摘要：利用半导体工艺技术构建了一种基于硅基过滤片的精子优选微流控芯片,具有高活力的精子会克服重力,在微孔的引导下游向精子收集池。分别在7,15,30,60 min对收集池中的精子取样,采用计算机辅助精子分析(CASA)系统进行精液常规检测、精子形态学和DNA碎片分析;对硅基过滤片的孔间距和筛选时间进行了优化。结果表明:6μm孔间距和15 min筛选时间为最佳的精子优选方案。所构建的基于硅基过滤片的精子优选芯片,可以有效优选出具有高活力且DNA完整性和形态正常率较高的精子。芯片精液吞吐量大,活动精子回收率较高,有一定的临床价值,同时提供了一种简单易操作的标准化精子优选流程。

摘要：由于传统辅助生殖技术(ART)成功率低,人们在不断追求探索新的技术。大量研究表明微流控技术具有革新传统体外受精(IVF)操作流程的潜能。与传统方法相比,微流控技术应用于精子优选及体外受精具有效率高、时间短、无离心损伤、实时观察筛选效果、微环境相似及自动化等显著优点,为ART提供了新平台。笔者综述了近年来微流控技术在精子活力评价与筛选、精子化学趋向性筛选、体外受精、精子浓度检测、精子分离富集等方面的应用。同时,本文简要讨论了微流控平台原理﹑结构设计及操作流程,聚焦各种方法的优缺点以及临床应用的可能性。可见微流控技术应用于ART仍有一些问题亟待解决,有理由相信其未来发展方向是通过制作高度集成化的平台即体外受精-芯片实验室(IVF-lab-on-a-chip)来实现。

摘要：目的:探讨微流控芯片技术对精子的优选能力。方法:自行设计和制造微流控芯片,利用芯片对40例人精液标本进行精子分选实验,优化其分选条件,观察芯片处理前后精液各参数变化。同时对其中30例精液标本(A组:a+b级精子0.05)。结论:微流控芯片技术在优选精子中具有较高的分选效率,且具有操作简单、分选时间短,对精子损伤小的特点,在辅助生殖技术中特别是体外受精中将有良好的应用前景。

摘要：目的寻找体外受精(in vitro fertilization,IVF)过程中合适的精液处理方法。方法本研究采用前瞻性随机对照双盲设计,选取300例因女性因素且男性生育力检查未见异常行IVF-胚胎移植(embryo transfer,ET)助孕的不孕夫妇为研究对象,纳入的患者通过计算机产生随机数进行随机化分组,分为浮游组(新型无损伤精子筛选技术,FY组,n=100)、密度梯度组(DG组,n=100)和上游组(SU组,n=100)。收集三组患者受精后剩余的精子观察精子超微结构,并比较三组优选后精子DNA碎片指数(DNA fragment index,DFI)及IVF-ET治疗过程中的受精率、卵裂率、优质胚胎率及妊娠率等指标之间的差异。结果FY组精子DFI显著低于DG组和SU组(3.22%±2.73%比8.31%±2.14%比6.43%±2.56%),差异有统计学意义(P=0.02),FY组的精子头、尾部质膜完整率明显高于其他两组(92.0%±24.2%比80.2%±29.5%比73.2%±30.1%和93.9%±1.2%比80.1%±1.1%比74.9%±1.2%),差异具有统计学意义(P=0.01,P=0.03)。FY组的优质胚胎率、囊胚形成率明显高于DG组和SU组[44.14%(452/1024)比32.30%(292/904)比32.46%(296/912)和54.40%(396/728)比43.52%(302/694)比46.34%(330/712)],差异均具有统计学意义(P均<0.001)。新鲜周期FY组的妊娠率和植入率明显高于DG组和SU组[57.14%(24/42)比33.33%(16/48)比35.56%(16/45)和50.00%(30/60)比27.45%(14/51)比28.26%(13/46)],差异具有统计学意义(P=0.04,P=0.02)。复苏周期FY组的妊娠率和植入率明显高于DG组和SU组[52.38%(22/42)比31.25%(10/32)比37.14%(13/35)和52.38%(22/42)比29.41%(10/34)比30.56%(11/36)],差异具有统计学意义(P=0.03,P=0.02)。结论浮游法可减少对精子造成的物理损伤,提高精子质膜的完整率,降低精子DFI,改善辅助生殖技术结局。

摘要：目的对精子分选用微流控芯片的微通道入口角度和分选通道宽度进行优化，探索最优分选效率的微流控芯片结构，以期获得最高的精子分选效率。方法利用自行设计和制造三种不同通道入口角度（30°、45°和60°）和三种不同分选通道宽度（120μm、180μm和250μm）的聚二甲基硅氧烷（Polydimethylsiloxane，PDMS）微流控芯片对30份健康体检者精液标本进行精子分选实验，选择出最合适的分选芯片。采用具有最佳分选效率的微流控芯片和上游法分选比较。对40例男性不育患者精液标本进行精子优选，从精子质量常规参数及DNA结构完整性两个方面评价两种精液体外处理方法对精子质量的影响。结果不同通道入口角度和不同通道宽度的微流控芯片对40份精液标本进行优选后，精子活力和正常形态精子百分率均可见显著提高，差异均具统计学意义（P〈0．01）。三种不同通道入口角度和三种不同通道宽度的芯片在精子活力和正常形态率的分选上比较，差异均无统计学意义（P〉0．05），但分选回收效率入口角度30。的芯片显著优于45。和60。的芯片（P〈0．01），通道宽度250μm的芯片显著优于120μm和180μm的芯片（P〈0．01）。精液经微流控芯片法和上游法处理后，在精子质量常规参数方面，微流控芯片法明显优于上游法，差异具有统计学意义（P〈0．01）：在DNA链完整性方面，两种方法处理后，微流控芯片法精子的DNA损伤率明显低于上游法，差异具有统计学意义（P〈0．01）。结论PDMS微流控芯片其入口角为30°、分选通道宽度为250μm时，其分选效率最高。微流控芯片优选法是一种比传统精子分选方法更高效率、DNA损伤更少、操作简便的方法，可以预见，在辅助生殖技术中特别是体外受精和卵细胞胞浆内单精子注射中具有良好的应用前景。

摘要：目的:研究微流控芯片精子优选技术对精子常规参数及DNA完整性的影响。方法:自行设计制作微流控芯片,利用芯片处理技术和上游法对40例精液标本进行精子优选,通过计算机辅助精液分析系统及染色质扩散试验从精子常规参数及DNA完整性两个方面评价精液体外处理对精子的影响。结果:精液经微流控芯片法和上游法处理后,精子活力、精子正常形态率以及精子尾部肿胀率均有显著提高(P<0.01),精子的DNA损伤率明显降低(P<0.01)。微流控芯片法与上游法相比,优选后前者精子DNA损伤率明显低于后者[(8.4±5.8)%vs(16.4±9.2)%,P<0.01],而其他参数差异无显著性。结论:微流控芯片技术在精子优选中能获得精子DNA损伤程度小的高质量精子。