摘要：背景:转基因治疗骨科系统疾病一直是骨科治疗的难点,构建携带有效基因的病毒是目前治疗因破骨细胞功能异常亢进的骨骼系统疾病的研究方向。目的:构建携带人护骨素(humanosteoprotegerin,hOPG)基因的重组腺病毒及其在大鼠体内共同表达。设计:单一样本研究。单位:解放军第三军医大学大坪医院全军战创中心骨创科。材料:实验在解放军第三军医大学烧伤研究所移植免疫实验室完成。材料:质粒PUC19-hOPG;穿梭质粒pAdTrack-CMV及腺病毒基因组;pAdeasy-1,293细胞株;限制性内切酶EcoRI,EcoRⅤ,BamHI,KpNI,PmeI,PacI,PCR引物。方法:将hOPG基因片段插入到含有GFP基因的穿梭质粒pAd-Track-CMV上,与骨架质粒在大肠杆菌BJ5183胞内进行同源重组,经293细胞包装、扩增后得到携带hOPG和GFP基因的重组腺病毒(Adeasy-Adtrack-CMV-hOPG,Ad-hOPG)。经大鼠尾静脉注射109pfu的Ad-hOPG,在不同时相处死大鼠取其心、肝、肾、脾等组织观察重组腺病毒在体内表达特点。主要结局观察:①重组质粒转染293细胞后,观察是否有绿色荧光蛋白的表达。②所获得的重组腺病毒基因组是否含有hOPG基因。③重组腺病毒Ad-hOPG所携带的基因是否能在大鼠体内表达蛋白,及表达时象特点。结果:成功地构建了高滴度的携带hOPG基因的重组腺病毒,并能在体内大量表?

摘要：背景:血管内皮功能紊乱在血管性头痛的发生发展过程中起重要作用,一氧化氮、内皮素可能参与偏头痛的病理生理过程,改善偏头痛患者一氧化氮、内皮素水平的异常有助于偏头痛的治疗。目的:观察颅痛安颗粒对大鼠血管内皮细胞功能的影响,探讨其治疗头痛的机制。设计:随机对照的实验研究。单位:泸州医学院药学院药理教研室,中山大学医学院第一附属医院烧伤科,潍坊市人民医院心内科。材料:实验在泸州医学院药学院药理实验室完成,选择SD大鼠50只,随机分为正常对照组,模型组,颅痛安颗粒大剂量(4g/kg)组,颅痛安颗粒中剂量(2g/kg)组,颅痛安颗粒小剂量(1g/kg)组,每组10只。干预:复制血管内皮细胞功能紊乱动物模型后治疗5d,取血测组织型酶原激活物(t-PA)活性,纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)活性、一氧化氮及血管内皮素含量,求活性t-PA百分率。主要观察指标:t-PA活性、PAI-1活性、一氧化氮和内皮素含量。结果:模型组较正常对照组t-PA活性[(2.0123±0.3422)IU/mL比(4.2199±0.4924)IU/mL]、活性型t-PA百分率[(14.5937±1.5196)%比(35.1608±3.1152)%]、一氧化氮含量[(2.2873±0.3081)mol/L比(2.7371±0.4182)mol/L]均显著降低(P<0.05),PAI-1活性[(14.8895±2.0971)AU/mL比(7.8239±0.5211)AU/mL]、内皮素含量[(3.

摘要：对比分析义务教育生物学新课标和高中生物学新课标的课程目标,以“细胞是生物体结构和功能的基本单位”概念为例,梳理义务教育生物学和高中生物学新课标中的内容要求、学业要求等相关表述,指出学段间有效衔接、循序渐进和延续拓展的关系。结合SOLO分层理论构建围绕核心概念理解层级的学习进阶路径,以“细胞的结构和功能”为进阶维度,开展初高中衔接的进阶设计,从学习进阶的角度为初高中衔接提出教学建议。

摘要：随着纳米科学的迅速发展,越来越多的微粒材料被设计和制备出来,并应用于生物医学领域,取得了令人瞩目的进展和成就。近年来,我们课题组发展了一系列具备可控表面化学与结构、特定刺激响应性能和可控装载与释放性能的微粒材料,尤其是基于层层自组装的中空微胶囊。同时,我们也致力于研究微粒材料与细胞的相互作用,阐明其物理化学性质对细胞内吞和细胞功能的影响。通过这些研究,我们希望进一步建立功能性微粒材料的生物学功能优化的规律,推动其在生物医学领域的应用。

