107CFU／mL范围内，相关性达到0．9515，检测下限达到46CFU／mL，满足水质细菌总数检测需求。针对自然水环境检测的需求，对3种不同的水处理方法进行了比较分析，在此基础上分别在夏季和冬季对太湖水进行了采样和检测。结果表明，夏季，采集到23个样本，与国标法对比发现，在102—105CFU／mL浓度范围内两者相关系数R一0．9169；冬季采集到40个样本，水中细菌浓度较低（在101～104CFU／mL之间）。检测结果说明，研制的K2010检测仪能正确区分富营养水质和贫、中营养水质，且检测速度快，准确度较高，重复性良好，可在水环境监测中用于水质细菌的快速筛查。

摘要：结合三磷酸腺苷(ATP)生物发光原理和免疫磁分离技术,研制了一种细菌特异性快速检测系统,可实现对细菌的特异性高灵敏度快速检测。该仪器通过改进光学检测模块的避光设计和放大采集电路的噪声抑制设计,及严格控制试剂反应条件,降低了检测背景,从而达到了更低的检测下限并提高了检测灵敏度。对大肠肝菌(ATCC25922)标准菌溶液进行检测,检测下限达到18CFU/mL,与培养计数法检测结果相关系数R达到0.993,选取一份样品进行重复性检测,相对平均偏差(R.A.D.)为6.48%,变异系数(CV)为9.33%。结合免疫磁分离技术,对混入的高浓度金黄色葡萄球菌的大肠杆菌溶液进行检测,检测结果与原始大肠肝菌培养计数结果一致,证明该仪器及方法对检测大肠肝菌具有良好的特异性。该系统检测速度快,准确度较高,重复性良好,特异性好,可用于食品及环境中的致病菌快速检测。