摘要：【目的】观察脊柱手术患者围术期细胞免疫功能的变化情况,探讨针刺辅助麻醉对细胞免疫功能的影响。【方法】采用随机、对照及双盲试验设计,将50例患者随机分为静吸复合全麻组(对照组)及针刺辅助麻醉组(试验组),每组各25例,2组均采用相同的麻醉诱导及术中维持方式。试验组全麻插管前以2/15 Hz疏密波经皮刺激双侧足三里、三阴交30 min,诱导后以100 Hz连续波持续刺激至术毕,术后第1~3天以2/15 Hz疏密波电刺激双侧内关、太冲30 min。在麻醉诱导前、术后1 h及针刺治疗后的第1天和第3天采血检测血液分析、淋巴细胞亚群及NK细胞。【结果】(1)研究过程中,试验组退出2例,最终试验组23例、对照组25例患者完成试验。(2)术后第1天,2组患者淋巴细胞百分数、单核细胞百分数、中性粒细胞百分数及白细胞数量与同组术前比较,差异均有统计学意义(P0.05)。(3)术后1 h,2组患者CD3+、CD4+、CD8+细胞水平均降低,CD16+、CD56+水平均升高,与同组术前比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。术后第1天,对照组患者CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、CD56+水平均明显降低,CD16+水平升高,与同组术前比较,差异均有统计学意义(P<0.05);试验组CD4+、CD8+细胞水平降低,CD3+、CD4+/CD8+、CD56+、CD16+细胞水平升高,与同组术前比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。术后第3天,对照组患者CD8+、CD4+/CD8+、CD16+、CD56+水平均明显降低,与同组术前比较,差异均有统计学意义(P<0.05);试验组患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、CD56+水平均升高,CD16+水平降低,与同组术前比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。且试验组在术后1 h、术后第1天和术后第3天时,CD4+/CD8+水平明显低于同期对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。【结论】针刺辅助麻醉可以提高患者细胞免疫功能,但不足以完全抵抗手术和麻醉对患者的免疫抑制作用。

摘要：目的开发候选的呼吸道合胞病毒融合蛋白(Respiratory syncytial virus fusion protein,RSV-F)信使核糖核酸(Messenger ribonucleic acid,mRNA)疫苗,初步评价在小鼠中的细胞和体液免疫应答。方法选择4个编码RSV A2毒株全长F蛋白的基因序列,在体外设计RSV_(A2)-F突变体(WT_(A2)-F、DS-CAV1-Tric、SC-DM和DS2)mRNA疫苗,利用免疫印迹法鉴定在人胚肾(HEK-293)细胞中的表达;在采用该4种mRNA疫苗和RSV-F疫苗免疫小鼠2剂次(间隔2周)后12d检测血清γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素4(IL-4)、特异性免疫球蛋白(IgG)抗体和中和抗体水平。结果4种RSV_(A2)F突变体mRNA疫苗均在HEK-293细胞中检测到表达。在小鼠免疫2剂次后,WT_(A2)-F mRNA疫苗组IFN-γ和IL-4水平显著高于RSV-F疫苗组;WT_(A2)-F mRNA疫苗组和RSV-F疫苗组均诱导特异性IgG且抗体水平无显著性差异,但前者诱导的中和抗体水平显著高于后者;post-F构象的WT_(A2)-F mRNA疫苗组与pre-F构象的mRNA疫苗组(DS-CAV1-Tric、SC-DM和DS2)均诱导特异性IgG抗体,但各mRNA疫苗组IFN-γ、IL-4和中和抗体水平均无显著性差异。结论RSV_(A2)F突变体mRNA疫苗在小鼠体内可诱导强烈的细胞和体液免疫应答,可作为潜在的RSV候选疫苗进一步研究。

摘要：近年来,国内外的学者研究表明,尖锐湿疣(CA)的发生、消退、复发及癌变都与机体的免疫功能,特别是细胞免疫功能密切关联.白介素2(IL-2)、白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF-α)是人体内的重要细胞因子,参与一系列的病理、生理过程,与机体的免疫状况密切相关.为了探讨免疫调节剂卡介菌多糖核酸(BCG-PSN)在治疗尖锐湿疣方面的作用和机理我们设计了本研究,现报道如下.

