摘要：目的:通过分析白花鬼针草不同组织中候选糖基转移酶基因的表达规律,初步筛选可能参与聚多炔糖苷生物合成途径的糖基转移酶,为白花鬼针草的糖基转移酶基因的研究提供数据支持。方法:本研究利用白花鬼针草转录组数据库中的DN19630等19个候选糖基转移酶基因的DNA序列,设计特异性引物。通过qRT-PCR技术检测候选糖基转移酶基因在白花鬼针草叶、茎、果、花、根中相对表达量。结果:通过对DN19630等19个候选糖基转移酶基因PCR产物扩增情况、扩增曲线图、熔解曲线图及相对表达量进行综合分析,发现DN19630、DN18211、DN12914、DN6852、DN5000g2、DN38310、DN14409g1、DN5293、DN34556、DN14409g2、DN15831这11个候选糖基转移酶基因在叶中表达量相对较高,在根中表达量最低;而DN3608在茎中表达量最高,根中表达量较低;DN21732、DN14031在花中表达量较高,在根中表达量最低。结论:DN19630等14个糖基转移酶可能参与聚多炔糖苷类化合物的生物合成。Objective: By analyzing the expression patterns of candidate glycosyltransferase genes in different tissues of Bidens pilosa var. radiata, we initially screened the glycosyltransferases that may be involved in the biosynthetic pathway of polyacetylene glycosides, providing data support for the study of glycosyltransferase genes in B. pilosa var. radiata. Methods: This study used the DNA sequences of 19 candidate glycosyltransferase genes such as DN19630 from the transcriptome database of B. pilosa var. radiata to design specific primers. The relative expression levels of the selected glycosyltransferase genes in the leaves, stems, fruits, flowers, and roots of B. pilosa var. radiata were determined through qRT-PCR technology. Results: Through comprehensive analysis of the PCR product amplification status, amplification curves, melting curves, and relative expression levels of 19 candidate glycosyltransferase genes including DN19630, it was found that the expression levels of 11 candidate glycosyltransferase genes, namely DN19630, DN18211, DN12914, DN6852, DN5000g2, DN38310, DN14409g1, DN5293, DN34556, DN14409g2, and DN15831, were relatively high in leaves and lowest in roots. In contrast, DN3608 exhibited the highest expression level in stems and a lower expression level in roots. Additionally, DN21732 and DN14031 showed higher expression levels in flowers and the lowest expression levels in roots. Conclusion: A total of 14 glycosyltransferases, including DN19630, are potentially involved in the biosynthesis of p

摘要：目的克隆北柴胡Bupleurum chinense中可能参与柴胡皂苷生物合成的糖基转移酶基因BcUGT8,构建其原核表达载体,为通过体外表达和纯化蛋白的催化活性,分析验证其功能奠定基础。方法在Roche(454)GS FLX系统高通量测序已获得部分cDNA序列基础上,通过cDNA末端快速扩增技术(RACE)和长距离PCR扩增方法(LD-PCR)克隆全长cDNA。设计含有酶切位点的PCR引物,PCR扩增其开放阅读框(ORF),酶切后,插入到pET-28a(+)载体中,构建出原核表达载体。结果扩增到北柴胡1个糖基转移酶(UGT)基因全长cDNA,构建了这一基因的原核表达载体。结论通过BcUGT8基因的全长cDNA克隆、序列分析和原核表达载体的构建,为后续开展体外酶蛋白表达、纯化和催化活性分析实验,验证其生物功能奠定了基础。

摘要：利用与植物次生代谢产物糖基化相关的UDPG糖基转移酶的特征性保守区域 ,设计了同源简并引物 ,以甜菊基因组DNA为模板 ,PCR扩增获得甜菊糖基转移酶基因片段 .根据获得的基因片段设计引物GSTr和GSTf,分别与cDNA文库的T3 和T7通用引物扩增获得全长核苷酸序列的甜菊糖基转移酶基因 ,定名为sudpt 2 ,该基因全长 16 6 2bp ,包括poly(A)和一个 136 2bp的开放阅读框 ,编码 45 4个氨基酸 .与常见的糖基转移酶基因的相似性达 44 %～ 77% ,且具有UDPG糖基转移酶的特征性保守序列 .分子发育进化分析表明 。

摘要：产黑普雷沃氏菌(Prevotella melaninogenica)属革兰阴性专性厌氧菌,是引起牙周疾病的病原之一。为了研究牙周炎患者产黑普雷沃氏菌是否存在及其分子特征,用棉签刮取患者口腔,沸水-液氮法破碎细胞,同时设计产黑普雷沃氏菌糖基转移酶基因的1对引物,利用常规PCR方法扩增产黑普雷沃氏菌糖基转移酶基因。经NCBI序列相似性比对,发现该患者感染的产黑普雷沃氏菌糖基转移酶基因核苷酸序列与*** ATCC 25845菌株的糖基转移酶基因(Gen Bank accession ***002122)同源性最高,达92%;其编码的糖基转移酶部分氨基酸序列与***菌株的甘露糖糖基转移酶(Gen Bank accession ***_013264679)同源性最高,达98%。以糖基转移酶部分氨基酸序列构建系统进化树,结果表明,本试验获得的产黑普雷沃氏菌与其它报道的***菌株同源性最高,属于同一组(group)。

摘要：以梭梭叶片为材料,根据其他植物糖基转移酶基因的保守序列设计引物,采用同源基因克隆及RACE-PCR方法克隆到2个同源的序列,分别命名为HaUGT1和HaUGT2。基因测序结果显示,HaUGT1基因编码区长1 485bp,编码495个氨基酸;HaUGT2基因编码区长1 185bp,编码394个氨基酸。HaUGT1和HaUGT2蛋白具有保守的PSPG基序、UDP-葡萄糖基转移酶结构域,与其他植物中的糖基转移酶蛋白同源性较高。

摘要：目的从广金钱草中克隆得到一个糖基转移酶基因GsUGT9,并进行生物信息学分析。方法基于广金钱草的转录组数据,设计特异性引物从广金钱草cDNA中扩增出一个候选糖基转移酶基因,通过生物信息学软件分析其序列信息。结果成功克隆得到广金钱草糖基转移酶基因GsUGT9,全长1509 bp,编码的蛋白由502个氨基酸组成。结论成功从广金钱草中克隆一个糖基转移酶基因GsUGT9,为后续对其进行功能验证研究奠定了基础。