摘要：背景：骨髓间充质干细胞体外分离培养方便，细胞免疫原性低，更适合于细胞移植，已有证实其在神经缺损修复方面具有较大的应用潜力。目的：明确体外培养的骨髓间充质干细胞体内移植后，促进大鼠周围神经损伤修复的可行性，并初步探讨其可能的作用机制。设计、时间及地点：随机对照动物实验，于2006-03／2007-03在吉林大学公共卫生学院毒理教研室完成。材料：选取健康雌性Wistar大鼠50只，鼠龄2个月；另选取出生1周的雌性Wistar大鼠6只用于制备骨髓间充质干细胞；实验用兔抗NGF单克隆抗体为Santa Cruz公司产品。方法：①采用贴壁法分离培养骨髓间充质干细胞，传至第3代，于移植前48h加入BrdU进行标记。②取50只健康Wistar大鼠，利用钳夹法建立坐骨神经挤压伤模型后随机分为细胞移植组和对照组，每组25只，移植组将BrdU标记的骨髓间充质干细胞移植到神经损伤处，而对照组注入等量的DMEM。主要观察指标：①术后1，2，4，6周取移植组损伤段神经进行抗BrdU染色。②术后1，2，4，6周对两组损伤远端神经进行神经生长因子免疫组化染色，图像分析软件分析阳性表达的积分吸光度。③术后每周进行步态分析测量坐骨神经功能指数，术后6周测量再生神经传导速度、坚牢蓝染色后计数有髓神经纤维数目和内径、测量大鼠实验侧腓肠肌湿重和肌纤维横截面积。结果：全部50只实验大鼠均进入结果分析。①术后1,2，4周在细胞移植组神经损伤处可以检测到BrdU阳性细胞。②术后1和2周细胞移植组神经生长因子蛋白表达积分吸光度值均高于对照组，差异有显著性意义（P〈0．01）；而术后4，6周差异则无显著性意义（P〉0．05）。③术后3-6周细胞移植组坐各神经功能指数的恢复要优于对照组；术后6周细胞移植组大鼠的神经传导速度、有髓神经纤维计数和直径、腓肠肌湿重和横截面积均高于／大于对照组，差异有显著性意义（P〈0．05～0．01）。结论：体外培养的骨髓间充质干细胞可进行体内移植，移植后能在局部损伤微环境中发挥作用，促进周围神经损伤修复，提高早期神经生长因子表达是其机制之一。

摘要：背景:循环中内皮前体细胞在一定的条件下可向内皮细胞转化,而且可进一步形成血管。目的:探讨从外周血中获取的内皮前体细胞自体移植后促进心肌缺血区域血管新生的可行性和有效性,为冠状动脉硬化性心脏病患者的治疗提供新的细胞移植学方法。设计:完全随机对照实验。单位:青岛儿童医院心脏中心。材料:选用雄性SD大鼠60只,清洁级,体质量(340±20)g,由青岛实验动物中心提供。实验动物随机分为两组:实验组和对照组,每组30只。两组又按内皮前体细胞注入后2,4,8周3个时间点进行观察,每个时间点10只。实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准。方法:实验于2003-05/2004-09在青岛医药生物科技重点实验室完成。将实验组动物麻醉后,抽取动物的外周动脉血,应用密度梯度离心法获取单个核细胞。应用加入血管内皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子的特定培养基培养后,获得CD31、CD34、FIk-1和血管性血友病因子免疫荧光染色阳性的内皮前体细胞。结扎SD大鼠冠状动脉左前降支,建立急性心肌梗死动物模型,然后将得到的自体细胞重新植入缺血心肌局部区域。对照组注入细胞培养液,其余步骤与实验组相同。分别于结扎后2,4,8周过量麻醉处死所有动物,制作心脏组织切片。主要观察指标:①进行HE染色后光镜下观察心肌基本结构变化情况。②组织切片经Ⅷ因子免疫组化染色后,应用德国ZEISS(蔡司) Axiotron图像分析仪分析视野内Ⅷ因子阳性内皮细胞数量和微血管密度。结果:纳入的60只SD大鼠全部进入结果分析。①对照组心肌组织结构较为杂乱,心肌细胞多为被胶原组织和成纤维细胞所替代,梗死边缘区心肌细胞呈现不规则形状,部分细胞明显肥大。与对照组比较,移植组心肌胶原纤维融合较少,组织排列结构更为有序;移植区域微血管密度明显增高。②内皮前体细胞注入后第2,4和8周组心肌缺血区域微血管密度明显高于对照组的相应时间点,差异有显著性意义(P0.05)。结论:通过一定的体外分离、定向分化、培养、扩增途径,可以从外周血获得较为纯化的内皮前体细胞;内皮前体细胞移植对局部梗死心肌组织结构有一定的保护作用,并可促进血管新生。