摘要：背景：乙酰化率15．3％的壳聚糖在细胞生理条件下的溶解性差，限制了细胞的微囊化过程。目的：用乙酰化率15．3％的壳聚糖制备乙酰化率50％的壳聚糖，探讨其在细胞生理条件下与异丁烯酸-羟乙基异丁烯-甲基丙烯酸甲酯三元共聚物制备微胶囊包埋肝细胞的可行性。设计、时间及地点：对照观察实验，于2006—01／10在暨南大学附属第一医院中心实验室完成。材料：乙酰化率15．3％的壳聚糖由Sigma—Aldrich公司提供，肝细胞采用改良的两步原位胶原蛋白酶灌注法从体质量250～300g的雄性Wistar鼠中分离获取。方法：微囊化肝细胞利用乙酰化率50％的壳聚糖和三元共聚物在25℃、无菌条件下凝聚制备。主要观察指标：微胶囊的渗透性以空微胶囊中荧光葡聚糖（HTC-葡聚糖）的渗透率表示。微囊化肝细胞的稳定性通过机械剪切破碎实验测定。微囊化肝细胞白蛋白的合成能力采用ELISA测定。尿素合成能力采用检测试剂盒（Sigma Diagnostic）在540nm波长下比色测定。细胞色素P450活性使用共聚焦激光显微镜测定7-乙氧基试卤灵（细胞色素P4501A1的底物）O-位脱烷基化产物的荧光强度来实现定量。测定均以肝细胞平面培养为对照。结果：①随着乙酰化率50％的壳聚糖质量浓度的增加，Mr20000和40000荧光葡聚糖的渗透率呈下降趋势。Mr70000荧光葡聚糖渗透率很低，随乙酰化率50％的壳聚糖质量浓度变化不明显。②包埋肝细胞密度为2×10^9L^-1时，震荡24h的破碎率仅为6％左右，未包埋肝细胞微胶囊在相同震荡条件下，4h全部破碎。③培养第1天1×10^6个细胞中尿素合成达到30μmol／d，明显高于15μmol／d的平面培养实验结果。培养7d后，微囊化细胞和平面培养细胞尿素的合成能力比较接近。④培养前3d 1×10^6个细胞中白蛋白达到10μg／d左右，培养7d后为5μg/d左右，整个培养过程中均高于平面培养的结果。⑤培养第1天微囊化肝细胞的细胞色素P450活性比平面培养高出近8倍，且在培养1周后细胞色素P50活性仍可以保持第1天培养的50％以上。结论：生理条件下基于乙酰化率50％的壳聚糖构建的微胶囊在培养过程中有较好的渗透性及结构稳定性。与体外表面培养实验相比，改性后的壳聚糖微胶囊有利于支持肝细胞的体外功能。

摘要：微小RNA(microRNAs,miRNAs)是长度为19～24 nt的内源性非编码小RNA。miRNA与自然杀伤(naturalkiller,NK)细胞的分化和功能密切相关,并参与传染病,肿瘤和其他病理过程的免疫调节。本文对近年来发现的miRNAs在NK细胞发育、分化和功能调控中的作用进行综述。

摘要：目的:观察一种基于Fibronectin功能位点序列设计人工合成的小分子多肽体外的功能活性,探讨其在调控细胞功能活性中的作用。方法:通过单层细胞划痕模型,研究小分子多肽对体外培养的成纤维细胞、血管内皮细胞迁移的影响;通过双室联合培养模型,研究小分子多肽对皮肤伤口中性粒细胞迁移的影响。结果:设计合成的小分子多肽体外可以有效促进成纤维细胞、血管内皮细胞和中性粒细胞的迁移能力。结论:该小分子多肽具有功能活性,在创面愈合中具有一定的研究和应用前景。

摘要：１９９６年的诺贝尔医学奖颁给两位免疫学家，多蒂尔博士和金克尔勒克尔博士，以表彰他们发现毒杀型Ｔ细胞是如何识别被外来病毒感染的细胞的。他们的发现表明Ｔ细胞的识别需双重承认，一是自己细胞上的组织抗原，另一是外来病毒抗原。而且病毒与自身的组织抗原必须同时出现，才会被Ｔ细胞识别。他们成功的经验说明，科学研究重在创新，要善于通过简单的实验设计来开辟一个新的研究领域。

摘要：目的探讨慢病毒介导下靶向敲除Napsin A基因对非小细胞肺癌细胞生物学功能的影响,为非小细胞肺癌患者的个体化诊疗提供依据。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测74例非小细胞肺癌(鳞状细胞癌和腺癌)组织和细胞中Napsin A mRNA表达水平并进行比较。设计并构建pLent-shRNA-Napsin A和pLent-shRNA-Control重组慢病毒,分别转染人非小细胞肺腺癌/鳞状细胞癌(A549/H1703)细胞株,同时为两类细胞设定空白对照组,分别称为shRNA-Napsin A组、shRNA-Control组和空白对照组。采用CCK-8法、流式细胞仪和Transwell法检测A549和H1703细胞株中各组细胞增殖、凋亡及侵袭能力。结果与癌旁正常组织比较,非小细胞肺腺癌和鳞状细胞癌组织中Napsin A mRNA均明显升高(P﹤0.01);与鳞状细胞癌比较,肺腺癌组织和细胞中Napsin A mRNA均明显升高(P﹤0.01)。在第1天时,A549和H1703细胞株中各组细胞光密度(OD)值、凋亡率及侵袭细胞数比较,差异均无统计学意义(P﹥0.05);第2~5天,A549和H1703细胞株中shRNA-Napsin A组细胞OD值和侵袭细胞数均低于shRNA-Control组和空白对照组(P﹤0.05),凋亡率均高于shRNA-Control组和空白对照组(P﹤0.05);第2~5天,A549细胞株中shRNA-Napsin A组细胞OD值和侵袭细胞数均低于H1703细胞株(P﹤0.05),凋亡率均高于H1703细胞株(P﹤0.05)。结论Napsin A基因在人非小细胞肺鳞状细胞癌和肺腺癌中表达差异明显,且靶向下调Napsin A基因抑制A549细胞增殖、侵袭,促进凋亡能力高于H1703细胞,提示Napsin A基因有望成为非小细胞肺癌患者诊断、鉴别诊断及个体化治疗的重要指标。

摘要：我们通过对髁突软骨细胞进行PCNA、FGFR3、Ⅱ型胶原和蛋白多糖聚合体基因表达等研究,探讨髁突软骨的分层及其功能. 　　1.材料和方法:成年日本大耳白兔共6只,雌雄各半.处死动物后,取TMJ标本, HE染色和免疫组化标本用多聚甲醛固定,EDTA脱钙,石蜡包埋.免疫组化采用超敏SP法.抗FGFR3多克隆抗体购自Santa Cruz 公司(美国), 抗PCNA单克隆抗体、SP免疫组化试剂盒(购自福州迈新公司).基因序列、引物设计、RNA探针制备和原位杂交方法同以前的研究[1]。