摘要：2015年在浙江宁波发现感病马铃薯植株具有马铃薯花叶病的典型症状,即植株矮化,叶片花叶、皱缩。透射电镜负染色发现,其叶片中含有长度约600~900和400 nm的线状病毒粒子。超薄切片发现,病毒主要集中在叶肉细胞,产生的内含体包括病毒样粒子聚集体、串珠-片层内含体和柱状内含体。串珠-片层内含体代表马铃薯X属特征,柱状内含体代表马铃薯Y属特征,表明可能存在复合侵染,并且2种不同病毒引起的内含体被发现于同一细胞。使用马铃薯Y属病毒通用引物以及针对马铃薯X病毒设计的特异性引物进行RT-PCR扩增及测序,明确其为马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)和马铃薯X病毒(Potato virus X,PVX)复合侵染。

摘要：目的探讨血清降钙素原(PCT)检测在儿童下呼吸道感染病因学诊断中的价值。方法回顾性分析疑似下呼吸道感染的1 873例儿童患者送检的首次痰培养及PCT检测结果,比较患者痰培养结果与血清PCT水平的关系,分析革兰阴性菌、革兰阳性菌及真菌感染后患者体内PCT水平的差异。结果以0.5μg/L为血清PCT阳性阈值。痰培养病原菌阳性率为30.1%,血清PCT阳性率为35.6%。病原菌培养阳性患儿血清PCT检测值和PCT阳性率均明显高于细菌培养阴性患儿和正常菌群患儿,差异均有统计学意义(P0.05)。结论血清PCT检测可作为呼吸道感染病因检测的重要指标,用于指导临床抗生素的使用。

摘要：目前,国内血吸虫病病原诊断,多用尼龙筛集卵孵化法,该法操作程序多,虫卵易于丢失,影响结果的准确性。我们在实践中研制了一种h形顶管孵化法,粪便不经淘洗,直接投入孵化瓶内进行孵化,简化了尼龙筛集卵孵法操作程序,省工省时,节约用水,提高了查病工作质量: 原理与方法 1 原理 设计的h形顶管(见附图),观察毛蚴管与孵化瓶相连接管的连接处孔径小(6mm),从观察毛蚴管向下加水时,可以截住瓶内混水渗出,保持试管内水质清亮。由于两管连接处孔径小,毛蚴在试管内返回瓶内机遇减少,起到浓集毛蚴作用,易于观察毛蚴。

摘要：目的　为准确描述痰标本质量 ,指导临床客观地判读痰培养分离细菌的临床意义。方法　用定性 (文献介绍的 5种细胞学筛选标准 )和定量 (自行设计评分值为“ +5～ - 5”痰培养标本量化质量评估标准 )方法 ,比较不同质量的痰标本与唾液细菌严重污染率和呼吸道感染潜在病原菌检出率的关系。结果　 (1)按照不同筛选标准判断 ,140 0 1份痰标本中合格率差异甚大 (2 5 .6 %～ 6 5 .1% )。按中华呼吸病学会制订的标准 ,常规痰标本合格率仅为 33.9%。根据量化评估标准 ,高质量痰标本仅占少数 ,大多数标本的评分值为 -l～ 41之间 ,评分值在l与 2以上的标本 ,分别占 44 .0 %和 2 0 .7%。(2 )唾液细菌严重污染 3816份 ,平均污染率 2 7.3% ,按照细胞学筛选标准 ,合格标本的污染率 (18.5 %～ 2 1.4% )远低于不合格标本的污染率 (30 .3%～ 38.3% ) (P =0 .0 0 0 0 ) ;量化质量评估的评分值与唾液细菌严重污染率呈显著负相关 (P =0 .0 0 0 0 )。评分值从 +5到 - 5 ,污染率由 4.4%上升至 5 0 .0 %。(3) 34 91份标本检出潜在呼吸道感染病原菌 ,平均检出率为 2 4.9% ,合格标本检出率 (2 6 .6 %～34 .2 % )显著高于不合格标本的检出率 (2 0 .8%～ 2 2 .2 % )。量化质评标准中 ,评分值与潜在病原菌检出率呈正相关。从 +5到 -

摘要：【目的】基于双分子荧光互补(Bimolecular fluorescence complementation, BiFC)技术研究依据猪流行性腹泻病毒(PEDV)S蛋白受体结合位点肽段的靶标肽与互补肽在活细胞内的相互作用关系以及定位情况,为进一步利用该多肽进行猪流行性腹泻病毒的检测积累前期基础和提供理论支撑。【方法】依据靶标蛋白的氨基酸组成、所带电荷种类、形成分子间氢键的能力、极性的强弱、疏水性能等理化特性设计出靶标肽;根据靶标蛋白的氨基酸组成,设计出在理论上与其相互作用的互补肽,并利用生物信息学工具对靶标肽与互补肽进行预测分析;将靶标肽与互补肽的核苷酸序列分别插入EcoRΙ/XhoΙ双酶切后的pBiFC-VC155与NotΙ/SalΙ双酶切后的pBiFC-VN173载体中,构建出BiFC真核表达载体,经酶切及测序验证正确后转染Vero细胞来研究靶标肽与互补肽的互作关系以及形成的BiFC复合物在细胞内的精确定位。【结果】生物信息学分析表明靶标肽和互补肽分别带有亲水性和疏水性结构域,亲水性结构域都带有正负电荷,能够产生静电引力;酶切鉴定和测序结果表明成功构建了pBiFC-VC155-靶标肽和pBiFC-VN173-互补肽真核表达质粒;细胞转染试验表明重组质粒共同转染后靶标肽和互补肽能够在Vero细胞内形成BiFC复合物,表明两者发生了相互作用;间接免疫荧光试验证实该BiFC复合物主要分布于细胞核中。【结论】研究证实了基于猪流行性腹泻病毒S蛋白受体结合位点肽段设计的多肽能够在活细胞内发生相互作用,表明该肽段用于检测的可行性。

摘要：自八十年代以来,随着PCR技术的兴起,PCR诊断亦逐步应用到医学、兽医学的病原诊断,并具有独到的优越性。目前用PCR方法诊断伊氏锥虫病尚属空白,本研究旨在建立伊氏锥虫病诊断方法。 我们参照国外有关报导,设计并合成DNA扩增引物一对:5′-TGCAGACGACCTGACGCTACT-3′,5′-CTCCTAGAAGCTTCGGTGTCCT-3′。样品处理采用虫血加裂解液,离心后弃上清,用PCR缓冲液洗后,可直接用于DNA扩增:每个样品加水至10μl,加石腊油覆盖,100℃20分钟后,置反应温度93℃。