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反义MBD1基因片段真核表达载体的构建及鉴定: 收藏
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引用; 《中华普通外科杂志》2006年第4期21卷 293-295页; 作者：左石郭伟邹声泉华中科技大学同济医学院附属同济医院胆胰外科武汉430030; 目的构建反义MBD1基因片段真核表达载体,为研究MBD1基因功能提供工具。方法根据MBD1基因cDNA序列中编码序列,设计PCR引物,在引物5′端分别添加Xba I和Kpn I 酶切位点,将PCR片段反向插入真核表达载体pcDNA3．1(+)的多克隆位点上,构建反义...; 目的构建反义MBD1基因片段真核表达载体,为研究MBD1基因功能提供工具。方法根据MBD1基因cDNA序列中编码序列,设计PCR引物,在引物5′端分别添加Xba I和Kpn I 酶切位点,将PCR片段反向插入真核表达载体pcDNA3．1(+)的多克隆位点上,构建反义MBD1基因片段真核表达载体,并用PCR、酶切法和DNA测序鉴定。结果PCR鉴定得到322 bp特异性条带, 双酶切得到327 bp目的基因片段和5．4 kb载体片段,DNA测序说明插入片段序列是正确的。结论采用基因克隆技术,成功构建了反义MBD1基因片段真核表达载体,为研究MBD1基因在DNA甲基化和肿瘤发生中的功能提供了实验工具。; 来源：详细信息评论

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