摘要：目的运用基因芯片技术构建快速简便检测b19细小病毒的方法,用于b19病毒的大规模筛查和早期诊断。方法利用Oligo6.0和primer5.0软件分别设计出5对引物(其中每对引物中的1个用Cy5标记)和6个探针,将探针固定在特制的醛基检测芯片上。分别提取b19病毒全基因组质粒、患者组血清、正常组血清的DNA,进行不对称扩增,产物与芯片杂交,观察结果;DNA测序验证芯片检测结果的准确性;观察等倍稀释不对称PCR扩增产物杂交信号的强度变化,检测芯片的灵敏度。结果电泳结果表明PCR扩增获得的DNA片段和预期表达片段大小一致。芯片杂交结果和DNA测序验证结果完全吻合,芯片杂交信号的强弱会随着DNA浓度的降低而减弱。结论本研究建立了细小病毒b19的芯片检测方法,该方法并具有较高的灵敏度和特异性。

摘要：目的制备细小病毒诊断芯片探针。方法利用Primer Premier 5.0针对细小病毒b19基因保守区域设计PCR引物,将PCR产物克隆pMD-18 T载体。结果序列分析显示,PCR产物均为细小病毒b19特异保守基因。结论利用PCR扩增产物制备诊断芯片探针是一种简便有效的方法。

摘要：利用bLAST软件对细小病毒b19的序列进行序列比对,获得特异序列;利用生物学软件Oligo6.40设计特异性高、Tm值接近、长度均一的Oligo探针。结果获得了13条70bp的Oligo探针,用于芯片打印及细小病毒b19的检测。表明利用bLAST系统和生物学软件Oligo6.40设计细小病毒b19诊断芯片的探针是一种简便而有效的方法。

摘要：目的　制备细小病毒b19诊断芯片探针。方法　利用PrimerPremier 5 0软件针对细小病毒b19基因保守区域设计PCR引物 ,纯化扩增产物 ,克隆鉴定。结果　序列分析表明 ,扩增片段均为细小病毒b19特异基因。结论　利用PCR扩增产物可制备细小病毒b19诊断芯片探针。

摘要：目的建立一种快速、准确、特异和定量检测人细小病毒b19的实验检测方法。方法以b19病毒NS1基因为靶序列,设计并合成引物和Taqman探针,优化引物与探针比例,调整镁离子浓度,建立对细小病毒b19进行荧光定量检测的实验方法。同时利用荧光定量PCR技术检测本院收集的490例孕妇血清。结果引物与Taqman探针比例为1∶4,镁离子浓度为2.5mmol/L时,反应的本底最低,荧光信号最强。该方法的灵敏度为1.0×101拷贝,有较好的特异性和重复性。检测的490例临床孕妇血清标本,人细小病毒b19DNA阳性为44例,感染率为8.9%(44/490)。结论使用Taqman探针技术的荧光定量聚合酶链反应,能够准确快速定量检测血清中的人细小病毒b19。