摘要：背景:嗅鞘细胞是目前已知用于移植细胞中惟一可以跨越周围神经系统与中枢神经系统边界的细胞。在众多的国内外文献中,大多以嗅球来源嗅鞘细胞作为观察对象;但采用嗅黏膜嗅鞘细胞移植具有来源方便、损伤小、可自体取材等优势。目的:比较嗅球来源嗅鞘细胞和嗅黏膜嗅鞘细胞移植对脑出血后神经功能损伤恢复作用的差异。设计、时间及地点:免疫组织化学水平的随机对照动物实验,于2005-10/2007-10在无锡市第三人民医院细胞实验室完成。材料:选用健康雄性SD大鼠30只,按随机数字表法分为3组,对照组、嗅球来源嗅鞘细胞移植组及嗅黏膜嗅鞘细胞移植组各10只。方法:分别获取人鼻中隔黏膜、人胚嗅球,进行嗅鞘细胞的分离培养纯化,取培养10d的细胞用作细胞移植。取SD大鼠制备尾状核出血模型,嗅球来源嗅鞘细胞移植组及嗅黏膜嗅鞘细胞移植组各取10μL细胞悬液在立体定向下引导微量注射器向大鼠脑组织内匀速注射(1μL/min),对照组注入等量培养基,注射点为右侧尾状核。主要观察指标:观察两种来源嗅鞘细胞的体外培养情况。嗅鞘细胞移植后对动物行定期行为学评定,功能损伤越重,得分越高;并观察组织切片靶区域免疫细胞化学分析结果。结果:从体外培养结果看,无论在形态上还是表型上,两者无明显区别。嗅球来源嗅鞘细胞移植组及嗅黏膜嗅鞘细胞移植组大鼠的Longa5分制法及前肢放置试验评分在移植后第14,28,56天显著低于对照组(P0.05),移植组各时间段差异无显著性意义(P>0.05)。结论:用于移植修复神经功能的两种嗅鞘细胞在细胞特性、移植效果方面均无明显差异。

摘要：背景:帕金森病系中脑黑质多巴胺能神经元变性,使纹状体内多巴胺减少而出现一系列临床症状。将分泌多巴胺的细胞或转染多巴胺合成限速酶基因的细胞进行脑内移植,能一定程度地逆转或改善症状,但存在免疫排斥的问题。目的:探讨在不使用免疫抑制剂的情况下,应用免疫隔离的方法进行细胞移植治疗帕金森病大鼠,观察微胶囊的生物相容性及其机械强度。设计:随机对照实验。单位:中国科学院大连化学物理研究所生物技术部生物医用材料工程组,吉林大学第二医院神经内科。材料:实验于2003-08/2004-02在吉林大学第二临床学院动物实验中心完成。选择雄性Wistar大鼠40只。PC12细胞由中国科学院上海细胞生物学研究所提供。方法:在纹状体内注射6-羟多巴胺盐溶液制备帕金森病动物模型。其中制备模型成功大鼠25只,随机分为微囊化细胞移植组12只:将25μL的微囊化细胞悬液(相当于2.5×104个细胞)分两点定位注射到动物模型右侧(损毁侧)纹状体内。非微囊化细胞移植组7只:植入25μL裸PC12细胞悬液(相当于5×104个细胞)。空微胶囊移植组6只:植入25μL的空微胶囊悬液。各组大鼠在移植后第7天注射阿朴吗啡(0.05mg/kg),然后记录每只大鼠的旋转行为,1次/周,共12周。术后12周处死大鼠,取脑组织进行病理学观察,回收微胶囊观察生物相容性和免疫隔离作用。主要观察指标:①微胶囊在大鼠纹状体内的生物相容性。②微胶囊的免疫隔离作用。③各组大鼠移植前后平均旋转圈数。结果:进入结果分析25只,其余均为模型制备不成功而脱落。①微胶囊的生物相容性:回收的海藻酸钠-壳聚糖-海藻酸钠微胶囊,形态完整,表面光滑,无炎细胞浸润。②微胶囊的免疫隔离作用:微胶囊内的PC12细胞继续增殖,部分形成了细胞团。③各组大鼠移植前后平均旋转圈数:移植前各组大鼠的单侧旋转记录无明显不同(P>0.05)。微囊化细胞移植组移植2周后平均旋转圈数明显低于移植前,甚至停止旋转,症状的改善保持至移植后12周。非微囊化细胞移植组的平均旋转圈数也明显低于移植前,但8,12周又有上升趋势,与移植前无明显变化(P>0.05)。空微胶囊移植组移植前后的旋转圈数基本一致。结论:①海藻酸钠-壳聚糖-海藻酸钠微胶囊有良好的生物相容性和机械强度,在移植部位不引发炎症反应,并保持形态的完整性。②海藻酸钠-壳聚糖-海藻酸钠微胶囊有免疫保护作用,包封的PC12细胞移植到帕金森病大鼠的脑内可以长期存活,继续保持正常的生理功能,通过合成和释放多巴胺,改善帕金森病大鼠的症状。

