摘要：背景：内皮祖细胞在缺血性疾病治疗应用中存在数量低的问题，许多细胞因子影响其动员效果和功能。目的：观察粒细胞集落刺激因子动员对体外扩增骨髓源性内皮祖细胞数量及功能的影响。设计、时间及地点：细胞学体外观察，于2007-08／2008—03在北京大学人民医院肝病研究所完成。材料：SPF级健康成年SD雄性大鼠16只，随机分为动员组和对照组，8只／组。重组人粒细胞集落刺激因子为麒麟鲲鹏生物药业有限公司产品。方法：实验前动员组大鼠皮下注射经生理盐水稀释的重组人粒细胞集落刺激因子10ug／kg，2次，d，共5d。采用密度梯度离心法分别从两组大鼠骨髓获取单个核细胞，洗涤后按2×10^7／孔接种在包被大鼠纤连蛋白的6孔板上，采用贴壁法纯化得到内皮祖细胞。主要观察指标：骨髓单个核细胞集落数及细胞表型，骨髓源性内皮祖细胞贴壁情况及细胞表型，通过DiI-acLDL摄取、体外血管生成进行内皮祖细胞功能学鉴定，透射电镜观察细胞超微结构。结果：与对照组比较，动员组骨髓单个核细胞集落增多，CD45^＋／CD34^＋、CD133^＋和Flk-1^＋阳性率均明显升高（F=5．655～61．892，P〈0．05）。培养第7，9天与对照组比较，动员组骨髓源性内皮祖细胞贴壁数、CD45^＋／CD34^＋、CD133^＋和Flk-1^＋阳性率均明显升高（F=5．694～38．879，P〈0．05）。贴壁细胞F1TC—UEA-1／Dil—acLDL双荧光染色阳性率为90％，接种于Matrigel包被的培养板24h后形成毛细血管索样结构，胞质内有Weibel—Palade小体存在。结论：粒细胞集落刺激因子动员能增加骨髓源性内皮祖细胞的数量，并促进其分化、增殖功能。

摘要：背景:骨髓干细胞动员以其无创伤、无免疫排斥反应,不需要干细胞提取、培养、扩增等工作倍受青睐。目的:观察联合应用粒细胞集落刺激因子和干细胞因子对大鼠急性心肌梗死的治疗作用。设计:随机对照观察。单位:锦州医学院药理教研室实验室。材料:选用32只成年雄性SD大鼠,体质量(200±20)g,购自锦州医学院实验动物中心。重组人粒细胞集落刺激因子(北京双鹭制药),重组人干细胞因子(成都地奥有限公司)。方法:实验于2005-07/11在锦州医学院药理教研室实验室进行。①5mg/kg盐酸异丙基肾上腺素左下腹腔注射复制急性心肌梗死模型,3h后将大鼠随机分为4组,每组8只。综合治疗组:用生理盐水稀释浓度至10mg/L的重组人粒细胞集落刺激因子1mL/kg和重组人干细胞因子1mL/kg皮下注射,连续5d。粒细胞集落刺激因子组:单用生理盐水稀释浓度至10mg/L的rhG-CSF1mL/kg皮下注射,每只大鼠和综合治疗组大鼠注射药品差量用生理盐水(1mL/kg)补足,连续5d。干细胞因子组:单用生理盐水稀释浓度至10mg/L的人干细胞因子1mL/kg皮下注射,每只大鼠和综合治疗组大鼠注射药品差量用生理盐水(1mL/kg)补足,连续5d。对照组:单用生理盐水(2mL/kg)皮下注射。②分别于造模后第14d和28d,摸球法从每组大鼠中抽取4只麻醉,自左心室心尖部插入内充肝素钠的塑料管至左心腔,用Medlab-u18c生物信号采集处理系统描记左心室峰压,左心室舒张末压,左室内压最大上升/下降速度,并同步记录心率。拔出气管插管,立即剪掉心脏,剪掉心房及右心室,微量天平称重,计算左心室质量/体质量,评估心肌重塑情况,将组织块切片,光镜下观测大鼠心肌病理形态及梗死面积。采用细胞图像分析仪病理图文分析每组大鼠心肌梗死面积。主要观察指标:各组大鼠左心功能指标、心肌梗死面积、心率和心室重塑情况及大鼠心肌病理形态。结果:纳入大鼠32只全部进入结果分析,无脱落。①大鼠左心功能指标比较结果:综合治疗组大鼠造模14,28d后左心室收缩压、左心室舒张末压、左心室内压最大上升/下降速度高于其他3组,造模28d时上述各指标均高于14d,差异有统计学意义(P<0.05),粒细胞集落刺激因子组两时间点上述指标均大于干细胞因子组及对照组(P<0.05)。②大鼠两时间点心肌梗死面积、心率和心室重塑情况:综合治疗组大鼠造模14,28d后心肌梗死面积及左心室重量小于其他3组,造模后28d心肌梗死面积小于14d(P<0.05),粒细胞集落刺激因子组两时间点上述指标均小于干细胞因子组与对照组。③大鼠心肌病理形态改变:造模后14及28d,综合治疗组和粒细胞集落刺激因子组均未见明显心肌瘢痕组织,有新生毛细血管生长,粒细胞集落刺激因子组毛细血管密度小于综合治疗组,均有成纤维细胞浸润。干细胞因子组和对照组可见瘢痕组织呈散在的灶性分布,有成堆或散在分布的淋巴细胞,其核小、深染、胞浆少,细胞间胞浆融合,新生肉芽组织增生不明显。结论:粒细胞集落刺激因子和干细胞因子合用对急性心肌梗死大鼠缺血损伤心肌的保护和再生作用优于单用,可改善急性心肌梗死大鼠的心室功能。

