摘要：【摘要】目的MYCN基因高扩增是神经母细胞瘤（neuroblastoma，NB）预后的重要指标，其表达蛋白N-myc在NB发生发展中的意义尚存在争议。我们以MYCN基因高扩增NB细胞株SK—N-BE（2）为研究对象，探讨N-mye表达对细胞增殖、迁移的影响及可能机制。方法设计构建MYCNsiRNA；转染NB细胞株SK—N—BE（2），采用RT-PCR法和Western-blot法检测表达抑制情况；抑制N-myc表达后，用BrdU（colorimetricbromodeoxyuridine）试剂盒检测细胞增殖能力变化，Tr—answell（Costar）系统检测细胞迁移能力变化；Western-blot法检验RACKl、Src、Akt、ERKl／2及P38表达和磷酸化改变。结果对照组mRNA表达值（设为1），RT-PCR检测显示转染siRNA的SK-N-BE（2）细胞中N—mycmRNA表达（（）．34±0．06）与对照组比较，差异有统计学意义（P〈（）．05）。Western-blot检测结果显示，转染siRNA的SK—N-BE（2）细胞中N—myc蛋白表达（0．61±0．15）与对照组（1．97±0．26）比较显著降低，差异有统计学意义（P％0．05）。设定对照组迁移、增殖能力为1，N—mye表达降低后SK—N—BE（2）细胞的迁移能力（0．85±0．06）和增殖能力（O．68±0．05）均显著下降，差异有统计学意义（P〈0．05）。伴随细胞的增殖和迁移能力下降，出现RACKl（对照组1．46±0．18VSN—mycRNAi组1．13±0．10）和磷酸化Src（Tye416）（对照组1．34±0．11VSN—mycRNAi组0．72±0．23）表达降低，磷酸化Akt表达增加（对照组0．55±0．12VSN—mycRNAi组0．84±0．15），差异有统计学意义（P％0．05）。磷酸化Src（Tye527），磷酸化ERKl／2、磷酸化p38的表达无显著变化，差异无统计学意义（P〉0．05）。结论在MYCN高扩增、高表达NB细胞株SK-N—BE（2）中N-myc表达下降可抑制肿瘤细胞增殖和迁移，其机制可能同RACKl、Src，Akt的表达或活化有关。

摘要：背景神经母细胞瘤(NB)是最常见的儿童颅外实体肿瘤,临床表现及预后差异较大。目的 探讨非高危NB患儿不同预后病理分型的临床特点和预后。设计回顾性队列研究。方法 回顾性纳入2007年3月至2020年12月首都医科大学附属北京儿童医院肿瘤内科病房收治的初诊非高危NB患儿,根据INPC分类系统分为预后良好(FH)组和预后不良(UH)组,分析不同预后病理分型的临床特点和预后。生存分析采用Kaplan-Meier方法。主要结局指标3年和5年总体生存率(OS)和无事件生存率(EFS)。结果 445例患儿纳入分析,FH组313例,<18月龄164例(52.4%),原发部位以纵隔最多见(52.7%),远处转移52例(16.6%);UH组132例,<18月龄25例(18.9%),原发部位以腹膜后最多见(49.2%),远处转移10例(7.6%)。两组年龄分布、原发瘤灶部位和远处转移发生率差异均有统计学意义,性别、瘤灶最大直径和LDH水平差异均无统计学意义。中位随访时间34(0.16~166)月。FH组和UH组3年EFS分别为96.4%和92%,5年EFS分别为95.4%和87.8%,差异均有统计学意义(χ^(2)分别为1.63和4.75,P分别为0.046和0.029)。FH组和UH组3年OS分别为98.3%和98.4%,5年OS分别为98%和98.4%,差异无统计学意义(χ^(2)分别为0.76和0.54,P分别为1.53和0.82)。结论 非高危NB患儿中,UH患儿较FH患儿发病年龄更大、原发瘤灶更多位于腹膜后、远处转移发生率更低。FH患儿较UH患儿有着更好的EFS,可考虑减轻化疗强度。