摘要：背景:间质干细胞的多向潜能性研究目前多处于动物实验阶段,至不同定位组织后是否有向其组织分化并产生相应的功能?目的:观察骨髓间质干细胞移植于脑皮质缺血性梗死灶的周围,观察其向神经分化及其对神经功能恢复的作用。设计:随机对照实验。单位:中山大学基础医学院解剖教研室,中山大学附属第一医院神经内科,暨南大学医学院病理教研室,广州医学院医学检验系。材料:实验于2002-11/2003-11在中山大学医学院完成。选择清洁级雄性SD大鼠48只,随机分为造模的梗死组32只和不造模的对照组16只。梗死组又随机分成移植组16只和磷酸盐缓冲液组16只;以前囟为参考点,尾侧3mm旁开1.5mm,深度2.0～3.0mm,分别移植5μL(5×104L-1)间质干细胞或磷酸盐缓冲液。方法:从非血液系统疾病的胸外科手术中摘取的肋骨骨髓中分离、纯化而获得的间质干细胞,经体外培养、扩增、鉴定。各组大鼠在移植后第2,6周末麻醉,对标本移植部位进行25μm连续冰冻切片。用免疫组织化学方法检测神经元特异性烯醇化酶、神经丝蛋白、胶质纤维酸性蛋白、巢蛋白的表达,评估间质干细胞向神经元、神经胶质细胞分化的能力。随机抽取移植组8只大鼠,磷酸盐缓冲液组8只大鼠,在移植前和移植后2,6周末用横木行走试验评分法观察大鼠全身状态和反应能力,对照组16只大鼠与移植组和磷酸盐缓冲液组同时测评。主要观察指标:①大脑皮质神经元特异性烯醇化酶、神经丝蛋白、胶质纤维酸性蛋白、巢蛋白的表达。②横木行走试验评定大鼠运动功能。结果:48只大鼠全部进入结果分析。①第2周末移植间质干细胞位置可见胶质纤维酸性蛋白、巢蛋白表达呈现阳性。第6周末移植间质干细胞位置神经元特异性烯醇化酶、神经丝蛋白表达也呈出阳性。而磷酸盐缓冲液组相应注射部位神经元特异性烯醇化酶、神经丝蛋白、胶质纤维酸性蛋白、巢蛋白表达均为阴性。②对照组无明显神经症状,评分均为9分。移植2周后,移植组运动功能评分高于磷酸盐缓冲液组犤(6.7±0.9)分,(5.3±1.0)分,(P<0.05)犦。移植6周后,移植组运动功能评分也高于磷酸盐缓冲液组犤(8.9±1.1)分,(7.2±0.8)分,(P<0.05)犦。结论:骨髓间质干细胞移植后在中枢神经系统有趋向神经元和神经胶质细胞分化的能力,表达了某些神经元胶质细胞的特性。移植组大鼠横木行走试验运动功能评分高于磷酸盐缓冲液组,并显示出明显的神经功能修复作用。

