摘要：2011年,对软鳍新光唇鱼(Neolissochilus benasi)进行了精子超低温冷冻保存研究。以解冻后的精子活力为指标,采用稀释液D-15,设计不同的抗冻剂种类和浓度,以及不同的实验条件(包括冷冻体积、4℃平衡时间和解冻温度等)探索软鳍新光唇鱼精子的超低温冷冻保存方法。筛选出了适合软鳍新光唇鱼精子超低温冷冻保存的两种抗冻保护剂及其浓度分别为10%MeOH和15%EG,确定了精液与稀释液的最适稀释比例为1:7、4℃平衡时间区间为10～60min、冷冻体积为60μL,以及复苏方法为37℃水浴快速解冻30s。当鲜精活力为(62.33±2.05)%,综合以上最佳实验条件进行保存,解冻后精子的最高活力为(29.67±0.47)%,但效果不理想,不能达到广泛生产运用水平;产生这一结果,可能与异地保育物种的饲养管理有关。因此,在亲鱼培育管理中要最大限度地降低捕获诱发的压力,尽量提供适合的养殖条件。在珍稀鱼类异地保育时,繁殖用雄鱼的培育与雌鱼同等重要,是获得大量高质量仔鱼的关键。

摘要：1教材分析专题3胚胎工程包括“体内受精和早期胚胎发育”、“体外受精和早期胚胎培养”、“胚胎工程的应用及前景”3节。“体内受精和早期胚胎发育”这部分内容是胚胎工程的理论基础，也是学习本专题的钥匙。它包括3部分的内容：精子和卵子的发生、受精、胚胎发育。把它分为2个课时完成教学，即精子和卵子的发生1课时，受精和胚胎发育1课时。

摘要：为了研究铅和乙醇的联合作用对大鼠精子的影响,选取健康雄性Wistar大白鼠54只,体重(207±17)g,采用2×3析因设计方法随机分为9组,每组6只,A～H组分别给予醋酸铅11m g/kgBW 和醋酸铅22m g/kgBW、乙醇0.9g/kgBW、乙醇1.8g/kgBW、醋酸铅11m g/kgBW+ 乙醇0.9g/kgBW、醋酸铅11m g/kgBW+ 乙醇1.8g/kgBW、醋酸铅22m g/kgBW+ 乙醇0.9g/kgBW、醋酸铅22m g/kgBW+ 乙醇1.8g/kgBW,对照组给等量蒸馏水。每天1次,每周5次灌胃,连续4周,染毒期满断头处死,取附睾尾做精子分析。与各单独染毒组比较,联合染毒组的精子计数和精子活动率显著降低,精子畸变率、附睾/体重比和血铅水平显著增高(P< 0.01,P< 0.05),析因分析表明铅和乙醇有交互作用(P< 0.05), 即铅和乙醇联合呈现增毒作用;逐步回归分析血铅与精子畸变率呈正相关,与精子活动率呈负相关。结果提示铅和乙醇对雄性大鼠的精子质量有联合增毒作用,严重影响精液质量,损害雄性生殖功能。其损伤机制可能与联合染毒后乙醇促进了铅的吸收或释放致血铅增高。

摘要：研究雄性哺乳动物生殖细胞的增殖、分化、成熟机制以及对以上过程造成影响的诸多因素,为雄性不育症的治疗提供理论依据和潜在的治疗方法,研究人员不断尝试将各种种子细胞诱导为精子。体外诱导精子的实验由于具有可进行连续观察、排除了受体动物的个体差异影响、便于设计单因素实验等优点,近年来取得了许多突破性进展,精原干细胞(spermatagonial stem cell,SSC)、胚胎干细胞(embryonic stem cell,ESC)、诱导性多能干细胞(induced pluripotent stem cell,iPS)、间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)等都在体外被成功诱导为精子。就目前的哺乳动物精子体外诱导进展做一综述。

摘要：目的：构建穿膜肽TAT与EGFP融合蛋白的原核表达系统，研究该融合蛋白对人成熟精子的穿膜作用和对精子运动参数的影响。方法以pEGFP-N1载体为模板，设计N端和C端含有TAT序列的引物，用PCR技术扩增TAT-EGFP和EGFP-TAT基因，扩增产物插入载体 pET28a，构建成重组质粒pET28a-TAT-EGFP和pET28a-EGFP-TAT。将重组质粒转入大肠杆菌DE3中，IPTG诱导TAT-EGFP和EGFP-TAT融合蛋白表达。表达产物经Ni-NTA亲和层析柱纯化后SDS-PAGE电泳鉴定。将融合蛋白TAT-EGFP和EGFP-TAT分别加入正常人精子中孵育，荧光显微镜观察融合蛋白TAT-EGFP和EGFP-TAT穿膜情况。结果成功构建了高表达重组质粒pET28a-TAT-EGFP和pET28a-EGFP-TAT，纯化了分子质量约为32 kD的融合蛋白 TAT-EGFP和EGFP-TAT。融合蛋白TAT-EGFP和EGFP-TAT在正常人成熟精子中有穿膜作用。不同浓度的融合蛋白TAT-EGFP和EGFP-TAT对正常人成熟精子存活率及运动参数无明显影响。结论通过对融合蛋白TAT-EGFP和EGFP-TAT表达纯化及活性分析，证实穿膜肽TAT在精子中的跨膜转运作用，为将来精子研究提供了实验基础。