摘要：目的:系统评价粒细胞集落刺激因子(G-CSF)动员干细胞治疗急性心肌梗死(AMI)的安全性及疗效。方法:检索至2014年Medline、Cochrane library、知网及万方数据库中随机对照试验,采用revman5.3软件进行统计分析。结果:检索到12个随机对照研究(CRT),622例AMI受试者纳入研究。G-CSF组相对于安慰剂组(对照组),全因死亡率差异无统计学意义(RR 1.18,95%CI 0.44~3.20,P=0.75),心血管发病率(临床复合终点)差异无统计学意义(RR 0.92,95%CI 0.63~1.36,P=0.68)。G-CSF治疗不增加左室射血分数(RR 1.55,95%CI-1.85~4.95,P=0.37),也不改善收缩末容积(RR-5.55,95%CI-11.50~0.40,P=0.07),但可改善舒张末容积(RR-5.26,95%CI-9.55^-0.96,P=0.02)。结论 :G-CSF动员干细胞治疗AMI是相对安全的,可减小舒张末期容积,但临床使用尚需谨慎,需设计更大样本CRT予以证实。

摘要：化疗是治疗恶性肿瘤的一种重要方法,但化疗可引起多种不良反应,其中包括中性粒细胞减少并继发感染。本文简要介绍长效粒细胞集落刺激因子预防化疗后感染临床研究设计的考虑要点,旨在为此类新药的研发提供参考。

摘要：目的分析国内采用粒细胞集落刺激因子(G-CSF)辅助治疗小儿急性白血病的疗效和安全性。方法电子检索生物医学文献数据库、维普期刊网和中文学术期刊全文数据库、手工检索近期与G-CSF治疗急性白血病相关的6种中文杂志,其中观察组为G-CSF+常规化疗、对照组为常规化疗,对化疗后中性粒细胞绝对值(ANA)、WBC恢复正常时间及治疗后ANA、WBC水平变化、感染情况进行Meta分析。结果共收集8个随机对照研究,Meta分析显示观察组化疗后ANA和WBC恢复正常时间均显著短于对照组,ANA和WBC水平均显著高于对照组,感染发生率均显著低于对照组,P均<0.01。结论 G-CSF辅助治疗小儿急性白血病有效、安全,但仍需要随机设计更完善、方法学质量更高、随访期更长的对照试验验证。

摘要：目的:对比反复种植失败(RIF)患者采用生长激素(GH)与粒细胞集落刺激因子(G-CSF)两种药物分别宫腔灌注后对子宫内膜容受性及冻融胚胎移植结局的影响。方法:采用对照研究的设计,选择2019年9月至2021年1月在昆明医科大学第二附属医院生殖医学科行冷冻胚胎移植的RIF患者118例,随机分为3组,GH组(n=40)接受人重组GH宫腔灌注治疗,G-CSF组(n=39)接受重组人G-CSF宫腔灌注治疗,空白对照组(n=39)不接受治疗。比较3组子宫内膜容受性及冻融胚胎移植结局。结果:3组患者妊娠结局对比分析后发现,仅胚胎种植率在GH组与对照组之间差异有统计学意义(P<0.05)。另外,GH组的子宫内膜血流参数的搏动指数(PI)、收缩期峰值流速/舒张期流速(S/D)两个值在内膜转化日低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);G-CSF组的蠕动波幅度较另外两组减小,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:用GH宫腔灌注提高了RIF的胚胎种植率;GH宫腔灌注可能通过降低子宫内膜血流的PI、S/D改善RIF患者内膜的血流灌注;G-CSF宫腔灌注使RIF患者的子宫内膜蠕动波幅度显著减小。

摘要：外周血造血干细胞是异基因造血干细胞移植最常用的移植物来源,足量的CD34^(+)细胞是移植后造血功能重建的关键,目前普遍认为移植需要的最低CD34^(+)细胞数为2×10^(6)/kg理想CD34^(+)细胞数为5×10^(6)/kg。传统动员剂粒细胞集落刺激因子(G-CSF)广泛应用于健康供者造血干细胞动员,但仍有部分供者采集不到移植所需的最低CD34^(+)细胞数。普乐沙福是一种强效造血干细胞动员剂,目前有研究报道健康供者联合应用普乐沙福可提高CD34^(+)细胞的采集效率。本研究回顾性分析了G-CSF动员不佳的健康供者使用普乐沙福的疗效与安全性,报道如下。