摘要：目的 探讨靶向CXCR4的小干扰RNA（siRNA）对人神经母细胞瘤QDDQNM细胞裸鼠肿瘤的生长及转移的抑制作用。方法采用本实验室已成功建立QDDQ-NM裸鼠荷瘤模型，以CXCR4为靶基因，设计合成siRNA序列及对照序列HK。通过瘤体局部多位点注射，将CXCR4-siRNA转染到裸鼠皮下荷瘤内。A组（阳性治疗组），B组（阴性治疗组），同时设立空载体对照组（C组）和空白对照组（D组）。观察肿瘤的转移及治疗前后体积变化，并用RT-PCR方法及免疫组化方法检测CXCR4的基因转录及蛋白表达情况，来评价CXCR4-siRNA对肿瘤的作用。结果A组转移率为25％明显小于其余3组对照组（75％，58％，75％），其肿瘤体积也显著低于其余3组，利用RTPCR检测CXCR4基因在转录水平的表达，A组为1．0451±0．0778，B、C、D组分别为1．4286±0．0655、1．3839±0．0037、1．3882±0．0733（P＜0．05），A组CXCR4蛋白表达水平也显著低于B、C、D组（P〈0．05）。结论脂质体介导的CXCR4-siRNA对神经母细胞瘤的生长及转移有明显抑制作用，可为下一步肿瘤治疗提供基础。

摘要：背景伴有MYCN基因扩增的神经母细胞瘤(NB)患儿的长期生存率不容乐观,目前国内相关大宗病例报道不多。目的总结伴有MYCN基因扩增的NB患儿的临床特征、治疗效果及预后相关因素。设计病例系列报告。方法纳入2007年2月1日至2020年1月30日首都医科大学附属北京儿童医院血液肿瘤中心确诊NB且经荧光原位杂交法确定伴有MYCN扩增的患儿,分析患儿瘤灶部位、大小、转移部位、肿瘤标记物、病理亚型、治疗情况及影响预后的相关因素。主要结局指标3年生存影响因素。结果纳入133例MYCN扩增的NB患儿,占同期收治总NB患儿的12.0%。男82例,女51例,中位发病年龄(35.7±9.8)个月;原发瘤灶位于腹膜后及肾上腺区129例(97.0%),位于后纵隔区域4例(3.0%);骨髓转移81例(60.9%),骨骼转移80例(60.2%),中枢转移24例(18.1%);99例(74.4%)血清LDH≥1500 U·L^(-1),126例(94.7%)神经元特异性烯醇化酶≥100 ng·mL^(-1);原发瘤灶最大直径≥10 cm者89例(66.9%)。3年OS和EFS分别为(19.7±3.5)%和(19.0±3.6)%。78例进展复发,在诱导、巩固、维持及停药后进展复发分别为8、20、46和4例,进展复发的部位以原发瘤灶、骨髓、中枢神经系统及骨骼最常见,中位首次进展时间为11.3月。伴有骨髓、骨转移、合并1p36缺失、年龄<18月及未行自体外周血造血干细胞移植患儿预后不良。结论伴有MYCN扩增的NB患儿原发瘤灶以腹膜后肾上腺区为主,早期远处转移率高,50%以上患儿在维持治疗期间肿瘤进展,3年OS仅为19.7%。伴有MYCN扩增的NB患儿迫切需要靶向治疗等新的治疗手段,以提高疗效,改善预后。

摘要：目的调查高强度综合治疗的神经母细胞瘤（NB）生存者的脏器功能、远期生存质量及第二肿瘤。方法选取1998年12月至2010年10月在上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心诊断并接受高强度综合治疗的NB患儿23例，在家长自愿的前提下，参考儿童肿瘤协作组（COG）的远期随访指南，制定本院的检查项目。并根据常见不良反应事件评价标准CTCAEv3．0进行分级。耳毒性分级根据专为铂类化疗药物设计的Brock和Chang标准分级。结果中位随访时间为96个月（65—170）个月。所有患儿表现出1个或多个不良反应。1～2级不良反应的发生率为100．0％，3～4级的发生率为17．4％（4／23例）。90．5％（19／21例）的患儿出现听力损害，均为双侧。52．4％（11／21例）的患儿出现牙根损害，包括过小牙、恒牙缺失、牙根发育不良、牙釉质钙化不良。9．5％（2／21例）的患儿出现脊柱侧弯。42．8％（9／21例）的患儿出现性腺或生长发育异常。47．4％（9／19例）的患儿出现肺功能异常。36．8％（7／19例）的患儿出现心脏功能损害。33．4％（7／21例）的患儿出现肾脏损害。23．8％（5／21例）的患儿出现肝功能损害。66．7％（14／21例）的患儿血浆皮质醇偏低，但促肾上腺皮质激素正常。所有患儿甲状腺功能均在正常范围内。3例患儿随访过程出现第二肿瘤，分别为白血病、恶性纤维瘤和肝脏肿瘤。结论对于接受过高强度综合治疗的NB患儿，远期不良反应发生率高，包括听力损害、牙齿损害、心肺功能损害、性腺功能损害、神经系统损害及第二肿瘤。需要建立长期随访的计划监测患儿的远期生活质量，并修正现行治疗方案，尽可能改善肿瘤患儿的远期生存质量。