摘要：目的:评价自体骨髓单个核细胞移植对晚期冠心病陈旧性心肌梗死患者心功能改善的早期影响。方法:前瞻性设计入组需要外科治疗的晚期冠心病陈旧性心肌梗死患者20例。在冠状动脉旁路移植手术同期,采用随机双盲,平行对照的方法经冠状动脉桥血管移植自体骨髓单个核细胞,患者随机分为干细胞治疗组与对照组。应用磁共振成像评价治疗前后心功能的变化,同时评价不良事件的发生。结果:试验揭盲后干细胞治疗组9例,对照组11例。手术早期结果无死亡。随访6个月,患者均存活,随访期间无不良事件发生。磁共振成像检查,手术后2组患者左心室射血分数较术前明显提高,差异有统计学意义(P=0.006),而两组间差异无统计学意义。手术后节段左心室壁增厚率干细胞治疗组大于对照组(P=0.044)。结论:冠状动脉旁路移植术同期自体骨髓单个核细胞经桥血管心肌内移植是安全的,治疗早期无不良反应。早期结果显示:节段左心室壁增厚率的变化干细胞治疗组优于对照组。

摘要：目的观察骨髓间充质干细胞（MSCs）静脉移植对野百合碱（MCT）诱导肺动脉高压（PAH）大鼠的内皮素-1（ET-1）表达的影响。方法培养大鼠幼鼠骨髓MSCs，传代纯化，取第3～5代细胞进行移植。Wistar大鼠30只，成组设计（n=10）为3组：实验组、MCT组和对照组。前两组腹腔注射60mgZkgMCT（对照组注射等量生理盐水）诱导后，实验组颈外静脉注射含1×106MSCs的磷酸盐缓冲液（PBS），后两组注入等量PBS。4周后检测大鼠右心室收缩压（RVSP）；肺组织苏木素．伊红（HE）染色；肺组织分离mRNA，逆转录酶聚合酶链反应（***）法检测组织表达前体原ET-1mRNA的水平；酶联免疫吸附试验（ELISA）法测定血清ET-1的表达。统计数据进行成组t检验。结果MSCs颈外静脉移植4周后，实验组与MCT组比较RVSP明显下降[（35．6±8．4）mmHg（1mmHg=0．133kPa）比（47．2±10．5）mmHg，P〈0．05]；病理染色可见实验组与对照组比较肺小动脉壁明显变薄；肺组织前体原ET-1mRNA半定量显示实验组较MCT组表达减少（0．251±O．048比0．391±O．035，P〈0．05），血浆ET-1结果均显示对照组ET-1表达很少（2．23±0．43）ng／L，与MCT组比较，MSCs移植降低了ET-1的表达[（4．05±0．82）ng／L比（5．75±0．75）ng／L，P〈0．05]。结论MSCs颈外静脉移植可以抑制MCT对大鼠肺损伤作用，减少ET-1的mRNA及血清ET-1的表达。

摘要：背景:目前脑卒中尚无有效的根治方法。随着人们对神经系统再生与干细胞的认识逐渐加深,干细胞移植有望成为治疗脑卒中的新手段。目的:利用Scopus数据库文献检索和深度分析功能,对干细胞移植治疗脑卒中研究的近6年文献资料进行多角度的探讨分析。设计:文献计量学分析。资料提取:由第一作者以"neural stem cells(干细胞),stroke(脑卒中),cell transplantation(细胞移植)"为关键词检索Scopus数据库2006-01/2011-12的相关文献,并将分析结果及资料导出,以文字和图表的形式进行统计和计量分析,描述其分布特征。入选标准:纳入标准:检索干细胞移植治疗脑卒中研究相关的文献。文献类型包括研究原著、综述、会议记录及摘要、快报文章、编辑素材。排除标准:与文章目的无关的文献,大于6年较陈旧的文献,未发表的文章。主要数据判定指标:发表文献的国家地区分布、作者分布、机构分布、来源期刊、文献被引情况。结果:Scopus数据库2006/2011收录的文献中共检索到1045篇干细胞移植治疗脑卒中研究相关的文献,研究原著以517篇位居首位,其中有15篇可以确定为经典文献。在时间分布上,文献数量2006/2011总体呈上升趋势,来源出版物呈分散情况。目前已发表文献中以美国为主,占全球相关领域发稿量的39.8%。中国在过去6年间在数据库中收录文章总量中排在第2名,共发表88篇相关文章,占全球相关文章的8.4%。结论:通过文献计量学方法对来源于Scopus数据库关于干细胞移植治疗脑卒中的研究文献进行分析,可为了解该领域的概貌、现状和研究者进一步确定该领域研究的热点难点提供有价值的参考。

