摘要：目的用高保真DNA聚合酶介导的PCR检测β地中海贫血基因热点突变。方法选取已知中国人群β珠蛋白基因CD41-42、IVS-2nt654、TATAbox-28、CD17、CD71-72及CD26热点突变位点为检测靶点,分别设计3'末端与野生型基因位点或突变型基因位点完全配对的引物,并用硫化磷酸修饰,进行高保真DNA聚合酶介导的引物延伸反应。用多重PCR反应体系检测临床已知分别含CD26和TATAbox-28突变热点患者的DNA标本。结果对野生模板而言,仅有野生型等位基因相关引物有产物产生,而突变型等位基因位点特异性引物无产物产生。反之,使用突变模板,仅突变型等位基因位点相关引物有产物产生,而野生型等位基因位点特异性引物无产物产生。高保真DNA聚合酶介导的多重引物延伸反应筛查含有CD26或TATAbox-28突变的患者DNA标本时显示,突变引物混合物只有相应突变位点的产物产生,而野生引物混合物则有除突变位点以外的其他5个位点的产物产生。结论建立了基于高保真DNA聚合酶的筛查β地中海贫血基因热点突变的PCR技术。

摘要：目的研究校正PCR在性别鉴定中的可应用性。方法采用突变敏感性"分子开关"介导的PCR针对Y染色体特定序列进行识别。实验包括三个方面:采用普通PCR,针对Y染色体M45(rs2032631)位点设计特异性引物结合突变敏感性分子开关,对已知性别的样本进行检测;采用实时定量PCR和突变敏感性"分子开关",以及Y染色体特异性引物Y02对已知性别的样本进行检测;采用Y染色体特异性引物Y02对未知性别的男女模板进行检测。结果本实验对所采用的小数量样本,在已知性别组与未知性别组的性别鉴定上均达到检测性别与实际性别完全相符,预示着该方法在性别鉴定上的巨大潜在应用价值。