摘要：设计了一种测定人血清中癌胚抗原的毛细管电泳-化学发光检测均相免疫分析新方法。采用四苯硼酸钠增强luminol-H2O2-HRP体系化学发光的原理,化学发光检测经毛细管电泳分离的,用辣根过氧化物酶（HRP）标记的癌胚抗体及免疫复合物。测定癌胚抗原的线性范围2.0-80.0μg/L（R=0.9921）,检出限为0.1μg/L（绝对检出限为0.75 fg）。

摘要：目的观察外周血中癌胚抗原（ＣＥＡ）分泌性肿瘤标志基因的表达。方法设计特异的引物，用逆转录ＰＣＲ方法检 测正常人及肿瘤病人外周血有核细胞成分中的 ＣＥＡ ｍＲＮＡ。结果 ４６例肿瘤患者中有 ２５例检出 ＣＥＡ ｍＲＮＡ，阳性率 为５４．３５％；正常对照者 １２例均阴性。肿瘤临床分期为Ⅲ、Ⅳ期的患者血清ＣＥＡｍＲＮＡ检出率明显高于Ⅰ、Ⅱ期的病人 （Ｐ＜０．０５）。 ＣＥＡ ｍＲＮＡ阳性率与血清 ＣＥＡ水平无显著性关系（Ｐ＜０．０５）。临床有远处转移者 ＣＥＡ ｍＲＮＡ阳性率明显高 于无远处转移者（Ｐ＜０．０５）。对临床无远处转移征兆，而 ＣＥＡ ｍＲＮＡ检测阳性的 １２例患者进行半年的随访，３例出现脏 器的转移。结论外周血标志基因检测是肿瘤微转移检测的灵敏方法。ＣＥＡｍＲＮＡ阳性率与肿瘤临床分期正相关，与肿 瘤的远处转移密切相关，而与血清ＣＥＡ水平无显著性关系。血中标志基因阳性可能提示肿瘤的早期转移。

摘要：目的 设计一种基于AgI模拟酶纳米材料的阻抗型免疫传感器,对血清样品中的癌胚抗原（CEA）进行高灵敏检测。方法 合成一种壳聚糖修饰的碘化银（CS-AgI）纳米材料,利用透射电镜（TEM）和傅里叶红外光谱（FTIR）法对合成的CS-AgI进行表征,以CS-AgI为信号标记物修饰CEA抗体,采用夹心式免疫分析法在金电极表面制备一种高效、灵敏的电化学免疫传感器,采用电化学工作站定量分析检测所构建免疫传感器的电化学性能。结果 成功合成CS-AgI纳米颗粒,颗粒呈球形,粒径约为100nm。以CS-AgI纳米颗粒为信号标记物构建的免疫传感器在pH 7.0的磷酸盐缓冲液中检测CEA时表现出良好的电化学性能,其交流阻抗响应值与样品中的CEA浓度的对数呈线性增加趋势,并在CEA浓度为0.1-80ng/mL范围内展现出良好的线性关系（r=0.996）,检测限达到0.05ng/mL。结论 基于AgI模拟酶纳米材料构建的阻抗型免疫传感器可以高灵敏检测CEA,同时具有较好的精确性、重现性和选择性,为癌症的早期诊断和早期治疗提供了实验依据。

摘要：癌胚抗原(CEA)作为肿瘤标志物,在多种恶性肿瘤中高表达.为探索CEA在肿瘤发生发展过程中的生物学作用,本研究以结肠癌细胞株8307为研究对象,应用RNAi技术抑制CEA在8307细胞中的表达,观察其对8307细胞生长的影响.依据siRNA设计原则,设计合成靶向CEA的shRNA并克隆到pSilencer2.1-U6 neo载体中,成功构建了CEA shRNA表达载体,通过脂质体介导转染8307细胞,经G418筛选出抑制CEA表达的稳定细胞.RT-PCR、Western印迹分别检测CEA mRNA及蛋白表达水平,MTT及集落形成实验检测细胞增殖活性.实验结果显示,构建的CEA shRNA表达载体明显抑制CEA mRNA及蛋白水平的表达.MTT实验中,CEA表达下调的8307细胞生长活性降低,与对照组相比,抑制率达39%(P<0.05),细胞集落形成能力也显著降低(P<0.05).上述结果初步证明,构建的CEA shRNA表达载体能明显降低CEA的表达,并抑制结肠癌细胞增殖活性.

摘要：目的构建分泌型载体并表达癌胚抗原单链抗体。方法以ｐＧＥＭ－１１ｚｆ（＋）为基础，插入化学合成的１４个寡核苷酸片段（共１７６ｂｐ），构建成含核糖体结合位点（ＲＢＳ）、翻译起始点（ＡＴＧ）、果胶酶信号肽基因（ｐｅｌＢ）和翻译终止点（ＴＡＡ）的分泌型表达载体（ＲＰＹ）。化学合成带有抗体重、轻链可变区基因插入位点和惰性连接序列的８２ｂｐ片段，并克隆到ＲＰＹｐｅｌＢ信号肽的下游，构建成抗体分泌型表达载体ＲＰＹＡ。将ＣＥＡ单抗重、轻链可变区基因（ＶＨ、ＶＬ）插入到ＲＰＹＡ的相应位点，转化大肠杆菌ＨＢ２１５１，ＩＰＴＧ诱导表达。结果序列测定表明ＲＰＹＡ的序列与原设计序列一致，免疫印迹实验表明表达产物具有ＣＥＡ结合活性，分子量为２．６×１０３，胞浆内结合有ｐｅｌＢ信号肽的表达产物分子量为３２×１０３。