摘要：近年来，我院采用复方丹参注射液等中药配合血液透析治疗慢性肾衰竭，获得较为满意的疗效。针对维持性血液透析(以下简称MHD)患者普遍存在免疫功能低下，而设计了黄芪注射液的治疗，以观察其对MHD患者细胞免疫功能的影响，现将初步结果报道如下。

摘要：T细胞表位在抗病毒的T细胞免疫中发挥核心作用,目前已在多种病原微生物的蛋白序列上发现存在T细胞表位的聚集现象。本文建立了一套功能学与结构学结合的策略鉴定病原体上细胞毒性T细胞(Cytotoxic T Lymphocyte,CTL)表位富集区的方法,并以严重急性呼吸道综合征(SARS)相关冠状病毒(SARS-CoV)的M蛋白为例,成功地鉴定了一个HLA-A2限制性的表位富集区。首先通过生物信息学的方法预测并合成M蛋白跨膜区的HLA-A2潜在结合多肽,通过体外复性实验和T2细胞结合实验验证多肽与HLA-A2的结合力;然后在HLA-A2.1/Kb转基因小鼠中检测这些多肽的免疫原性;最后通过X射线衍射技术,成功解析了其中一条多肽与HLA-A*0201的复合物结构,其结构显示该多肽具有典型的HLA-A*0201表位的结构特点,但却呈现出与以往鉴定多肽不同的构象和锚定残基。本文对于理解机体对SARS-CoV等病原体产生的T细胞免疫反应,以及为更广泛的人群设计T细胞疫苗具有重要意义。

摘要：针对免疫应答过程错综复杂、学习难度大等问题,提出采用系统思维和模型构建的方法逐步还原免疫应答的全过程。以“特异性免疫和非特异性免疫”为例,通过创设真实问题情境,引导学生接受任务挑战,自主学习、合作探究、实时反馈,深入剖析生命现象背后的机制和规律,提高思维深度和建模能力。

摘要：由严重急性呼吸系统综合征冠状病毒2(Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)引起的2019冠状病毒病(Coronavirus disease 2019,COVID-19)大流行对全球健康和经济构成了严重威胁,SARS-CoV-2关切变异株(Variants of concern,VOCs)的出现更增加了疫苗研发的难度,因此,优化设计对突变株具有广谱免疫反应的疫苗显得尤为重要。本研究选取具有大量显性中和表位的受体结合域(Receptor-binding domain,RBD)蛋白作为目标抗原,在SARS-CoV-2经典株RBD序列的基础上引入多个VOCs的关键突变位点,将其与人IgG1 Fc片段融合表达,并结合CpG单佐剂、氢氧化铝单佐剂或CpG与氢氧化铝复合佐剂两剂次免疫小鼠,比较CpG联合铝佐剂相比单独使用铝或CpG佐剂诱导细胞免疫和体液免疫反应的增强作用,同时观察小鼠产生抗不同VOCs活病毒的交叉中和抗体滴度。结果显示,与单佐剂相比,RBD-Fc蛋白结合CpG与氢氧化铝复合佐剂免疫小鼠可产生最高的IgG结合抗体及高水平Th1偏向的细胞免疫应答。同时,小鼠血清还可以有效地中和SARS-CoV-2贝塔株(GMT:11143)、德尔塔株(GMT:4850)、经典株(GMT:3675),甚至是奥密克戎BA.1株(GMT:1393)和BA.5株(GMT:459)的感染。这些结果表明含有突变位点的SARS-CoV-2 RBD-Fc重组蛋白具有良好的潜力,联合使用CpG和铝佐剂可明显提高和平衡小鼠的细胞免疫反应,产生对不同SARS-CoV-2高滴度的交叉中和抗体,可作为一种广谱疫苗进一步研究和开发。

