摘要：目的　利用 Ｐ Ｃ Ｒ 介导的半酶促半化学法人工合成经改造的广谱细胞生长因子基因。方法　将基因依据其限制性内切酶切点分为左中右三个区段。化学合成若干寡核苷酸小片段，利用 Ｐ Ｃ Ｒ 的方法介导寡核苷酸小片段之间的连接。最后将三条基因区段组合为完整的基因。结果　各区段及全基因的序列经测定与设计方案完全相符。结论　广谱细胞生长因子基因的成功合成为将来的表达与应用研究创造了条件，同时证明 Ｐ Ｃ Ｒ 介导的人工基因合成法是一种简便快速并且行之有效的人工基因合成的新方法。

摘要：为得到1种简捷而适宜的山羊毛囊体外培养方法，采用3因子3水平的拉丁方正交试验设计（I9（3^4））方法，对比研究了无血清的Williams培养基、无血清的DMEM培养基和添加10％FCS（胎牛血清）的DMEM培养基，及其在3种培养基中分别添加0、2和10ng/mL3种不同质量浓度的血管内皮细胞生长因子（VEGF）和表皮细胞生长因子（EGF）时对毛囊体外培养的影响。将成年青山羊皮肤上的单根毛囊完整地分离出来，并同时平行培养在9种培养基中，借助于倒置显微镜和目镜测微尺随时不断地观察毛囊生长的形态变化和测量毛根的长度。结果发现：山羊游离毛囊在9种培养基中均能很好地生长；但以无血清的培养基和在WilliamsE培养基的效果最好；分别和同时添加2％～10％的VEGF和EGF时可加快毛囊的生长；添加10％FCS和不添加细胞生长因子时毛囊也能生长，但生长速度较慢。

摘要：目的 :建立一种灵敏、特异、精确的定量检测人成纤维细胞生长因子mRNA(FGFmRNA)的逆转录 聚合酶链反应 酶联免疫吸附分析技术。方法 :设计两条特异探针 ,其序列分别与FGFmRNART PCR产物的一条链的不同区域互补。其中一条为带有氨基修饰的捕获探针 ,可以与微量DNA结合板表面的NOS基团共价结合 ,另一条为标记生物素的检测探针。提取人外周血单个核细胞总RNA ,进行RT PCR扩增 ,产物热变性后与检测探针一起加入已包被捕获探针的微孔板内进行夹心杂交 ,最后加入链亲和素 辣根过氧化物酶 (SAV HRP)及底物 ,在 4 5 0nm波长处检测吸光度。结果 :该方法检测FGFmRNA灵敏度高、特异性好 ,与非目的扩增收稿日期 :2 0 0 2 -10 -3 0 ;修回日期 :2 0 0 2 -11-2 0基金项目 :浙江省自然科学基金资助项目 (No.3 975 10 )。作者简介 :陈少波 ( 1965 -) ,男 ,浙江温州人 ,高级工程师。通信作者 :吕建新 (E -mail:jx@***)。产物杂交无阳性信号 ;重复性良好。结论 :本方法具有操作简单、灵敏度高、特异性好的优点 ,适合于FGFmRNA的定量检测。