摘要：本文构建了DNA调节纳米金颗粒(AuNPs)过氧化物酶模拟酶活性的比色检测方法,用于癌胚抗原的检测。将癌胚抗原的核酸适配体及其互补链通过碱基互补配对构成双链DNA,修饰在磁性微球负载的AuNPs上,制备出具有可调节过氧化物酶模拟酶活性的生物探针。癌胚抗原被生物探针上的核酸适配体捕获后,在AuNPs表面形成空间位阻效应屏蔽底物,从而抑制了AuNPs的酶活性。为了指示纳米金颗粒的酶活性,用生物探针催化氧化色源底物3,3′,5,5′⁃四甲基联苯胺(TMB)显色。TMB颜色随着癌胚抗原浓度的增加而变浅,根据体系650nm处的吸光度与癌胚抗原浓度之间的反比关系实现了对癌胚抗原的测定,线性范围为2~18 ng/mL,检测限达0.375ng/mL。此外,癌胚抗原浓度超过4.8ng/mL时,颜色出现了可直接用肉眼判断的显著变化。为使检测更加便捷,本文同时设计了倒置磁分离检测管,在管中就能完成纳米探针捕获癌胚抗原、磁分离、洗涤。优化条件下,比色检测体系回收率为99%~100%,与临床检验差异显著性分析表明,t检验低于3.182,无明显差异。

摘要：痘苗病毒的基因组庞大，结构复杂而特殊，不可能将外源基因直接插入它的基因组，必须利用一种特殊的痘苗病毒质粒，才能构建成功重组痘苗病毒．在分析了痘苗病毒质粒ｐＪ１２０〔含有我国天花疫苗－痘苗病毒天坛株７６１的启动子和胸苷激酶（ｔｈｙｍｉｄｉｎｅｋｉｎａｓｅ，简称ＴＫ基因），及含有人癌胚抗原（ｃａｒｃｉｎｏｅｍｂｒｙｎｉｃａｎｔｉｇｅｎ，简称ＣＥＡ）ｃＤＮＡ全序列的质粒ｐ９１０２３Ｂ－ｃｅａ－１７结构的基础上，设计出三步法构建了重组疫苗病毒质粒ｐＪ－ＣＥＡ．经酶切及ＰＣＲ鉴定ｐＪ－ＣＥＡ中ＣＥＡｃＤ－ＮＡ的存在，进一步用同源重组方法构建了表达人ＣＥＡ的重组痘苗病毒，并以人体成纤维细胞作为宿主细胞，对ＣＥＡ－重组痘苗病毒进行了大量培养．再次证实痘苗病毒是良好的真核表达载体，可以高效而准确地表达细胞膜糖蛋白ＣＥＡ．

摘要：目的　探讨不同体位对肿瘤标志物AFP、CEA的影响。方法　 90名志愿者采取同体配对设计 ,分别抽坐、卧两种姿势同一部位的血液样本 ,在ACS :180PLUS全自动化学发光免疫分析仪上配对分析AFP和CEA两项指标。结果　坐位和卧位检测出来的结果差异有非常显著意义 (P 卧位 ,AFP升 12 .7% ,CEA升高 14 .7%。体位改变与年龄无关 ,与性别有关系。结论　体位改变可引起肿瘤标志物AFP、CEA两项指标的显著生理变异 ,致使正常边缘数值出现异常结果。提示在分析实验数据时不要忽视体位因素 。

摘要：目的：设计一种新型的基于丝网印刷技术的癌胚抗原（CEA）免疫传感器,用于癌胚抗原浓度的床边检测。方法：在丝网印刷电极（SPE）上层层修饰上多壁碳纳米管（MWNTs）N,N-二甲基甲酰胺（DMF）分散液与壳聚糖纳米二氧化铈（Chitosan-Nano CeO2）溶液两种纳米材料,利用纳米铈固载癌胚抗原抗体（anti-CEA）,最后用牛血清白蛋白（BSA）封闭纳米铈上非特异位点,构建一种新型的癌胚抗原免疫传感器。采用透射电镜（TEM）及循环伏安法（CV）对修饰过程进行表征。结果：探讨不同pH、孵育温度及孵育时间对该免疫传感器性能的影响,该传感器在最适条件下对CEA响应良好,其线性范围为0～80 ng/ml,线性相关系数r=0.99825,检出限为0.08 ng/ml。结论：CEA免疫传感器具有稳定性好、灵敏度高、特异性好、结果准确可靠和可再生等优点,可应用于临床检测。

摘要：目的评价呼出气冷凝液(exhaled breath condensate,EBC)中癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)水平检测在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)早期诊断和临床分期中的意义。方法收集36例NSCLC患者及30例正常对照组的EBC并同时抽静脉血清,分离血清,采用化学发光法测定EBC和血清中CEA含量。结果 NSCLC组EBC和血清中CEA水平均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);腺癌组EBC和血清中CEA水平均明显高于鳞癌组,差异有统计学意义(P<0.05);按TNM分期,Ⅲ期~Ⅳ期NSCLC患者EBC和血清中CEA水平均明显高于Ⅰ期~Ⅱ期和对照组,且Ⅰ期~Ⅱ期NSCLC患者EBC和血清中CEA水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论测定EBC和血清中CEA水平有助于NSCLC早期诊断和临床分期判断。