摘要：目的探讨不同浓度异丙酚对体外人辅助性T淋巴细胞（Th细胞）分化的影响。方法健康志愿者20名,男性9名,女性11名,年龄20～50岁,体重50～70kg,每名健康志愿者分别采集外周静脉血20ml,进行全血培养,采用随机区组设计,分别接受下述处理：空白对照组（C组）、不同浓度异丙酚组[P1组（1μg/ml）、P2组（4μg/ml）、P3组（16μg/ml）]、不同浓度异丙酚赋形剂组[I1组（0.1μl/ ml）、I2组（0.4μl/ml）、I3组（1.6μl/ml）]。每份血样培养于无菌24孔培养板中,依次加入上述药物培养24h后加入氟波醇乙酯、离子霉素及蛋白质转运抑制剂刺激4h,采用三色流式细胞技术检测全血中Th1细胞及Th2细胞的亚群比例,并计算Th1细胞与Th2细胞比值（Th1/Th2）。结果与C组比较,P3组Th1细胞亚群比例和Th1/Th2升高,I3组Th2细胞亚群比例降低（P〈0.05）,其余组各指标差异无统计学意义（P〉0.05）;与P1组比较,P3组Th1细胞亚群比例和Th1/Th2升高（P〈0.05）;与I3组比较,P3组Th1细胞、Th2细胞的亚群比例升高（P〈0.05）。结论异丙酚16μg/ml可使Th细胞向Th1细胞分化增加,1、4μg/ml对Th细胞分化无影响。

摘要：背景:骨髓间充质干细胞是一种存在于骨髓内的非造血干细胞,因其具有自我更新能力及多向分化潜能,且分离培养方法成熟,在组织器官修复及再生方面显示出良好的应用前景,将为终末期肝病的治疗如生物人工肝及肝细胞移植提供新的细胞来源,但目前人骨髓间充质干细胞向肝系细胞诱导分化培养体系尚不成熟。目的:观察肝细胞生长因子和碱性成纤维细胞生长因子联合应用诱导人骨髓间充质干细胞在体外向肝系细胞分化的可能性。设计:开放性实验。单位:南昌大学第一附属医院传染科与泌尿外科研究所。材料:实验于2004-07/2005-03在南昌大学第一附属医院泌尿外科研究所完成。所用骨髓由成年健康志愿者提供(均对本实验知情同意)。DMEM/F12培养基(Gibco公司);表皮细胞生长因子,肝细胞生长因子,胰岛素,转铁蛋白,鼠抗人甲胎蛋白单克隆抗体,FITC-兔抗鼠IgG(Sig-ma公司);碱性成纤维细胞生长因子(Invitrogen公司);鼠抗人角蛋白18,19单克隆抗体(Chemicon公司);胎牛血清(杭州四季青)。方法:以骨髓腔穿刺方式抽取成年健康志愿者髂后上棘处骨髓10mL,采用密度梯度离心法分离和反复贴壁法纯化骨髓间充质干细胞。取培养至4～8代细胞,消化后以107L-1接种到放置20mm×20mm爬片的预先铺被有0.1%明胶的24孔板中,次日换液,改用无血清DMEM/F12培养基(含20μg/L的表皮细胞生长因子和10μg/L的碱性成纤维细胞生长因子)培养2d后,换成无血清DMEM/F12培养基(含20μg/L的肝细胞生长因子,10μg/L的碱性成纤维细胞生长因子,5mg/L的胰岛素,5mg/L的转铁蛋白)进行诱导分化,每3d换液1次,以未加入肝细胞生长因子和碱性成纤维细胞生长因子的骨髓间充质干细胞作为对照组。骨髓间充质干细胞诱导培养过程中,放射免疫荧光法测甲胎蛋白浓度。诱导当天及第7,14,21,28天,取诱导细胞爬片,细胞免疫荧光法检测肝细胞表面标志物甲胎蛋白、角蛋白18和角蛋白19的表达,并进行糖原染色检测诱导细胞的糖原合成情况。主要观察指标:①细胞形态学观察。②培养上清液中甲胎蛋白表达量的测定。③肝细胞表面标志检测结果。④诱导细胞的糖原合成情况。结果:①诱导第14天可观察到细胞变成短梭形和多角形,随培养时间的延长多角形细胞增多,并可形成肝细胞样的细胞集落。②诱导第14天培养上清液内可检测到甲胎蛋白的分泌,每孔浓度为0.1μg/L;第17天达高峰0.4μg/L;第21天下降至0.3μg/L。③诱导第14天甲胎蛋白、角蛋白18表达呈阳性,第28天角蛋白19表达呈阳性。④诱导第21天糖原染色呈阳性反应。结论:肝细胞生长因子和碱性成纤维细胞生长因子能够诱导人骨髓间充质干细胞在体外向肝细胞分化,表达肝细胞特异性表面标志,并具有合成糖原、分泌甲胎蛋白的功能。