摘要：神经母细胞瘤是儿童最常见的颅外实体瘤。近年来根据神经母细胞瘤表面特异性抗原GD2设计了相应的靶向药物抗GD2抗体。但抗GD2抗体因毒副作用大、国内用药经验较少、药物价格昂贵等原因在临床应用时受到限制。本文通过介绍抗GD2抗体的作用机制、疗效,针对不良反应的预处理用药和成本效益分析等以期为临床用药提供参考。抗GD2抗体能显著改善神经母细胞瘤患者的长期生存质量,通过预处理用药后能提升患者对抗GD2抗体的耐受性,但该药治疗成本较高,因此只有在其价格下降的情况下,才可能成为高危神经母细胞瘤患儿的成本效益治疗选择。

摘要：目的探究血清糖类抗原125(CA125)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)及24 h尿3-甲氧基-4羟基扁桃酸(VMA)在小儿神经母细胞瘤诊治中的应用价值。方法选取58例神经母细胞瘤患儿,采用电化学发光免疫分析法测定了患儿的血清CA125、NSE水平,采用高效液相色谱仪测定了患儿的24 h尿VMA水平。对不同临床分期、近期疗效神经母细胞瘤患儿的血清CA125、NSE及24 h尿VMA水平进行比较。结果 58例神经母细胞瘤患儿的血清CA125、NSE及24 h尿VMA阳性率分别为96.6%、81.0%、89.7%;临床分期为Ⅳ期的神经母细胞瘤患儿的血清CA125、NSE及24 h尿VMA水平均明显高于临床分期为Ⅱ～Ⅲ期的患儿(P﹤0.01);治疗有效组患儿的血清CA125、NSE及24 h尿VMA水平均明显低于治疗无效组(P﹤0.01)。结论血清CA125、NSE及24 h尿VMA水平可以在一定程度上评估小儿神经母细胞瘤患儿的病情和治疗效果。

摘要：目的 :探讨加温联合钙剂对诱导SK H SN细胞凋亡的作用及其意义。方法 :采用 3种温度和4种浓度的外源性氯化钙 (CaCl2 )诱导SK H SN细胞凋亡。采用形态学观察、原位缺口末端标记(TUNEL)的方法检测细胞凋亡的结果 ,并用火焰原子吸收分光光度法测定细胞内钙含量 ( [Ca]i)。结果 :加温和 /或加钙均可诱导SK H SN细胞凋亡。在有外源性钙剂存在时 ,加温可明显升高 [Ca]i。同一温度下 ,各组的凋亡率 (APO % )和 [Ca]i均随外源性CaCl2 浓度的升高而升高 ;同一CaCl2 浓度下 ,APO %和 [Ca]i均随温度的升高而升高。析因设计的方差分析结果显示 ,加温和加钙在诱导细胞凋亡时有很强的协同作用 ,P <0 0 1。APO %和 [Ca]i之间呈正相关 ,r =0 983,P <0 0 1。结论 :加温和加钙在诱导SK H SN细胞凋亡方面有很强的协同作用 ,APO %和 [Ca]i呈正相关 ,通过增加 [Ca2

摘要：目的以间变性淋巴瘤激酶(anaplastic lymphoma kinase,ALK)为靶点筛选儿童神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB)的靶向治疗药物。方法借助计算机辅助药物的虚拟筛选技术筛选靶向结合ALK的命中化合物,通过分子动力学模拟验证命中化合物与ALK的结合能力,通过CCK-8试验验证命中化合物对NB细胞的杀伤作用,通过Western blotting试验检测命中化合物对ALK的抑制作用。结果虚拟筛选和分子动力学模拟试验发现6种命中化合物中栎草亭能够和ALK形成稳定的受体-配体二元复合物。体外细胞实验表明栎草亭能抑制ALK表达,诱导NB细胞凋亡,并对NB细胞有杀伤作用。结论栎草亭可能是治疗NB的有效候选药物。

摘要：目的:观察扶正健脾方减轻Ⅲ、Ⅳ期儿童神经母细胞瘤化疗不良反应的临床效果。方法:采用前瞻性设计,将神经母细胞瘤患儿100例随机分为观察组和对照组各50例。对照组单纯采用化疗,观察组在化疗基础上口服扶正健脾方;3个月后评估相关情况。结果:观察组化疗不良反应(主要为骨髓抑制及消化道反应)低于对照组,化疗完成情况(包括住院天数、化疗延期天数)优于对照组,且化疗期间辅助用药情况(主要为应用粒细胞集落刺激因子及输注悬浮红细胞情况)优于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:扶正健脾方能降低Ⅲ、Ⅳ期神经母细胞瘤患儿化疗不良反应,减少化疗辅助用药,有助于化疗顺利完成。