摘要：背景:缺血性脑血管病严重危害人类的健康,但现有的治疗措施对许多患者还未取得理想的效果,如何促进脑缺血患者受损神经功能的修复仍是目前研究的重点。目的:利用CNKI数据库文献检索,对干细胞移植在缺血性脑卒中治疗中的应用的文献资料趋势进行多层次探讨分析。设计:文献计量学分析。资料提取:以电子检索方式对CNKI数据库2006-01/2011-12有关干细胞移植在缺血性脑卒中治疗中的应用的文献进行分析,检索词"干细胞(stem cells);移植(transplantation);脑缺血(cerebral ischemia)",对检索的相关文献运用数据库的分析功能结合Excel软件绘制图表的功能进行分析,通过文字和图表的形式将统计和计量数据分析来描述其分布特征。入选标准:纳入标准:与干细胞移植在缺血性脑卒中治疗中的应用相关的基础和临床研究论文。排除标准:①与文章目的无关的文献。②重复研究的文献。③刊社信息。④未发表的文献。⑤需电话追踪和手工检索逐一分析的文献。⑥年鉴。主要数据判定指标:文献出版时间、文献数量、学科类别、研究机构、来源期刊、文献被引频次、文献下载频次、作者分布、基金资助情况和主要关键词进行相关分析。并对不同来源的干细胞移植在缺血性脑卒中治疗中应用的研究进行对比分析。结果:在CNKI数据库学术期刊收录2006/2011的文献中,共检索到231篇与干细胞移植在缺血性脑卒中治疗中的应用相关的文献。文献数量产出呈现波动状态,其中2007年和2009年文献产出数量最多;骨髓间充质干细胞,神经干细胞,羊膜间充质细胞是目前在缺血性脑卒中治疗中的应用中研究最多的细胞种类。《中国组织工程研究与临床康复》杂志发表文献量为36篇,占全部文献的15.6%。44篇干细胞移植在缺血性脑卒中治疗中应用的相关文献获得国家自然科学基金的资助。脑缺血,神经干细胞及骨髓间充质干细胞是发表文章使用最多的关键词。结论:CNKI数据库学术期刊关于干细胞移植在缺血性脑卒中治疗中应用的文献分析,可为中国从事脑血管病治疗的基础研究和临床实施的医务工作者进一步确定科研思路提供有价值的参考。

摘要：背景:脊髓损伤是中枢神经系统的严重创伤,是目前公认的疑难病之一。组织工程细胞移植为脊髓损伤治疗提供了新的思路,使损伤轴突修复、再生和恢复脊髓部分神经功能成为可能。目的:利用SCI数据库文献检索和深度分析功能,对神经干细胞移植治疗脊髓损伤研究的10年文献资料进行多角度的探讨分析。设计:文献计量学分析。资料提取:由第一作者以"neural stem cells(神经干细胞),spinal cord injury or spinal injury(脊髓损伤),cell transplantation(细胞移植),spinal transection(脊髓横断)"为关键词检索SCI数据库2002-01/2011-12的相关文献,并将分析结果及资料导出,以文字和图表的形式进行统计和计量分析,描述其分布特征。入选标准:纳入标准:检索神经干细胞移植治疗脊髓损伤研究相关的文献。文献类型包括研究原著、综述、会议记录及摘要、快报文章、编辑素材。排除标准:与文章目的无关的文献,大于10年较陈旧的文献,未发表的文章以及需电话追踪和手工检索逐一分析的文献。主要数据判定指标:以文献的类型、出版时间、发表文献的作者分布、学科类别、机构分布、国家地区分布、来源期刊、文献被引情况及基金资助机构进行相关分析。结果:SCI数据库2002/2011收录的文献中共检索到500篇神经干细胞移植治疗脊髓损伤研究相关的文献,研究原著以348篇位居首位,其中有15篇可以确定为经典文献。在时间分布上,文献数量2002/2011总体呈上升趋势,来源出版物呈分散情况,其中Journal of Neurotrauma《神经外伤杂志》发表文献量22篇,占全部文献的15.09%。其次为Journal of Neuroscience Research《神经科学研究杂志》21篇。结论:通过文献计量学方法对来源于SCI数据库关于神经干细胞移植治疗脊髓损伤研究的文献进行分析,可为了解该领域的概貌、现状和研究者进一步确定该领域研究的热点难点提供有价值的参考。