摘要：目的:探讨联合应用重组人骨保护素活性片断和阿伦膦酸钠对破骨细胞前体细胞(RAW264.7)分化的抑制效果,并探讨二者是否具有抑制破骨细胞前体细胞(RAW264.7)分化的协同作用。方法:实验于2004-06/12在解放军总医院骨科研究所完成。酶消化法获取新生小鼠颅骨成骨细胞,与破骨细胞前体细胞(RAW264.7)按照4:1比例混合,培养于96孔板中和6孔板骨磨片体系中。分别使用1×10-5g/L重组人骨保护素活性片断、10mol/L阿伦膦酸钠、1×10-5g/L重组人骨保护素活性片断+10mol/L阿伦膦酸钠作用于96孔板和6孔板混合细胞体系,并设空白对照。9d后,观察破骨细胞数目和形态,计算单位面积内重酒石酸盐抗酸性磷酸酶染色阳性细胞个数,并行骨磨片吸收陷窝计数。统计学分析评价其抑制破骨细胞分化效果。结果:①破骨细胞常规形态及重酒石酸盐抗酸性磷酸酶染色阳性细胞计数:小鼠成骨细胞与RAW264.7混合培养并加入药物后9d,空白对照组出现大量多核成熟破骨细胞,重酒石酸盐抗酸性磷酸酶染色证实为成熟破骨细胞。②骨磨片吸收陷窝形态及计数:与空白对照组相比,其余各组破骨细胞重酒石酸盐抗酸性磷酸酶染色阳性细胞个数,骨磨片吸收陷窝计数均明显减少,以1×10-5g/L重组人骨保护素活性片断+10mol/L阿伦膦酸钠组减少最为显著。③重组人骨保护素活性片断组与阿伦膦酸钠组析因设计的方差分析:加药后9d重组人骨保护素活性片断与阿伦膦酸钠存在交互作用(F=19.878,623.57;P<0.05)。结论:联合应用重组人骨保护素活性片断和阿伦膦酸钠可以发挥交互协同作用,更有效地抑制RAW264.7向成熟破骨细胞的分化。

摘要：概念教学是高中生物教学的重点和难点。利用“问题驱动式导学法”设计“细胞分化”的教学，并引导学生对“细胞分化”的概念进行构建。

摘要：一、教学分析1.教材分析《细胞分化》是在细胞结构、功能、增殖的基础上,向学生展示现代细胞生物学的重要研究方向——细胞分化、细胞全能性、干细胞。细胞分化是核心内容,而细胞全能性、干细胞的研究是对细胞分化进一步的拓展。该节内容是学习遗传、变异的基础,又是克隆技术和胚胎工程的理论基础,因此学好这节知识是必要的。

摘要：以"细胞的分化"一课为例,针对生物学科核心素养的培养提出自己的思考,确定具体课堂的素养和目标,选择相应教学情境和策略,设计教学评价,呈现合理的目标性教学设计,建构生物学科核心素养实现路径.

摘要：本课例基于五构概念教学法,通过“初构—解构—重构—创构—架构”概念这五个教学环节,在时空维度解构出串联细胞分化和细胞全能性的逻辑主线,通过连贯的探究推理活动,使学生认同结构与功能观及系统观,发展归纳演绎、抽象概括、分析综合等科学思维,进而建构出概念图谱,发展生物学学科核心素养。

摘要："细胞分化"的教学既要解决细胞分化的定义、意义、原因,使学生能从现象深入到本质理解细胞分化,同时,又需要进一步阐明细胞分化的影响因素,揭示细胞分化与细胞全能性的关系。本节课用大量感性材料形成概念,以实验探究形式突破细胞分化原因和细胞全能性教学。

摘要：以现有科研成果为基础,创设真实情境,通过“设计活动、引入概念、深度探究、理解实质、联系生活、扩大外延”等深度学习手段,帮助学生逐步深化对“细胞分化”概念的理解,培养学生的独立探究意识,着力提升学生的生物学学科核心素养。

摘要：根据极性平面化合物的构效关系,以吡啶酮为基本母核设计合成了4个多亚甲基二甲酰胺吡啶酮衍生物,其结构由元素分析及红外光谱证实。经生物活性测试表明,中间链为4个亚甲基的化合物B在0.1mmol/L的低浓度下对HL-60细胞有明显的分化作用,分化率为60.2%,且细胞存活率较高。