摘要：目的:基于分析方法质量源于设计(analytical quality by design, AQbD)理念进行实验设计(design of experiment, DOE),建立硫酸新霉素药物中外源DNA荧光染色检测方法。方法:利用MODDE?Pro11软件进行DOE开发,对关键影响因素和模型参数进行考察和优化,再采用基于荧光染色原理的Qubit?DNA检测试剂盒进行方法建立。结果:建立了硫酸新霉素中外源DNA的通用性检测方法。该方法的关键影响因素为溶剂种类、溶剂浓度和供试液浓度;溶剂种类选择氯化钠,最优分析条件为溶剂浓度1.4 mol·L^(-1)、供试液浓度1.8 mg·mL^(-1);该方法线性关系良好(r=0.995 7,n=2),加样回收率>81.0%,耐用性实验中加样回收率均在优化标准80%~120%范围内。结论:该方法准确度高、稳固性强、通用性好,为建立发酵来源化学药品中的外源DNA方法提供了参考。

摘要：目的:筛选硫酸新霉素灭菌溶液的最佳处方,并考察其质量稳定性。方法:配制各种不同处方硫酸新霉素灭菌溶液,以溶液颜色、pH值及浓度的变化为考察指标,筛选出最佳处方,预测其稳定性,并与留样观测结果进行比较。结果:用盐酸调节溶液pH值至4～5、100℃灭菌后溶液颜色不会变黄,经6mo加速试验,9mo室温留样观察,质量稳定。结论:本处方设计合理,性质稳定,质量可控。

摘要：目的建立用于测定硫酸新霉素效价的高效液相色谱-脉冲安培电化学检测器法(HPLC-PAD)。方法建立并验证HPLC-PAD法,测定硫酸新霉素各主要组分含量及相关物质;采用在线膜抑制脱盐技术辅助LC-IT-TOF法测定硫酸新霉素杂质谱,结合组分活性研究确定了硫酸新霉素的主要活性组分;采用半制备液相色谱-蒸发光散射检测器串联制备硫酸新霉素B及硫酸新霉素C精制品,采用波谱手段进行结构确证;采用质量平衡法测定二者的纯度;采用三剂量抗生素微生物检定法测定B、C精制品各自的效价值,推导公式计算出硫酸新霉素的量效转换系数,设计实验进行交互作用考察及实际样品的验证。结果建立的HPLC-PAD方法在分离能力及方法的稳定性上均优于《欧洲药典》(EP)方法,适用于硫酸新霉素各组分的准确定量及有关物质检查;在线膜抑制脱盐技术成功地去除了流动相中的三氟乙酸,对硫酸新霉素的杂质谱进行研究,结合活性研究结果,确定新霉素B和新霉素C为新霉素的主要活性组分;成功制备获得新霉素B、C精制品,通过实验和计算获得了硫酸新霉素的量效转换系数,并通过了验证。结论初步实现了仪器法对微生物生物检定法的替代,基本完成了多组分氨基糖苷类抗生素硫酸新霉素的量效一致性研究工作。

摘要：目的观察体外培养的新生大鼠耳蜗Corti器经不同浓度硫酸新霉素处理后,各回毛细胞损伤情况。方法取新生大鼠完整耳蜗基底膜,体外培养12小时,存活贴壁后加药处理。对照组10个样本;3个实验组各10个样本,分别用终浓度为1mmol/L、2mmol/L、4mmol/L硫酸新霉素处理24小时。进行MyosinⅦa免疫荧光组织化学染色,在共聚焦显微镜下观察各回毛细胞缺失情况。分别选取10个图片进行毛细胞计数(每张图片截取100μm计数毛细胞个数),并利用CHISS软件进行统计分析。对照组除不加入硫酸新霉素外,其他培养条件均与实验组相同。结果硫酸新霉素对离体培养的新生大鼠耳蜗毛细胞具有损伤效应,且外毛细胞对硫酸新霉素的毒性作用比内毛细胞敏感。加入硫酸新霉素后,耳蜗毛细胞损失从底回外毛细胞开始,随着药物浓度增加,逐渐累及到中回,最后顶回受累,且损失程度随着浓度的递增而加重,以外毛细胞为甚。单纯体外培养的耳蜗毛细胞没有缺失。经完全随机设计方差分析可得:顶回正常组内毛细胞数量与新霉素1mmol/L组、2mmol/L组无统计学差异,与新霉素4mmol/L组有统计学差异;中、底回正常组内毛细胞数量与新霉素1mmol/L组、新霉素2mmol/L组、新霉素4mmol/L组均有统计学差异;顶回正常组外毛细胞数量与新霉素2mmol/L与4mmol/L组有统计学差异;中、底回正常组外毛细胞数量与新霉素1mmol/L组、新霉素2mmol/L组、新霉素4mmol/L组均有统计学差异。结论新生大鼠体外培养的耳蜗毛细胞随着硫酸新霉素药物浓度的增加损失越严重,且从底回向顶回发展,此与活体动物实验的损害规律基本相同,因此可作为耳毒性药物损伤后毛细胞再生研究的体外模型。

摘要：硫酸新霉素是一种氨基糖苷类抗生素药物,对葡萄球菌、克雷伯菌属、变形杆菌属等肠杆菌科细菌有良好抗菌作用。硫酸新霉素的制备由发酵、粗提和精制三个部分组成。发酵工段主要有接种和一次发酵、二次发酵,发酵液进入粗提工段,经过阳离子树脂吸附、过筛、反洗、解吸以及阴离子树脂交换得粗提液,最后进入精制工段经过转盐、过滤、干燥得到产品。介绍年产3.0万十亿单位硫酸新霉素的发酵车间工艺设计,内容包括:产品概述、流程设计及叙述、"三废"处理及综合利用等。

摘要：目的:建立管碟法测定曲咪新乳膏中硫酸新霉素的效价。方法:选择金黄色葡萄球菌作为检定菌,并对微生物管碟法测定硫酸新霉素效价进行试验设计。结果:管碟法线性范围为1～25 ***-1(r=0.995 5),平均回收率为99.3%(RSD=1.3%,n=9)。结论:本方法简便、准确,重复性好,可用于曲咪新乳膏中硫酸新霉素的含量测定和质量控制。

摘要：目的:建立管碟法测定复方倍他米松软膏中硫酸新霉素的效价测定方法。方法:以金黄色葡萄球菌为试验菌株,对管碟法测定硫酸新霉素效价进行试验设计与考察。结果:硫酸新霉素浓度在3. 3～24. 4 U·ml^(-1)范围内线性关系良好(r=0. 997 1),平均回收率为99. 8%(RSD=1. 5%,n=9)。结论:本方法简便、准确,重复性好,可用于复方倍他米松软膏中硫酸新霉素的含量测定。