摘要：背景:课题组在前期研究中发现银屑病患者骨髓造血细胞活性存在异常。目的:观察银屑病患者骨髓基质细胞分泌干细胞因子和粒细胞集落刺激因子的水平。设计、时间及地点:病例-对照观察,于2007-10/2008-08在太原市中心医院皮肤科实验室完成。对象:选择太原市中心医院皮肤科临床及病理确诊为寻常型银屑病的门诊患者24例,男16例,女8例;年龄16～59岁;另取血液科骨穿后经筛选的正常骨髓20例作为对照组,性别、年龄与银屑病患者匹配。方法:采用密度梯度离心法分离银屑病患者与对照组骨髓单一核细胞,通过贴壁法培养骨髓基质细胞,收集传了3代后又培养72h的骨髓基质细胞及培养上清。主要观察指标:流式细胞仪检测细胞表面标志并用ELISA法检测上清液中干细胞因子和粒细胞集落刺激因子的水平。结果:流式细胞仪检测结果显示,90%以上细胞表面抗原高表达CD29,而CD34、CD45及HLA-DR表达阴性,即骨髓基质细胞纯度在90%以上。银屑病组骨髓基质细胞培养上清液的干细胞因子和粒细胞集落刺激因子表达均显著高于对照组(P<0.01)。结论:银屑病患者骨髓基质细胞分泌干细胞因子和粒细胞集落刺激因子存在异常,提示银屑病患者骨髓造血微环境发生了改变。

摘要：根据人天然粒细胞集落刺激因子 (G -CSF)基因序列设计出引物 ,通过RT -PCR从人外周血单个核细胞mRNA获得G -CSFcDNA片段 .将该片段与原核表达载体 pT 7构建成重组体 ,导入大肠杆菌后发现天然G -CSFcD NA表达量并不理想 .这可能是由于天然hG -CSF 5’端G +C的比例过高 ,使转录后的mRNA很容易形成二级结构而影响翻译起始 ,因此在大肠杆菌中很难获得高效表达 .根据密码子简并性原则 ,在不改变编码氨基酸顺序的前提下 ,通过重新设计PCR引物 ,将hG -CSF的前 3个氨基酸密码子中的几个GC碱基作了改动 ,获得了新的cDNA突变体 ,将其与pT 7的重组体导入大肠杆菌 。

摘要：背景：骨髓中存在多潜能干细胞,利用其多向分化和归巢的能力,已成为近年来多种疾病治疗的研究方向。目的：观察重组人粒细胞集落刺激因子动员急性心肌梗死大鼠骨髓干细胞归巢于缺血心肌的高度选择性,并评价其短期安全性。设计、时间及地点：随机对照动物实验,于2006-09/2007-04在吉林大学基础医学院病理生理实验室完成。材料：选取清洁级SD大鼠82只,雌雄各半,体质量250-300g,62只大鼠结扎冠状动脉前降支制成急性心肌梗死模型,20只作为假手术组。方法：造模成功41只,分为模型组（n=20）和动员组（n=21）。模型组：皮下注射生理盐水2mL/d,连续7d;动员组：皮下注射生理盐水稀释至浓度2.5mg/L重组人粒细胞集落刺激因子15μg/（kg·d）,连续7d。假手术组：在相应冠状动脉结扎部位穿线,不结扎,其余操作步骤相同,皮下注射生理盐水2mL/d,连续7d。主要观察指标：1周后计数3组大鼠外周血白细胞及单个核细胞百分比,4周后比较3组大鼠在体心功能。并取大鼠心脏、肺脏、肝脏、骨骼肌组织制切片行苏木精-伊红染色及CD34免疫组织化学染色观察心脏组织病理改变,毛细血管密度和CD34＋细胞归巢情况。结果：①造模1周后动员组大鼠的外周血白细胞及单个核细胞百分比较动员前明显增加（P〈0.05）,且动员组大鼠的外周血白细胞计数及微核细胞率明显高于模型组（P〈0.05）。②造模1周时,动员组较模型组大鼠心肌梗死区可见较多CD34＋细胞（P〈0.05）;4周时,动员组和模型组均未见CD34＋细胞。各组大鼠肝脏、肺脏及骨骼肌各个时段则均无明显差异。造模后4周,动员组心功能各项指标均优于模型组（P〈0.05）,梗死面积明显小于模型组（P〈0.05）,毛细血管密度明显高于模型组（P〈0.05）。结论：重组人粒细胞集落刺激因子动员心肌梗死后大鼠自体骨髓干细胞到外周血循环并归巢于梗死心肌,并可分化成心肌样细胞及毛细血管内皮细胞,减少心肌梗死范围,改善心功能。短期观察重组人粒细胞集落刺激因子对肺脏、肝脏、骨骼肌无明显组织学影响。