摘要：目的　研制以精子 睾丸特异性抗原为基础的多价嵌合肽避孕疫苗。方法　选择小鼠精子 睾丸特异性抗原Sp17、Cy ritestin作为对象 ,采用分子设计的方法与外源性牛核糖核酸酶非选择性T细胞表位组合合成新型嵌合肽 3 5肽 ,并对其免疫效应进行研究。结果　该嵌合肽可刺激小鼠产生较高效价的血清和阴道粘膜特异性抗体 ,诱导脾脏淋巴细胞增殖 ,促进细胞因子IL 4的分泌 ;将其与佛氏佐剂混悬 ,免疫雌性BALB c小鼠可明显降低受孕率和每胎产仔率 ,其抗血清可显著抑制体外精 卵结合和融合。结论　新型嵌合肽具有较明确的抗生育作用 ,提示以分子设计、蛋白质优化方案进行多价避孕疫苗的研究是可行的。

摘要：目的 :开发可供两性使用的多价合成嵌合肽疫苗。方法 :选择小鼠精子 /睾丸特异性抗原 SP1 7、Cyritestin中特异性氨基酸序列与牛核糖核酸酶非限制性 T细胞表位作为骨架 ,按一定连接方式设计、合成新抗原 3 5肽 ,并与等量弗氏佐剂混悬后免疫雌性 BALB/c小鼠。结果 :在 43 0 A固相自动肽合成仪上成功地合成了 3 5肽 ,并经 HPLC纯化、质谱鉴定证实其纯度达 95 %以上 ;新抗原免疫小鼠后获得的特异性抗血清可识别小鼠、大鼠及人睾丸组织蛋白提取物中相应分子量的蛋白质 ,且血清中特异性 Ig G抗体滴度最高达 1∶ 6 0 0 0 ,阴道粘膜冲洗液中特异性 Ig A抗体滴度最高达 1∶ 3 0 0。结论 :由含有两种特异性精子抗原、具有特异性氨基酸序列的新抗原所制备的抗血清可识别两种天然抗原 ,并在小鼠体内激发出较理想的特异性体液免疫 。

摘要：本文应用正交设计L16(44),优化精子和外源DNA处理条件;用建立的方法转染1-4岁川东白山羊和波南F1公羊、2岁波尔山羊和南江黄羊公羊共149只,用原位杂交法检测精子结合外源DNA的效率,比较不同品种、年龄的山羊(Capra hircus)精子结合外源DNA的能力。结果显示川东白山羊1岁时的阳性精子率为39.34%±13.76%,4岁时降为23.40%±19.37%,与1岁和2岁时相比,差异显著;南江黄羊的阳性精子率最高,波尔山羊最低;并筛选到一种山羊精子和外源DNA处理方法。表明实验山羊的精子结合外源DNA的能力有随着年龄的增长而减少的趋势,并表现出品种间差异。

摘要：采用照射强度为10188μW(/cm2·s),照射距离为15cm的紫外线对施氏鲟(Acipenser schrenckii)精子进行4-7min的照射,用照射后的精子对匙吻鲟(Polyodon spathula)卵进行人工授精,以探索精子的最佳紫外线照射时间。设计热休克起始时间、持续时间和休克温度3因子、3水平的正交试验,以探索人工诱导匙吻鲟雌核发育的理想热休克条件。结果表明:用紫外线照射5min处理的施氏鲟精子,与匙吻鲟卵受精所得胚胎经染色体观察均为单倍体(n=60),表明照射精子遗传失活的有效性和可靠性;若热休克处理前受精卵保持在(18±0.3)℃,在一定的休克温度(35-39℃)条件下,于不同时间(受精后16-20min)起始热休克,持续处理2min均能诱导受精卵染色体加倍。对热休克处理条件的优化结果表明,将受精卵于受精后18min,在37℃的水中热休克处理2min,二倍体诱导率最高,达18.8%。染色体鉴定显示,该条件下处理的胚胎均为二倍体(2n=120),未发现单倍体和非整倍体。本研究为进一步分析异源精子诱导匙吻鲟雌核发育机制以及匙吻鲟性别决定的分子机制奠定了基础。

摘要：将科研成果转化为实验教学项目形成创新实验教学的实验体系。整个实验体系稳定、安全,具有创新性、针对性、实用性和可操作性,且系统性和综合性强。实践证明适合于本科生基础实验教学。对培养学生的科学意识和创新精神,提高学生综合运用知识,分析问题解决问题的能力发挥了十分重要的作用。