摘要：T细胞表位在抗病毒的T细胞免疫中发挥核心作用，目前已在多种病原微生物的蛋白序列上发现存在T细胞表位的聚集现象。本文建立了一套功能学与结构学结合的策略鉴定病原体上细胞毒性T细胞（Cytotoxic T Lymphocyte，CTL）表位富集区的方法，并以严重急性呼吸道综合征（SARS）相关冠状病毒（***）的M蛋白为例，成功地鉴定了一个HLA—A2限制性的表位富集区。首先通过生物信息学的方法预测并合成M蛋白跨膜区的HLA—A2潜在结合多肽，通过体外复性实验和T2细胞结合实验验证多肽与HLA．A2的结合力；然后在HLA—A2．1／Kb转基因小鼠中检测这些多肽的免疫原性；最后通过x射线衍射技术，成功解析了其中一条多肽与HLA—A＊0201的复合物结构，其结构显示该多肽具有典型的HLA—A＊0201表位的结构特点，但却呈现出与以往鉴定多肽不同的构象和锚定残基。本文对于理解机体对SARS—CoV等病原体产生的T细胞免疫反应，以及为更广泛的人群设计T细胞疫苗具有重要意义。

摘要：随着新发、突发重大传染病以及恶性肿瘤等疾病防控需求的增加,以经验开发为主的传统疫苗体系亟待更新.高分子纳微球因其独特的理化优势,成为生物医药递送领域研究和关注的焦点.但是如何对纳微球体系进行合理化设计和工程化整合是疫苗递送系统开发中遇到的重要挑战.本团队20年来在高分子纳微球制备和应用方面进行了系统性研究,并提出纳微球为"底盘"(Chassis)和亚单位疫苗共组装成先进疫苗的策略,发现和创制了高分子纳微球新功能,阐明了其在细胞/黏膜免疫中的重要作用机理.本专论结合国内外研究现状,围绕上述研究工作,介绍了工程化疫苗底盘按需设计的思路和参考机制,同时也探讨了其在生物医药领域的发展前景.

摘要：目的了解新设计的6组CpG分子在动物体内对新型冠状病毒(SARS-CoV-2)重组亚单位疫苗免疫效果的提升作用,以初步筛选出有潜力的新型CpG佐剂。方法通过序列检索比对,确定人鼠同源的CpG基序,以不同的组合方式设计出6条不同的CpG寡聚脱氧核苷酸(CpG-ODN)序列,并人工合成相应6种CpG,分别与SARS-CoV-2重组亚单位疫苗联用,已上市的佐剂CpG1018作为阳性对照。以间隔2周的方式免疫BALB/c小鼠2次,免疫后每周取眼眶血检测IgG1和IgG2a指标。2针免疫后21 d处死小鼠,取眼球血检测结合抗体抑制率;取脾脏淋巴细胞进行酶联免疫斑点试验检测。结果初次免疫后14 d,CpG6组小鼠血清IgG2a和IgG1水平分别为3.63±0.27和3.44±1.03,显著高于CpG1018组的2.06±1.30和2.06±0.39。加强免疫后14 d,CpG6组小鼠血清IgG2a水平为6.52±0.21,高于CpG1018组的6.33±0.40。在针对原型株的结合抗体抑制率指标上,初次免疫14 d、加强免疫21 d后,各组间差异存在统计学意义(F=13.66、12.58、19.38和19.38,P均<0.001)。初次免疫14 d后,稀释10倍血清中CpG6组小鼠血清抑制率为(64.67±20.41)%,高于CpG1018组[(27.84±20.23)%],差异有统计学意义(t=2.70,P=0.031);加强免疫21 d后,稀释1000倍的血清中CpG6组小鼠血清抑制率针对原型株[(89.71±4.83)%]和Delta株[(79.04±6.32)%]的抑制率水平均显著高于CpG1018组[(70.84±17.20)%和(52.61±14.22)%],差异有统计学意义(t=2.36,P=0.046;t=3.80,P=0.005)。酶联免疫斑点实验结果显示,CpG1018组针对SARS-CoV-2原性株敏感和Delta突变株敏感的特异性IFN-γ分泌细胞数与CpG6组相比,差异均无统计学意义(t=0.76,P=0.469;t=0.78,P=0.459);在特异性IL-2分泌细胞数上,两组差异亦无统计学意义(t=0.70,P=0.503;t=0.90,P=0.395)。结论CpG6与SARS-CoV-2重组亚单位疫苗联用,能在疫苗初次免疫后更快速地在小鼠体内产生体液免疫应答,且加强免疫后体液免疫和细胞免疫效果均不弱于已上市的CpG1018佐剂。CpG6有望成为潜在的备选佐剂与疫苗联用。