摘要：针对白细胞介素18(il-18)基因和本实验室分离的PRRSVJL/07/SW毒株全基因序列,分别设计了2对特异性引物,扩增出il-18基因和orf6基因。将2个目的基因克隆于真核表达载体pegfp-N1中,成功构建了重组真核质粒pegfp-orf6和pegfp-il18-orf6,阳性质粒转染Marc-145细胞进行筛选。通过表达载体在转染细胞中的高效转染,增强型绿色荧光蛋白(EGFP)快速、准确的反映出阳性质粒在细胞质中的正确表达,再通过SDS-PAGE和Western blot鉴定构建的真核表达质粒pegfp-il18-orf6的正确性。结果表明,orf6基因和il-18基因在Macr-145细胞中能有效表达。结论,所构建的真核质粒pegfp-il18-orf6结构正确,能够在Marc-145细胞中高效表达,而且表达产物具有特异免疫学反应。