摘要：目的通过建立多重反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法,旨在测定大鼠心肌成纤维细胞组织金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)、组织金属蛋白酶抑制剂-2(TIMP-2)的mRNA水平。方法采用胶原酶-胰蛋白酶消化法培养成年雌性SD大鼠的心肌成纤维细胞,提取细胞总RNA并进行反转录反应。自行设计大鼠TIMP-1,TIMP-2和内参照GAPDH的PCR引物序列,进行多重PCR反应,PCR产物经20g/L琼脂糖凝胶电泳分析目的基因片段。结果20g/L琼脂糖凝胶电泳在同一条泳道显示TIMP-1,TIMP-2和GAPDH3条目的DNA条带,表明成功地同时扩增了TIMP-1,TIMP-2和GAPDH基因。结论采用多重RT-PCR方法,测定了大鼠心肌成纤维细胞TIMP-1,TIMP-2mRNA水平,此方法为研究高血压病心肌纤维化提供了可靠手段。

摘要：目的探讨尿液组织金属蛋白酶抑制剂-2/人胰岛素样生长因子结合蛋白-7(TIMP-2/IG-FBP-7)对心脏术后患者早期急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)的预测价值.方法采用前瞻性研究设计,选取体外循环辅助下心脏手术患者,记录其一般情况,并分别在手术前和术后第3、24小时留取静脉血及尿液标本,进行血清肌酐检测,尿TIMP-2、IGFBP-7.根据术后24 h内是否发生AKI分为AKI组和非AKI组,将观察指标进行分析.结果共纳入符合入选标准患者89例,其中22例发生AKI,发生率24.7%.AKI组患者年龄、APACHEⅡ评分、EuroSCORE评分、主动脉阻断时间、术中输血量、血管活性药物使用、利尿剂使用以及住ICU时间均高于非AKI组(P<0.05).术后3 h和24 h尿液[TIMP-2]&#215;[IGFBP-7]水平,AKI组患者均逐步增高(P<0.05),非AKI组患者无明显变化.对AKI的诊断价值,术后3 h[TIMP-2]&#215;[IGFBP-7]水平的受度者工作特征(ROC)曲线下面积分别为0.890,最佳诊断点为0.6,敏感度为0.909,特异度为0.716;术后24 h[TIMP-2]&#215;[IGFBP-7]水平的ROC曲线下面积分别为0.925,最佳诊断点为0.74,敏感度为0.909,特异度为0.910.结论术后3 h和24 h尿液[TIMP-2]&#215;[IGFBP-7]水平超出诊断值对心脏术后并发AKI具有早期评估价值,可作为早期预警甚至诊断指标.