摘要：针对原始细胞实验面临的结果不一致、可重复性差、报告不规范等问题,细胞实验系统评价/Meta分析(SRs/MAs)可较好地解决这些问题,是提升细胞实验结果对动物实验及临床研究指导价值的重要手段。但目前国内外尚无细胞实验SRs/MAs报告规范的相关研究,已发表的细胞实验SRs/MAs在设计和实施过程中均存在较多问题。因此,一个经过严谨设计、规范实施的系统评价制作标准流程对提升细胞实验SRs/MAs的质量具有重要意义。本文将详细介绍细胞实验系统评价制作流程和基本原理,以期推动国内高质量细胞实验系统评价的开展和应用。

摘要：目的 构建大鼠Wnt5a基因慢病毒并感染RSC96雪旺细胞,观察慢病毒感染情况及Wnt5a表达情况。方法 设计大鼠Wnt5a基因特异性RNAi序列,构建并包装成可感染细胞的慢病毒,感染RSC96雪旺细胞后通过Celigo观察细胞中荧光表达,并通过实时荧光定量聚合酶链反应(RT-q PCR)检测细胞中Wnt5am RNA的表达情况。结果 构建的Wnt5a基因慢病毒在感染RSC96雪旺细胞后可表达绿色荧光,细胞中Wnt5am RNA的平均表达量为0.206±0.056。结论 Wnt5a基因慢病毒构建成功,可为研究Wnt5a调控的周围神经损伤修复时雪旺细胞功能的相关研究提供便利。

摘要：目的为了提高紫衫醇的口服生物利用度,本实验基于寡肽转运体介导设计了小分子紫杉醇前体药物。方法合成了紫杉醇-胱胺和紫杉醇-胱胺-缬氨酸两亲性前体药物。以细胞实验,考察了前体药物的膜透过能力。通过大鼠在体肠循环实验,考察了小分子前体药物的肠吸收机制。最后,对药物的口服药物动力学特征进行了研究。结果前体药物具有比较好的跨过细胞膜能力,大鼠在体肠循环实验表明,寡肽转运体对紫杉醇-胱胺-缬氨酸的跨膜转运具有明显地介导作用,极大提高其肠黏膜吸收能力。动物实验结果表明,与原料药组相比,紫杉醇-胱胺-缬氨酸组的绝对生物利用度从19.31%提高到了30.61%。结论寡肽转运体对紫杉醇-胱胺-缬氨酸小分子前药具有比较好的介导作用,极大提高了紫杉醇的口服生物利用度。

摘要：目的 在外泌体表面表达肝癌靶向肽SP94,并将生长分化因子15(GDF15)的siRNA包裹至外泌体中,研究其对肝癌的治疗作用。方法 首先设计合成GDF15的siRNA,转染Hepa1-6和H22细胞作为实验组,无靶向的siRNA作为对照组,通过实时定量PCR、蛋白免疫印迹和流式细胞术验证GDF15 siRNA的功能。再构建一个靶向肝癌的SP94-Lamp2b-HA质粒,转染入HEK293T细胞后提取工程化外泌体SP94-外泌体,用SP94-外泌体包裹GDF15 siRNA作为SP94-siRNA-外泌体实验组,空载SP94-外泌体作为空载对照组,通过尾静脉注射法将两组外泌体导入小鼠体内,研究小鼠原位肝癌模型的治疗效果,并对小鼠的生存期进行观察。另外,将SP94-siRNA-外泌体尾静脉注射入健康小鼠体内,观察器官变化情况,对比血液生物化学和炎性因子指标差异。结果 成功合成GDF15 siRNA,在转染Hepa1-6和H22细胞后,GDF15的mRNA和蛋白水平表达明显降低(P0.05),表明SP94-siRNA-外泌体对小鼠基本无毒副作用。结论 SP94-siRNA-外泌体可以精准靶向肝癌,并有效地抑制肝癌的生长。

摘要：药物进入临床前在进行毒理学研究时需要通过细胞实验和动物实验找到药物最低有效浓度和药物最高安全浓度，因此，需要一种液体对药物进行浓度梯度稀释，而稀释液的成分将直接影响实验结果。同时，针对用药方式和用药部位的不同应选取不同的稀释液，当研究一种用于眼部直接给药的新药时，需要根据眼部特殊的生理需求进行实验设计，只有这样才能得到切实有效的结果。

摘要：这是一款解决细胞实验的产品,通过操作摇杆、三轴支臂、注射器来完成对细胞的各项实验,在细胞或病毒的实验中解决难题,实验室众多的细胞实验在这套显微镜组件上都可以满足。它利用简约的设计风格,淡化了繁杂的实验室环境,白色和冷灰色的碰撞,圆润顺滑的造型也表达了仪器精密严谨的一面,符合实验产品的气质。

摘要：目的构建重组双荧光素酶报告基因质粒psiCHECK-2-Intron,并观察其在非小细胞肺癌细胞株PC-9转染后对萤火虫荧光素酶、海肾荧光素酶表达。方法以双荧光素酶报告基因质粒psiCHECK-2中的嵌合体内含子(设计长度为133 bp)为模板,PCR扩增后插入到psiCHECK-2质粒中,即获得重组双荧光素酶报告基因质粒psi-CHECK-2-Intron。取psiCHECK-2-Intron质粒,转染至感受态大肠杆菌中,采用琼脂糖凝胶电泳实验观察目的基因片段长度,并对目的基因片段进行基因测序。将重组双荧光素酶报告基因质粒psiCHECK-2-Intron、双荧光素酶报告基因质粒psiCHECK-2分别转染至PC-9细胞中,记为转染组、对照组,采用qRT-PCR法检测两组细胞中萤火虫荧光素酶mRNA、海肾荧光素酶mRNA,采用双荧光素酶活性实验检测两组细胞中萤火虫荧光素酶活性、海肾荧光素酶活性。结果目的基因片段长度为133 bp,基因序列正确,无突变和缺失,表明重组双荧光素酶报告基因质粒psiCHECK-2-Intron构建成功。转染组细胞中萤火虫荧光素酶mRNA、海肾荧光素酶mRNA的相对表达量分别为2.213±0.038、2.004±0.025,对照组分别为1.004±0.012、1.003±0.010,两组相比,P均<0.05。转染组细胞中萤火虫荧光素酶活性、海肾荧光素酶活性分别为2.974±0.099、1.948±0.052,对照组分别为1.000±0.018、1.000±0.020,两组相比,P均<0.05。结论成功构建了重组双荧光素酶报告基因质粒psiCHECK-2-Intron;psiCHECK-2-Intron转染PC-9细胞后,细胞中萤火虫荧光素酶、海肾荧光素酶的表达均升高。