摘要：目的:寻找对白假丝酵母菌准确可靠的基因分型方法。方法:经CHROMagar CandidaTM鉴定培养基鉴定为白假丝酵母菌的108株临床菌株,分别采用针对白假丝酵母菌25S rDNA基因多态性设计的引物进行PCR扩增(简称PCR25S rDNA)和随机扩增多态性DNA(Random Amplified Polymorphic DNA,RAPD)两种基因分型方法对其进行基因分型,并比较其结果。结果:PCR 25S rDNA方法将108株白假丝酵母菌分为A、B、C3型;用RAPD指纹技术方法将108株白假丝酵母菌分为21型。结论:两种分型方法对白假丝酵母菌种内的分型结果不完全一致,RAPD指纹技术要优于PCR25S rDNA。

摘要：目的初步探讨白假丝酵母菌对变形链球菌产酸能力的影响。方法实验分A、B、C、D四组,依次为白假丝酵母菌单独培养、变形链球菌单独培养、两菌混合培养、空白对照组。在不同葡萄糖浓度(0.01～0.15mol/L)或不同初始pH值(7.0～4.0)下,将两菌单独或混合培养48h后,测定上清液pH值,采用析因设计资料的方差分析判断两菌的产酸能力间是否存在交互作用,并以变形链球菌单独培养(B组)为参照,评价两菌混合培养(C组)的产酸能力。结果不同葡萄糖浓度下,白假丝酵母菌均可抑制变形链球菌的产酸力(P0.05)。pH为7.0～5.5时,白假丝酵母菌抑制变形链球菌的产酸力(P0.05)。初始pH为7.0时,C组产酸量小于B组(P0.05);初始pH降至5.5以下时,C组的产酸量大于B组(P<0.05)。本实验条件下,混合培养的总产酸量随培养基的葡萄糖浓度升高呈增多趋势,随初始pH降低呈减少趋势。结论白假丝酵母菌对变形链球菌产酸能力的影响及两菌混合培养的产酸力均与培养基葡萄糖浓度和初始pH有关。

摘要：目的运用Agilent生物分析仪对临床白假丝酵母菌进行重复序列(REP)-聚合酶链反应(PCR)分型,并分析其流行趋势。方法设计REP引物,进行PCR扩增,用DL7500 Labchip芯片在Agilent 2100生物分析仪上对产物做微流电泳,获得虚拟凝胶视图,再运用GelCompareⅡ软件对其DNA指纹图谱做聚类分析。结果白假丝酵母菌菌株指纹图谱相似度较高,>80%以上。被分析的100株临床株可分为9个基因型。结论REP-PCR的Agilent 2100同源性分析具有快速、易于操作、高重复性和高分辨率等优点,可广泛用于流行病学调查与研究。

摘要：目的建立可同时检测脓毒症患者血液中肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、凝固酶阴性葡萄球菌、金黄色葡萄球菌和白假丝酵母菌的多重实时PCR方法。方法根据各病原菌基因组保守序列设计引物和探针,建立多重实时PCR检测方法。对建立的多重实时PCR检测方法进行特异性、敏感性和灵敏度分析,并使用该法对112份脓毒症血培养阳性标本进行验证。结果成功建立脓毒症常见病原菌的多重实时PCR检测方法。此方法特异性、敏感性良好,灵敏度达10-5ng/μl,与标准检测方法(血培养加生化鉴定)相比,缩短了20 h。112份临床血培养阳性标本中,目标病原菌83例,多重实时PCR检出80例阳性;非目标病原菌29例,多重实时PCR检测均为阴性。检测结果显示,该方法特异性达100%,敏感性达96.39%。结论该多重实时PCR检测方法具有快速、高效、灵敏、特异的优点,可用于临床重症监护室患者血液常见感染病原菌的诊断。